兔抗胸腺细胞球蛋白联合环孢素对重型再生障碍性贫血患者VEGF、IL-17及IL-6表达的影响

林春燕 陈琼 吴挺柏 李丽羽 黄春辉

重型再生障碍性贫血是一种血液系统性疾病，临床表现为出血、感染及贫血综合征等，发病原因尚不明确，认为可能与化学药物、放射线及病毒感染等因素有关，一旦患病后严重威胁了患者的生命安全[1]。环孢素能够促进机体骨髓的造血功能，对干细胞的生长起到促进作用，但单独应用的疗效不佳。目前，强化免疫抑制治疗是治疗重型再生障碍性贫血的主要治疗方式。兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白是一种免疫抑制剂，可改善患者的血象，通过将患者血液循环中异常活化的免疫细胞清除后，导致补体依赖的细胞出现溶解与凋亡。研究显示，免疫抑制剂联合环孢素治疗可减少药物的使用剂量，提高机体耐受力[2]。白细胞介素（IL）-17、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）等为造血的负调控细胞因子，含量异常时会导致造血干细胞分裂受阻，进而发生凋亡[3]。鉴于此，本研究旨在探讨兔抗胸腺细胞球蛋白联合环孢素对重型再生障碍性贫血患者疗效及血清VEGF、IL-17 及IL-6 表达的影响。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015 年1 月-2020 年5 月本院收治的60 例重型再生障碍性贫血患者的临床资料进行回顾性分析。纳入标准：无药物过敏；治疗前未接受骨髓移植；临床资料齐全。排除标准：合并用药；合并严重心肝肺等功能障碍；合并恶性肿瘤；合并精神障碍疾病。根据治疗方法将患者分为对照组（n=30）和研究组（n=30）。本研究已经医院伦理委员会批准。

1.2 方法 对照组给予单纯环孢素（生产厂家：杭州中美华东制药有限公司，批准文号：国药准字H10 960122；规格：25 mg）治疗，环孢素的初始剂量为3～5 mg/kg，2 次/d，7 d 后测定血药浓度调整患者用药剂量与疗程，持续治疗6～12 个月。研究组在对照组基础上加用兔抗胸腺细胞球蛋白（生产企业：Genzyme Polyclonals S.A.S.，批准文号：注册证号S20150036，规格：5 mL∶25 mg）治疗，剂量为2.5 mg/（kg·d），5 d 为1 个疗程，如3 个月内无效可考虑再用第2 疗程。

1.3 观察指标与判定标准 （1）比较两组临床疗效，基本治愈：症状基本消失，6 岁以下者的血红蛋白（Hb）＞110 g/L，6 岁及以上者Hb＞120 g/L，白细胞水平≥4.0×109/L，血小板计数（BPC）≥80×109/L，1 年后未复发；缓解：症状大部分消失，6 岁以下者的Hb＞110 g/L，6 岁及以上者Hb＞120 g/L，白细胞水平≥3.5×109/L，血小板有一定程度的增加，3 个月内未恶化；明显进步：症状好转，Hb 水平增加≥30 g/L，且能维持3 个月；无效：症状和相关指标均未改善[4]。总有效=基本治愈+缓解+明显进步。（2）于治疗前后抽取两组3 mL 空腹静脉血，置于EDTA 真空管中抗凝，常温下离心10 min，于-20 ℃下低温保存。检测并比较两组治疗前后白细胞计数（WBC）、Hb、BPC、血清VEGF、IL-17及IL-6 水平。（3）比较两组不良反应发生情况。包括发热、皮疹、血压升高及毛发增生。

1.4 统计学处理 采用SPSS 20.0 软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（）表示，组间比较采用独立样本t 检验，组内比较采用配对t 检验；计数资料以率（%）表示，比较采用χ2检验。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较 研究组男14 例，女16 例；年龄0～14 岁，平均（4.95±0.63）岁；病程0.5～7.6个月，平均（4.01±0.69）个月。对照组男13 例，女17 例；年龄0～14 岁，平均（4.88±0.61）岁；病程0.5～7.3 个月，平均（4.02±0.67）个月。两组一般资料比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

2.2 两组临床疗效比较 研究组治疗总有效率高于对照组，差异有统计学意义（χ2=4.360，P=0.037），见表1。

2.3 两组治疗前后血清VEGF、IL-17 及IL-6 水平比较 治疗前，两组血清VEGF、IL-17 及IL-6 水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，两组血清IL-17 与IL-6 水均低于治疗前，而VEGF水平高于治疗前，差异均有统计学意义（P＜0.05）。治疗后，研究组血清IL-17 与IL-6 水均低于对照组，而VEGF 水平高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

2.4 两组治疗前后血象指标比较 治疗前，两组WBC、BPC 及Hb 水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，两组WBC、BPC 及Hb 水平均高于治疗前，且研究组均高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

2.5 两组不良反应发生情况比较 两组不良反应发生率比较，差异无统计学意义（χ2=0.130，P=0.717），见表4。

表1 两组临床疗效比较 例（%）

表2 两组治疗前后血清VEGF、IL-17及IL-6水平比较[pg/mL，（）]

表2 两组治疗前后血清VEGF、IL-17及IL-6水平比较[pg/mL，（）]

表2（续）

表3 两组治疗前后血象指标比较（）

表3 两组治疗前后血象指标比较（）

表3（续）

表4 两组不良反应发生情况比较 例（%）

3 讨论

重型再生障碍性贫血是一种以骨髓造血功能衰竭而引发全血细胞减少的血液系统疾病，病因较复杂，一旦患病还会影响机体的各项免疫功能[5-6]。因此，需采取及时、有效的治疗措施。临床上常采用免疫抑制治疗重型再生障碍性贫血。临床上常将环孢素A 应用于自身免疫疾病的治疗中，该药药效较强，且不良反应较少，通过对T 淋巴细胞的增殖与被激活产生抑制后，再选择性地抑制由T 淋巴细胞分泌的IL-17，以改善机体骨髓造血功能的被抑制状态，对造血干细胞的生长产生促进作用，但单一用药的治疗效果不明显。兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白是一种常用的免疫抑制剂，其通过产生多种造血调节因子对人体干细胞的增殖产生促进作用，并对造血干细胞的自身造血功能产生刺激[7]。相关研究显示，环孢素与兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白联合应用可提高治疗效果[8]。有学者认为，检测血清中IL-17 含量能够客观的观察出患者体内特异性T 细胞所分泌的细胞因子瞬时的变化特征[9]。IL-6 为活化T 细胞和成纤维细胞共同生成的淋巴因子，在炎性反应的病理早期与疾病进展中均可出现过表达[10]。VEGF 能够维持机体造血干细胞的生存、分化及发育，因此在重型再生障碍性贫血患者血清中，VEGF 呈现出低表达状态[11-13]。

本研究结果显示，研究组治疗总有效率高于对照组（P＜0.05）。治疗后，研究组血清IL-17 与IL-6 水均低于对照组，而VEGF 水平高于对照组（P＜0.05）。治疗后，两组Hb、BPC 及WBC 水平均高于治疗前，且研究组均高于对照组（P＜0.05）。两组不良反应发生率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结果说明兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白联合环孢素能显著提高重型再生障碍性贫血患者的疗效，调节造血因子水平和血象指标。分析原因可能为：（1）兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白能够激活T 细胞所抑制的骨髓造血功能，并刺激其释放造血因子，以改善机体的造血功能[13-16]。（2）环孢素能够抑制T 细胞生成IL-6、IL-17，避免其对细胞毒性T 细胞产生激活作用[17-18]。（3）两种药物联合使用可抑制T 细胞对VEGF 等造血因子的调控，消除T 细胞对造血干细胞造成的破坏，促进造血干细胞增殖和重建[19-20]。

综上所述，兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白联合环孢素治疗重型再生障碍性贫血患者的效果显著，可明显改善VEGF、IL-17、IL-6 水平和血象，且不良反应较少，具有较高的安全性，值得应用。