快速免疫组化技术检测在前列腺穿刺组织冰冻切片诊断中的应用价值

河南省肿瘤医院 郑州大学附属肿瘤医院（450003）王大鹏

1 资料与方法

1.1 临床资料 研究对象为我院从2017年2月～2018年4月医院所选取的60例前列腺穿刺标本，经病理诊断为前列腺癌20例，良性前列腺增生40例。年龄为50～84岁，平均年龄为（67±11.2）岁。取所有病例组织冰冻切片，连续做6μm，取每例4张空白的冰冻切片。冰余组织经石蜡包埋连续4μm切片。

1.2 方法 经快速免疫组化染色检测留取的空白冰冻切片，冰余组织石蜡切片经常规免疫组化染色检测。以PBS代替一抗为阴性，已知阳性对照组为阳性对照组组。常规石蜡切片免疫组化染色方法操作步骤：切片放在67℃的烘烤箱中，并进行2h的烘片，脱蜡至水，经pH值为7.4的PBS至少冲洗3次，每次冲洗时间3分钟；取适量pH6.0柠檬酸盐缓冲液，加到微波盒中，加热至沸腾，之后脱蜡水化后组织，取组织切片放在耐高温的塑料架上，放入沸腾缓冲液中，微波炉中档温度加热10分钟，取出后自然冷却，并用蒸馏水进行冲洗。

快速免疫组化染色法的操作步骤：冰冻切片放于冷甲醇4℃环境下固定1分钟，在自然环境下晾干15s，经PBS液体冲洗1次，每次冲洗10s；加即用型一抗放于37℃环境下，孵育10分钟，经PBS冲洗3次，每次冲洗时间20s；加即用型的试验试剂，放于37℃环境下，孵育5分钟，经PBS进行3次冲洗，每次冲洗时间20s。

1.3 判断标准 评价P40、34βE12、p504S阳性表达标准，并对比两种检测方法的阳性率。P40阳性表达在基底细胞胞核；34βE12阳性表达基底细胞胞质，p504S阳性表达腺体上皮细胞胞质[1]。

1.4 统计学分析 数据处理工具为SPSS20.0。不同组间计数资料分别用x2检验，有统计学意义P＜0.05表示。

附表 P40、34βE12、p504S在前列腺穿刺组织阳性表达（n）

2 结果

快速免疫组化检测：前列腺增生组织中的P40、34βE12阳性率分别为97.5%、92.5%，但在前列腺癌中均为阴性表达，p504S前列腺增生组织为阴性表达，而前列腺癌阳性率为95.0%；常规免疫组化法：前列腺增生P40、34βE12阳性率分别为95.0%、92.5%，但在前列腺癌中为阴性表达；前列腺增生中p504S阳性表达率为2.5%，而前列腺癌的阳性表达为90.0%。三种抗体在前列腺癌、前列腺增生中组织表达差异显著，存在统计学意义（P＜0.05），见附表。

3 讨论

临床常用的前列腺基底细胞标记抗体分别为34βE12、P63，前列腺癌细胞的标记抗体为p504s。P40为一种临床病理研究新提出的诊断标志物，而且一些研究已经证实其高度特异性性，可用于腺癌与肺鳞状细胞癌的诊断[2]。为进一步明确其诊断价值，本次研究中，应用快速免疫组化联合P40、34βE12、p504S在前列腺组织中表达，鉴别前列腺良恶性病变。研究结果表明，快速免疫组化检测与常规免疫组化法结果为P40、34βE12、p504S的阳性表达无明显差异（P＞0.05），但前列腺增生与前列腺癌中的P40、34βE12、p504S的阳性表达差异显著（P＜0.05）。而且研究中存在两种免疫组化试验结果不一致情况，分析可能是因切片组织处理不同，相较于石蜡切片，冰冻切片能更完整保留组织中抗原，也有可能中操作误差导致。对比两种检测方法，快速免疫组化抗体表达定位准确、背景清晰，且无干扰信号，检测准确率较高。

综上所述，前列腺癌初期无明显增加，但鉴于其发病率不断增加，为了提高患者治疗效果，临床提出早期筛查快速诊断，为临床治疗提供准确的病理检查结果，并指导临床治疗选择有效的前列腺癌治疗效果，临床应用价值显著。