复合真菌多糖调节免疫活性研究

摘 要：真菌多糖具有多方面的生物活性。本文选取多种食用真菌，提取复合真菌多糖溶液，测定其多糖含量及免疫调节活性。结果表明：溶液中多糖含量为4.82%，中剂量组、高剂量组能显著提高免疫低下小鼠的机体免疫功能，具有免疫调节功效。

关键词：复合真菌多糖;使用真菌;免疫调节

食用真菌是我国的一大产业。多糖是由多个单糖分子缩合、失水而成，是一类分子结构复杂的糖类物质。研究表明，食用真菌所含的真菌多糖具有多方面的生物活性，如免疫调节、抗肿瘤、抗病毒等方面，因此对真菌多糖进行研究具有十分重要的意义[1-2]。

1 复合真菌多糖溶液制备

选取香菇、茯苓、灵芝和猴头菌等干燥食用真菌，混合粉碎过筛，加入3倍体积（重量）的水，煎煮30 min，

离心;沉淀继续加水，重复煎煮1次，离心，合并离心上清液，减压浓缩至原重量。

2 多糖含量测定

除去样品中的蛋白质后，利用还原糖的还原特性，以次甲基蓝为指示剂，先加入定量铁氰化钾溶液，然后用葡萄糖标准滴定液进行氧化还原滴定，根据葡萄糖标准滴定液的消耗量，计算还原糖含量，最终得出多糖含量。

3 免疫调节实验

3.1 实验动物

SPF级小鼠，体重：20～30 g，合格证号：44002100010104，由南方医科大学实验动物中心提供。适应性饲养3天后进行实验。

3.2 主要试剂及仪器

主要试剂：环磷酰胺、西班牙琼脂糖，购于瑞舒生物科技有限公司;冻干豚鼠血清（补体）、兔抗绵阳红细胞抗体（溶血素），购于郑州生物科技有限公司。

主要仪器：电子分析天平AE240、高速冷冻离心机、微量取样器。

3.3 实验方法

将小鼠随机分成正常对照组、模型对照组、复合多糖低剂量组、中剂量组和高剂量组。每组10只（每组用15只，防止部分小鼠死亡）。参考FDA推荐量，以人体10倍剂量为低剂量组，20倍剂量为中剂量组，30倍剂量为高剂量组对各组小鼠灌胃：低剂量组3.3 mL/（kg·d）（以体质量计，下同），中剂量组灌胃6.6 mL/（kg·d），高剂量组9.9 mL/（kg·d），模型组和正常对照组灌胃蒸馏水，灌胃量为0.01 mL/g，每天一次，连续30天。模型对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组均于首次给药后第1、3、5、17、19天和21天皮下注射环磷酰胺40 mg/kg，1次/天，建立免疫功能低下小鼠模型;正常对照组小鼠皮下注射等量生理盐水。于末次给药后，各组小鼠禁食不禁水12 h，然后进行各免疫指标测定。

将持续灌胃30 d的小鼠称质量后引颈处死，解剖取小鼠脾、 胸腺， 称质量，计算脾脏指数、胸腺指数。

4 实验结果

实验测得多糖含量为4.82%，动物实验表明（表1所示），模型组脾脏指数、胸腺指数均低于其他各组，和空白组相比，差异有显著统计学意义（P<0.01），表明环磷酰胺降低了模型小鼠的脾脏指数、胸腺指数;复合真菌多糖中剂量组、高剂量组的脾脏指数、胸腺指数高于模型组，且中剂量组与模型组的差异有统计学意义（P<0.05），高剂量组与模型组的差异有显著统计学意义（P<0.01），表明复合真菌多糖中剂量组、高剂量组可提高免疫低下小鼠的脾脏、胸腺指数。

表中数据用平均值±标准差表示;*、**分别代表与模型组相比在P<0.05和P<0.01水平上的差异。

5 结论

本文采用环磷酰胺作为免疫抑制剂，建立了免疫低下模型小鼠，研究复合真菌多糖对模型小鼠的免疫调节作用。结果表明，复合真菌多糖中剂量组、高剂量组能显著提高免疫低下小鼠的机体免疫功能，具有免疫调节功效。对复合真菌多糖相关产品的开发具有参考意义。

参考文献

[1]欧阳天贽，李小定，荣建华.真菌多糖抗肿瘤及免疫调节作用研究进展[J].天然產物研究与开发，2006，18（3）：524-528.

[2]郭春沅.真菌多糖的免疫调节作用[J].中国食用菌，2000，19（3）：6-7.

作者简介：周建湘（1988—），男，汉族，湖南湘潭人，硕士，工程师。研究方向：食品生物技术、药品研发。