某猪场猪瘟与猪蓝耳病的免疫效果分析

余文武，郑晓林，刘旭川，李志祥，柴俊，张以芳

(云南农业大学动物医学院，云南 昆明 650201)

猪瘟和蓝耳病是严重危害我国养猪业的主要传染病，给我国养猪行业造成了巨大的经济损失，并被列为一类动物疫病，一直是我国重点防控的动物疫病[1]。随着我国养猪业不断的规模化发展，已研发了多种猪瘟和蓝耳病疫苗[2]。目前生产中使用的猪瘟疫苗主要有猪瘟组织冻干疫苗和猪瘟细胞冻干疫苗；猪蓝耳病疫苗有弱毒疫苗(CH-1R 株、R98 株、JXAI-R 株、 ATCCVR-2332株)和灭活疫苗(CH-1R株、NVDC-JXAR株)[3]。疫苗的使用使猪瘟等主要疫病的发病率和死亡率得到下降或控制，但部分猪场由于疫苗使用或免疫程序不当，仍然存在猪瘟和猪蓝耳病流行的风险[4]。蓝耳病疫苗毒株的多样性，也让很多养猪企业对于蓝耳疫苗的选择产生了困惑，因此，准确掌握疫病的流行动态、免疫抗体有计划的监测，了解猪场免疫状态，对降低传染病风险有重要意义[5]。

1 材料与方法

1.1 样品来源

2019年4月，无菌采集云南某规模化猪场公猪、后备母猪、怀孕前期、怀孕中期、怀孕后期、哺乳期母猪、仔猪至出栏各阶段猪血液样品。公猪全部采样，其他组别或年龄段猪各采5～6头，共计采样64份，无菌静脉采血，分离血清。采样猪均进行过猪瘟疫苗免疫，猪蓝耳疫苗免疫记录不祥。

1.2 主要试剂

猪繁殖与呼吸障碍综合征抗体ELISA检测试剂盒为美国爱德士(IDEXX)生物科技有限公司产品，猪瘟病毒抗体检测试剂盒为荷兰百测(BioChek)生物制品有限公司产品。

1.3 主要仪器与材料

酶标仪、恒温箱、离心机、洗瓶或洗板机、单道和多道微量移液枪、移液枪枪头、量筒、吸水纸、封条、蒸馏水或去离子水等。

1.4 猪蓝耳抗体检测方法及结果判定标准

猪繁殖与呼吸障碍综合征抗体检测按IDEXX试剂盒操作说明书进行。

结果有效性判定：为保证试验结果准确有效，阳性对照吸光度的平均值-阴性对照吸光度的平均值≥0.15,阴性对照吸光度的平均值≤0.15。

结果判定：S/P=(样品吸光度值-阳性对照吸光度的平均值)/(阳性对照吸光度的平均值-阴性对照吸光度的平均值)， S/P≥0.40为阳性，S/P<0.40为阴性。

1.5 猪瘟抗体检测方法及结果判定

猪瘟病毒抗体检测按BioChek公司试剂盒操作说明书进行。

结果有效性判定：为保证试验结果准确有效，阴性对照吸光度值的平均值<0.35。

阳性对照的平均值-阴性对照的平均值>0.15。

结果判定：S/P=(样品吸光度值-阳性对照吸光度的平均值)/(阳性对照吸光度的平均值-阴性对照吸光度的平均值), S/P≥0.500为阳性, S/P≤0.499为阴性。

2 结果与讨论

2.1 猪瘟抗体的检测结果

由表1、图1及图2可以看到猪瘟抗体检测结果，猪瘟抗体总阳性率平均为64.06%，但各组别存在较大差异，其中公猪、后备母猪、怀孕前期、怀孕中期、怀孕后期和哺乳期母猪抗体阳性率均为100%，说明这些组别的抗体较好，对猪瘟野毒感染有较强抵抗力。

检测30头仔猪、保育猪及育肥猪的三组样品抗体阳性率为23.33%，其中0～15d、16～30d、31～45d、46～75d、76～100d、100d至出栏猪的阳性率分别为60%、40%、0、0、20%、0(3/5、2/5、0/5、0/5、1/5、0/5)，猪抗体阳性率均在80%以下，说明这些组别的抗体较低，比较容易出现猪瘟野毒感染。

表1 不同组别或日龄阶段的猪瘟抗体检测结果

图1不同组别或日龄阶段猪的猪瘟病毒抗体S/P值

图2 不同组别或日龄阶段的猪在接种猪瘟疫苗后的抗体阳性率

2.2 猪蓝耳抗体检测结果

由表2、图3及图4可以看到猪蓝耳抗体的检测结果，检测猪蓝耳抗体总阳性率为54.69%，各组别存在较大差异，其中公猪、后备母猪、怀孕前期、怀孕中期、怀孕后期和哺乳期母猪抗体阳性率分别为50%、16.67%、0、80%、80%、40%(4/8、1/6、0/5、4/5、4/5、2/5)；检测30头仔猪、保育猪及育肥猪的抗体阳性率为66.67%，其中0～15d、16～30d、31～45d、46～75d、76～100d、100d至出栏猪的阳性率分别为60%、40%、40%、100%、100%、60%(3/5、2/5、2/5、5/5、5/5、3/5)。

除46～75d、76～100d两组外，其他各组抗体阳性率均在80%以下，如果本猪场注射过猪蓝耳疫苗，说明该猪场蓝耳抗体保护率低；如果未注射过疫苗，说明是野毒感染抗体，该猪场已经存在猪蓝耳野毒感染，淘汰阳性公猪[6]。

表2 不同日龄阶段的猪蓝耳病抗体检测结果

图3不同日龄阶段猪的猪蓝耳病病毒抗体S/P值

图4 不同日龄阶段的猪在接种猪蓝耳病疫苗后的抗体阳性率

以上通过统计计算得到不同日龄阶段猪的猪瘟抗体或猪蓝耳抗体S/P值，可以作为判定猪瘟或蓝耳抗体的阳性率的依据，并直观清晰的了解抗体的离散度[7]。统计柱状图可以直观了解每头猪检测样品抗体的高低。