细菌耐药性监测在临床微生物检验中的应用价值分析

林楚楚 郑文萍

深圳市人民医院感染管理科，广东深圳 518020

细菌耐药性是在临床药物治疗过程中由于细菌耐药性基因的存在导致细菌自身耐药性的产生，以及同一类抗菌药物被长期不合理使用等因素，造成抗菌药物对菌株的作用效果急剧降低[1]。并且耐药菌株被繁殖的同时，细菌对抗菌药物的耐药性也随之大幅度提高[2]。患者若不能得到及时有效的治疗，随着病情恶化可严重危害其健康及生命安全。因此，进行有效的细菌耐药性监测尤为必要[3]。本研究旨在通过对临床常见标本的细菌耐药性监测数据进行分析，评估其在临床微生物检验中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2013 年11 月～2016 年11 月在我院临床所收集的尿标本、血液标本、痰标本及分泌物标本中分离出的500 例致病菌株，作为研究对象进行对比分析。其中男性标本255 例，女性标本245 例，年龄11 ～76 岁，平均（39.98±6.12）岁。痰液标本122 例，咽喉拭子标本78 例，血标本42 例，中段尿标本58 例，脑脊液标本13 例，分泌物标本67 例，粪便标本70 例，胸水标本23 例，腹水标本17 例，其他标本10 例。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经本院伦理委员会批准。

1.2 方法

将收集的尿、血液、痰及分泌物标本在生物安全柜中接种于血琼脂培养基及巧克力培养基上，置于培养箱内培养，并肉眼观察其生长状况。若有细菌生长，需进一步从菌落的大小、形状、边缘的形状、颜色、表面光滑或粗糙、透明度等形态特征上，观察菌落是否为纯一菌落，挑选可疑的单个菌落再次划线，进行纯化培养。然后采用VITEK 系统进行细菌自动化鉴定试验。使用肉汤稀释的方法进行抗菌药物最小的抑菌浓度检测[4]。

1.3 统计学处理

将本研究结果录入SPSS20.0 软件进行统计描述。标本中致病菌株、耐药性检测结果均由双人录入并利用[n（%）] 表示，计数资料行χ2检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 致病菌株分布情况

对于临床所收集的尿标本、血液标本、痰标本及分泌物标本中分离出的500 例致病菌株中，其中革兰阳性菌为148 株、革兰阴性菌为352 株。其中凝固酶阴性葡萄球菌检出率最高，其次为铜绿假单胞菌、大肠埃希菌。对于临床所收集的尿标本、血液标本、痰标本及分泌物标本中分离出的500 例致病菌株中，革兰阴性菌出现的比例高于革兰阳性菌（χ2=166.464，P＜0.05）。见表1。

2.2 细菌耐药性监测结果分析

变形杆菌对氨苄西林耐药性最高为92.09%，肠杆菌属对头孢唑林的耐药性最高为42.78%，金黄色葡萄球菌中MRSA[ 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus）] 对 青霉素和氨苄西林耐药性均达到100%，凝固酶阴性葡萄球菌中MRCNS 及MSCNS 对青霉素及氨苄西林耐药性分别为100%、100%、96.72% 及89.89%，肠球菌属对头孢唑林的耐药性最高为32.48%。见表2。

表1 致病菌株分布情况[n（%）]

表2 细菌耐药性监测结果分析（%）

3 讨论

自1928 年青霉素问世以来，20 世纪40 年代青霉素投入使用，抗生素对人体健康做出了巨大贡献[5]，由于耐药性基因的存在导致细菌自身耐药性产生，并且抗生素在临床治疗中被大规模应用[6]，基因突变引起细菌耐药、细菌表型耐药、持留现象、细菌固有耐药、群体感应与微生物耐药等造成临床多重耐药菌株生成，其在很大程度上抑制了临床用药效果。耐药菌的出现，可能导致多种感染陷入到无药可用的状态[7-9]。保护人体对抗菌药物的耐药性成为了目前至关重要的考虑因素。2011 年，WHO 提出了抵御耐药性的号召，并在2014 年公布了全球抗生素耐药性报告[10-12]。2016 年9 月杭州举行的二十国集团领导人峰会重新提出了抗生素耐药性的问题。预计到2050 年全球每年可能有一千万人由于耐药菌感染而死亡。我国在2016 年8 月下旬引发了《遏制细菌耐药国家行动》，将从全国大局出发，综合治理抗生素使用，应对抗生素耐药[13-15]。

为尽量减少因抗生素的过度使用而导致药物的使用效果受到极大的影响。细菌耐药性监测在临床微生物检验中起到了至关重要的作用。临床应注重细菌耐药性监测在临床微生物检验中的作用，提升临床治疗的有效率，最大程度上保证药物被适量使用。

本研究中革兰阴性菌检出率70.40% 显著高于革兰阳性菌29.6%，且细菌中凝固酶阴性葡萄球菌检出率最高，其次为铜绿假单胞菌、大肠埃希菌。对不同菌株进行细菌耐药性监测，不同菌株对不同抗菌药物的耐药性不同，肠杆菌属对氨苄西林（9.56%）较其他菌株敏感度高，肠球菌对左氧氟沙星敏感度高（6.72%），MSSA( 甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌Methicillin-Sensitive Staphylococcus Aureus，MSSA.) 对左氧氟沙星耐药性差（5.56%）。分析认为，ESBLs( 超广谱β- 内酰胺酶，Extended Spectrum Beta-Lactamases) 在大肠埃希菌以及克雷伯菌在使用过程中被生成，因而β- 内酞胺类等药物被大肠埃希菌以及克雷伯菌在很大程度上起到抗药作用及耐药作用，临床用药治疗的效果被极大程度上抑制了，致药物的使用效果受到极大的影响。β- 内酞胺类- 酶抑制剂复合物对于头孢他啶耐药率低，敏感性好，可以在临床治疗过程中被广泛使用。左氧氟沙星对铜绿假单胞菌的敏感度高，耐药性差，可以在临床治疗过程中被开展。细菌耐药性监测在临床微生物检验中的应用开展，保证药物的治疗效率，最大程度上降低临床上抗生素的过度使用，为临床合理用药起到决定性作用。

综上所述，在细菌耐药性逐渐升高及多重耐药菌株的生成的环境下，细菌耐药性监测在临床微生物检验中起到至关重要的作用，使得细菌耐药性的变化形势被准确的掌握。进而可给予患者适量的药物进行临床治疗，最大程度上减少抗生素的过度使用，为临床合理操作提供较高的科学依据，值得推广应用于临床。