血清HNP1-3、t-PAIC联合检测在冠心病诊断中的价值

刘文武，罗显元，葛以山，王学斌，李英，季伟敏，尹薇，朱晓晴，王杰

(苏州科技城医院·南京医科大学附属苏州科技城医院，江苏苏州215153)

冠心病是临床最常见的心血管疾病之一。近年来，随着人们生活习惯和饮食结构的改变，我国冠心病的发病率逐年升高，患者呈现年轻化趋势。有报道显示，目前我国居民冠心病患病率为0.77%～1.24%，较10年前上升了2.3倍[1]。冠心病的主要病理变化是冠状动脉粥样硬化导致冠状动脉管腔狭窄、血栓形成并导致心肌血流供应量降低[2]。研究[3]表明，冠状动脉血管内皮炎症反应具有促进冠状动脉粥样硬化形成的作用。人中性粒细胞多肽1-3(HNP1-3)是一种由中性粒细胞分泌的小分子多肽[4]。研究[5]发现，在无病原体感染情况下HNP1-3可诱发机体产生炎症反应。纤维蛋白是动脉粥样硬化斑块的组成部分。正常情况下，机体纤维蛋白溶解系统可经严格的调控将富含纤维蛋白的血栓降解重塑。纤溶酶原激活剂和纤溶酶原抑制剂-1是调控纤维蛋白溶解系统的重要分子，两者结合可生成组织型纤溶酶原激活物-抑制剂复合物(t-PAIC)[6]。t-PAIC水平可反映纤维蛋白溶解系统情况。2017年8月～2018年12月，我们观察了冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC变化，并探讨血清HNP1-3、t-PAIC联合检测对冠心病的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2017年8月～2018年12月我院收治的冠心病患者116例作为研究组，男71例、女45例，年龄41～78(59.43±6.75)岁。纳入标准：①患者符合美国心脏病协会制定的冠心病诊断标准[7]，并经冠状动脉造影确诊；②患者首次发病，年龄≥18周岁；③患者对研究知情同意且签署同意书，临床资料完整。排除标准：①合并先天性心脏病、心脏瓣膜病、心肌病等患者；②近3个月内有感染、服用抗菌药物和应用激素治疗的患者；③合并恶性肿瘤、血液系统疾病、肝脏疾病等影响凝血功能的患者；④妊娠期或哺乳期妇女；⑤存在认知功能障碍或无法正常交流者。研究组均进行冠状动脉造影检测，并计算Gensini积分[8]，根据Gensini积分将冠心病患者分为轻度病变组(051.4分)28例。另选择同期来我院查体健康的志愿者110例作为对照组，男66例、女44例，年龄40～78(58.12±7.34)岁。两组年龄、性别比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院伦理委员会同意。

1.2 血脂及血清HNP1-3、 t-PAIC检测 研究组入院第1天采集清晨空腹外周静脉血5 mL，对照组于体检当日采集空腹外周静脉血8 mL，经3 500 r/min离心5 min，分离上层血清。为避免储存时间对结果的影响，所有血样需在采集后2 h内进行检测。采用日立5300全自动生化分析仪检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。应用酶联免疫吸附法测定血清HNP1-3水平，应用化学发光法测定血清t-PAIC水平，试剂盒购自Beckman-Coulter公司，严格按照试剂盒操作说明进行。

2 结果

2.1 两组血脂及血清HNP1-3、t-PAIC水平比较 研究组TC、TG、LDL-C及血清HNP1-3、t-PAIC水平高于对照组(P均<0.05)，HDL-C水平低于对照组(P<0.05)，见表1。

表1 两组血脂及血清HNP1-3、t-PAIC水平比较

2.2 不同病变程度冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC水平及Gensini积分比较 不同病变程度患者血清HNP1-3、t-PAIC水平及Gensini积分比较差异有统计学意义(P<0.05)，且随着冠状动脉病变程度的升高，冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC水平及Gensini积分呈逐渐升高趋势(P<0.05)，见表2。

2.3 冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC水平与冠状动脉病变程度及血脂的相关性 经Pearson相关性分析显示，冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC水平与Gensini积分呈正相关(r分别为0.317、0.425，P均<0.05)，血清HNP1-3与TC、TG、LDL-C、HDL-C无相关性(r分别为0.272、0.258、0.276、-0.157，P均>0.05)，血清t-PAIC水平与TC、TG、LDL-C、HDL-C无相关性(r分别为0.256、0.231、0.271、-0.132，P均>0.05)。

表2 不同病变程度冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC水平比较

注：与轻度病变组比较，#P<0.05；与中度病变组比较，*P<0.05。

2.4 血清HNP1-3、t-PAIC对冠心病诊断的效能分析 血清HNP1-3诊断冠心病的ROC曲线下面积(AUC)为0.832，理论阈值为7.8 pg/mL，灵敏度为0.832，特异度为0.794，约登指数为0.626；血清t-PAIC诊断冠心病的AUC为0.875，理论阈值为9.8 pg/mL，灵敏度为0.903，特异度为0.843，约登指数为0.746；血清HNP1-3、t-PAIC联合诊断冠心病的灵敏度、特异度分别为0.931(108/116)和0.891(98/110)，约登指数为0.822。

3 讨论

冠心病发生的主要病理基础是冠状动脉粥样硬化。而动脉内膜脂质沉积、微血栓形成和炎症反应是导致冠状动脉粥样硬化形成和破溃的重要条件。HNP1-3是一种内源性小分子多肽，最初发现HNP1-3主要作用于病原微生物的细胞膜，具有抗病原微生物的作用[9]。近年来研究发现，在无病原体感染情况下机体亦可出现HNP1-3异常高表达，并发挥免疫调节和诱发机体产生无菌性炎症的作用[10]。Ungan等[11]报道指出，动脉硬化发生存在HNP1-3异常高表达。2008年Quinn 等[12]报道，冠心病患者外周血单核细胞中存在HNP1-3异常高表达。赵劲波等[13]研究认为，在巨噬细胞吞噬低密度脂蛋白中可导致HNP1-3分泌增多，并诱发无菌性炎症。本研究发现，冠心病患者血清HNP1-3水平升高，进一步分析发现冠心病患者血清HNP1-3水平随冠状动脉病变程度加重而升高，患者血清HNP1-3水平与Gensini积分呈正相关关系。提示HNP1-3在冠心病发生发展中起重要作用。分析其原因可能与以下几方面有关：①冠心病患者血液中低密度脂蛋白较多，巨噬细胞吞噬低密度脂蛋白过程中，导致HNP1-3分泌增多；②冠心病患者冠状动脉血管内皮细胞发生炎症反应，导致血清HNP1-3水平升高；③在冠状动脉粥样硬化形成中，单核细胞、巨噬细胞吞噬脂质，导致单核细胞、巨噬细胞表达HNP1-3水平升高。

纤维蛋白异常沉积是动脉粥样硬化发生的另一重要机制，是血管内皮细胞损伤的启动因素[14]。正常情况下，机体纤维蛋白溶解系统可经过严格的调控将富含纤维蛋白的血栓降解重塑。纤维蛋白溶解系统的激活可致纤溶酶原转化为纤溶酶，这一过程需纤溶酶原激活剂的作用。而纤溶酶原激活物抑制剂-1则可与纤溶酶原激活剂结合，起到抑制纤维蛋白溶解系统的激活作用[15]。t-PAIC是纤溶酶原激活剂和纤溶酶原抑制剂-1集合的产物，其水平可反映纤溶酶原激活物抑制剂-1释放情况，进而反映机体纤维蛋白生成情况[16]。Zhao等[17]通过基因敲除载脂蛋白E构建动脉粥样硬化小鼠模型，结果发现与野生型小鼠相比，模型组血浆t-PAIC升高3倍以上。Vousden等[18]报道，冠心病患者内皮细胞组织型纤溶酶原激活物和纤溶酶原激活剂抑制剂表达增多，导致血清t-PAIC水平升高。本研究结果显示，冠心病患者血清t-PAIC水平升高，同时发现，冠心病患者血清t-PAIC水平随冠状动脉病变程度升高而升高，患者血清t-PAIC水平与Gensini积分呈正相关关系。分析其原因可能是由于冠心病患者因各种原因导致血管内皮细胞损伤，纤维蛋白溶解系统异常激活，导致t-PAIC生成增加；同时生成的纤维蛋白异常沉积促进了冠状动脉病变程度升高。而冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC水平与TC、TG、LDL-C、HDL-C水平无相关性，表明冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC水平升高与血脂无关。

目前临床上主要依据症状、心电图和冠状动脉造影对冠心病进行诊断。其中心电图是心脏检查的常规手段，但其诊断具有一定主观性，且常规心电图对冠心病诊断敏感性较低[19]。冠状动脉造影虽然是诊断冠心病的“金标准”，但由于冠状动脉造影是一种有创检查，不适合作为筛查和常规检查[20]。血清总胆固醇、血脂等常规检查虽然可为冠心病的诊断提供依据，但这类因子特异性较差。近年来关于冠心病诊断取得了一定进展，其中外周血标志物是诊断冠心病的重要方法。肌钙蛋白、心肌酶谱等对心肌梗死等有很好的特异性，但该类分子仅在心肌损伤时有变化，在冠心病早期变化不大。本研究中结果显示，以HNP1-3≥7.8 pg/mL作为诊断的临界值，HNP1-3对冠心病诊断的灵敏度为0.832，特异度为0.794；以t-PAIC≥9.8 ng/mL作为诊断的临界值，t-PAIC对冠心病诊断的灵敏度为0.903，特异度为0.843。两者联合检测对冠心病诊断的灵敏度和特异度则升高为0.931和0.891。表明血清HNP1-3、t-PAIC联合检测对冠心病具有较好的诊断价值。同时由于血清学诊断操作简便，可重复进行，适合在基层医院推广应用。但本研究中由于研究对象做了限定，研究对象为冠心病患者，故其特异性不能完全体现出来，在临床中糖尿病、心肌梗死、脑梗死等患者也可发生血清HNP1-3、t-PAIC异常升高，因此应予以甄别。

综上所述，冠心病患者血清HNP1-3、t-PAIC异常升高，其水平随冠状动脉病变程度升高而升高，并与Gensini积分呈正相关关系，提示HNP1-3、t-PAIC在冠心病发生发展中起到重要作用，血清HNP1-3、t-PAIC联合检测有助于冠心病诊断。