573例女性不孕症患者血清AsAb、AEmAb、AZpAb、AhCGAb、ACPAb、ATAb检测结果分析

王小花，俞岩，叶文娇，王茹，钟桂兰

(海南省妇女儿童医学中心 海南省妇幼保健院，海口570206)

不孕症是一种特殊的生殖健康缺陷，其医学定义为在结婚至少1年内未采取任何避孕措施，且性生活正常(1周≥2次)而未怀孕的情况[1]。根据曾经是否有受孕的情况，不孕症主要分为原发性不孕(从未受过孕)和继发性不孕(曾经受过孕[2])。据WHO调查结果显示，我国有10%～15%的已婚夫妇存在不孕不育，其中女性不孕占25%～36%[3]。排卵障碍、输卵管堵塞、子宫内膜异常以及宫颈狭窄等是导致女性不孕的常见因素[4]。此外，近几年生殖免疫导致女性不孕的情况越来越多，逐渐受到临床专家的关注[5]。抗精子抗体(AsAb)、抗子宫内膜抗体(AEmAb)、抗心磷脂抗体(ACPAb)、抗透明带抗体(AZpAb)、抗人绒毛膜促性腺激素抗体(AhCGAb)及抗滋养层抗体(ATAb)是与不孕有关的器官特异性自身抗体[6]。所以，本研究拟通过分析573例女性不孕患者血清中这6种抗生殖免疫抗体检测结果，了解抗生殖免疫抗体的检测能否为女性不孕的临床诊断及治疗提供帮助。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 经海南省妇幼保健院医学伦理委员会批准后，选取2017年1月～2019年2月在本源就诊的女性不孕症患者。纳入标准：①原发或继发不孕，不孕期>2年；②符合《妇产科学》中不孕的诊断标准；③夫妻性生活正常，丈夫精液正常；④患者及家属知情同意。排除标准：①有肝肾功能障碍、恶性肿瘤、自身免疫性疾病等；②近3个月内有激素治疗史。共收集女性不孕症患者573例(不孕组)，年龄(29.75±8.15)岁，BMI(22.80±2.60)kg/m2，其中原发性不孕370例、继发性不孕203例。同时选取有正常妊娠史妇女200例作为对照组，年龄(30.10±6.43)岁，BMI(22.97±2.43)kg/m2。两组年龄、BMI具有可比性。

1.2 6种抗生殖免疫抗体检测方法 在研究对象清早空腹时，分别抽取外周静脉血4 mL；自然凝集后，以3 000 r/min离心15 min，分离上清液，于-60 ℃冰箱中冻存备用。采用间接ELISA法检测血清AsAb、AEmAb、AZpAb、AhCGAb、ACPAb、ATAb，所用试剂盒均购于中美合资北京贝尔生物工程有限公司，操作过程严格按照说明书步骤进行[7]。应用雷杜RaytoRT-2100C酶标分析仪(上海艾研生物科技有限公司)检测6种抗体在波长450 nm时的吸光度(OD)值，凡样品孔OD值﹥1即为阳性。

1.3 统计学方法 采用SPSS19.0统计软件。计数资料以百分率表示，组间比较行χ2检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不孕组和对照组6种血清抗生殖免疫抗体比较 不孕组血清AsAb、AEmAb、AZpAb、AhCGAb、ACPAb、ATAb阳性率均高于对照组(P均<0.05)，见表1。

表1 不孕组和对照组6种血清抗生殖免疫抗体阳性率比较(%)

注：与对照组比较，*P<0.05。

2.2 不孕组不同年龄患者6种血清抗生殖免疫抗体比较 见表2。

表2 不孕组不同年龄患者6种血清抗生殖免疫抗体比较(%)

注：与年龄≥30岁者比较，P均﹥0.05。

2.3 不孕组原发性和继发性患者6种血清抗生殖免疫抗体比较 见表3。

表3 不孕组原发性和继发性患者6种血清抗生殖免疫抗体比较(%)

注：与继发性不孕者比较，*P<0.05。

3 讨论

对育龄妇女而言, 不孕症是临床常见的疾病。随着生活节奏的加快以及人们生活方式的改变，女性不孕的发病率呈逐年上升趋势，不仅降低了女性的生活质量，还影响了婚后家庭和睦[8]。据统计[9]，不明原因造成的不孕患者依然占10%～20%。有研究表明，患者自身生殖免疫情况与不明原因导致的不孕症之间存在密切联系[10]。生殖免疫抗体可通过多种途径干预正常的妊娠过程，如降低精子活性、阻碍精卵结合、阻碍受精卵着床、抑制胚胎发育等；在体内逐渐增多的生殖免疫抗体不仅会造成不孕,还会导致不良妊娠结局,对患者与胎儿的生命健康造成极大的威胁[11]。

AsAb是最常见的抗生殖免疫抗体，由于免疫耐受和女性生理屏障等因素，女性一般不产生AsAb。但如果性生活发生在女性生殖道黏膜破损时，精子抗原极易穿过破损的黏膜上皮屏障，刺激B淋巴细胞产生AsAb[12]。AsAb可从多个途径造成不孕和流产，如影响精子的运送、降低精子活性，抑制精子穿透宫颈黏液、放射冠和透明带，阻碍精卵结合等[13]。AEmAb是一种自身抗体，通过与子宫内膜中的抗原结合发生一系列免疫病理反应。例如：激活补体系统来损伤子宫内膜腺体功能，降低糖原的分泌等，从而使胚胎获得营养不足，受精卵着床和胚囊发育受阻，最终造成不孕及早期流产[14,15]。hCG是一种由胎盘合体滋养细胞分泌的、用来维持早期妊娠的糖蛋白激素。AhCGAb则干扰hCG对胎儿的生理保护，致使流产的发生[16]。AZpAb是女性体内针对自身透明带组织产生的抗体，可以阻碍精子穿过透明带与卵子结合，从而影响受精和受精卵着床[17]。反复和习惯性流产的患者中ACPAb阳性率较高，可见ACPAb与流产密切相关，其损伤机制主要有激活血小板凝集系统促胎盘供血凝集、收缩血管、降低胎盘血流量等[18]。

本研究结果显示，不孕组血清AsAb、AEmAb、AZpAb、AhCGAb、ACPAb、ATAb阳性率均高于对照组，说明血清生殖免疫抗体升高是导致女性不孕的因素之一；不孕组年龄<30岁与≥30岁患者血清AsAb、AEmAb、AZpAb、AhCGAb、ACPAb、ATAb阳性率比较差异无统计学意义，提示生殖免疫抗体作为检测女性不孕指标时不受年龄的影响。继发性不孕患者血清AEmAb、AhCGAb、ACPAb阳性率高于原发性不孕患者，血清AsAb、AZpAb、ATAb阳性率比较差异无统计学意义。这表明在继发性不孕进展中，AEmAb、AhCGAb和ACPAb可能发挥着较大的作用；其原因可能是子宫内膜受损能促进AEmAb、AhCGAb 的产生，而造成子宫内膜受损最常见的原因就是患者流产，所以继发性不孕者体的AEmAb、AhCGAb阳性率高；而ACPAb阳性的孕妇在妊娠早期易反复流产，后期易导致胎儿宫内死亡，所以继发性不孕患者ACPAb阳性检出率高于原发性不孕患者。由此可见，生殖免疫抗体在女性不孕的过程中有较高的阳性表达率，是影响生殖的重要免疫因素，且部分生殖免疫抗体对区别原发性和继发性不孕症也有一定的临床价值。