VEGF、EGFR及CD40检测在鉴别良恶性胸腔积液中的价值

丁彦 周建荣 帅萍 廖长风 王颖 袁小亮

[摘要] 目的 探討血管内皮生长因子（VEGF）、表皮生长因子（EGFR）及CD40检测在鉴别良恶性胸腔积液中的价值。 方法 选取2015年6月～2017年6月于赣南医学院第一附属医院住院并确诊为肺癌合并胸腔积液的患者60例为观察组，选取同期住院的结核性胸膜炎合并胸腔积液的患者60例为对照组，检测所有患者的胸腔积液标本，并比较两组VEGF、EGFR及CD40的表达水平，采用受试者工作特征曲线（ROC）分析各项指标对恶性胸腔积液的诊断价值。 结果 观察组胸腔积液中VEGF、EGFR及CD40的表达水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。ROC曲线分析显示，VEGF诊断恶性胸腔积液的曲线下面积为0.840，以893.50 pg/mL为截点值，敏感性为70.00%，特异性为91.70%。EGFR诊断恶性胸腔积液的曲线下面积为0.839，以29.50 mg/L为截点值，敏感性为80.00%，特异性为88.30%。CD40诊断恶性胸腔积液的曲线下面积为0.911，以41.50 pg/mL为截点值，敏感性为85.00%，特异性为93.30%。CD40对良恶性胸腔积液的诊断效能优于VEGF、EGFR。 结论 恶性胸腔积液中VEGF、EGFR及CD40的表达水平显著增高，三者对良恶性胸腔积液的鉴别均有一定的诊断价值，但CD40诊断恶性胸腔积液的敏感性及特异性均高于VEGF、EGFR。

[关键词] 良恶性胸腔积液;鉴别诊断;血管内皮生长因子;表皮生长因子;CD40

[中图分类号] R561.3          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-7210（2019）07（b）-0141-04

Value of detection of VEGF，EGFR and CD40 in differential diagnosis of benign and malignant pleural effusion

DING Yan1   ZHOU Jianrong1   SHUAI Ping2   LIAO Changfeng3   WANG Ying1   YUAN Xiaoliang1

1.Department of Respiration， the First Affiliated Hospital of Gannan Medical University， Jiangxi Province， Ganzhou  341000， China; 2.Department of Pathology， the First Affiliated Hospital of Gannan Medical University， Jiangxi Province， Ganzhou   341000， China; 3.Blood Laboratory， the First Affiliated Hospital of Gannan Medical University， Jiangxi Province， Ganzhou   341000， China

[Abstract] Objective To explore the value of detecting vascular endothelial growth factor （VEGF）， epidermal growth factor （EGFR） and CD40 in differential diagnosis of benign and malignant pleural effusion. Methods Sixty patients with lung cancer and pleural effusion hospitalized and diagnosed in the First Affiliated Hospital of Gannan Medical University from June 2015 to June 2017 were selected as observation group. 60 tuberculous pleurisy patients with pleural effusion in the same period were selected as control group. The expression levels of VEGF， EGFR and CD40 in pleural effusion samples of all patients were detected and compared between two groups. The diagnostic value of each index for malignant pleural effusion was analyzed by receiver operating characteristic curve （ROC）. Results The expression level of VEGF， EGFR and CD40 in pleural effusion of observation group was significantly higher than those of control group， the difference was statistically significant （P < 0.05）. ROC curve analysis showed that the area under the curve of VEGF in the diagnosis of malignant pleural effusion was 0.840， with 893.50 pg/mL as the cut-off point， the sensitivity was 70.00%， and the specificity was 91.70%. The area under the curve of EGFR in the diagnosis of malignant pleural effusion was 0.839， and the cut-off point was 29.50 mg/L. The sensitivity was 80.00% and specificity was 88.30%. The area under the curve of CD40 in the diagnosis of malignant pleural effusion was 0.911， and the cut-off point was 41.50 pg/mL. The sensitivity was 85.00% and the specificity was 93.30%. The diagnostic efficiency of CD40 in benign and malignant pleural effusion was better than that of VEGF and EGFR. Conclusion The expression of VEGF， EGFR and CD40 in malignant pleural effusion is significantly increased， the three methods have certain diagnostic value in differentiating benign and malignant pleural effusion. However， the sensitivity and specificity of CD40 in the diagnosis of malignant pleural effusion is higher than that of VEGF and EGFR.

[Key words] Benign and malignant pleural effusion; Differential diagnosis; Vascular endothelial growth factor; Epidermal growth factor; CD40

胸腔积液是常见的呼吸科疾病，可由原发性或转移性肿瘤、炎症等多种病因引起，临床多表现为胸痛、咳嗽、呼吸困难等症状，严重影响患者的生活质量，随着近年来环境污染加重、吸烟、职业暴露等因素，使肺癌的发病率及病死率均有升高趋势[1]。恶性胸腔积液是肺癌常见的并發症，部分患者以胸腔积液为首发的临床症状，因此，寻找直接或间接反映良恶性胸腔积液的指标以及探讨联合检测的诊断价值仍然是近年研究的热点。血管内皮生长因子（VEGF）是重要的肿瘤血管生长因子之一，在恶性肿瘤胸腔积液患者血清及胸腔积液中的表达均高于结核性胸腔积液者[2-3]。表皮生长因子（EGFR）是存在于细胞膜表面的糖蛋白受体，研究表明EGFR在肺腺癌胸腔积液细胞蜡块中的表达高于正常肺组织细胞[4]。CD40表达于B淋巴细胞、胸腺上皮细胞等多种细胞，参与机体免疫应答过程，且在肿瘤的发生、发展过程中发挥重要作用[5]。胸腔积液肿瘤标志物对于疾病性质的早期诊断具有一定的意义，本研究通过对胸水中VEGF、EGFR及CD40的检测，探讨其鉴别良恶性胸腔积液的准确性，以期进一步提高实验室检测对胸腔积液恶性程度判定的能力。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2015年6月～2017年6月于赣南医学院第一附属医院（以下简称“我院”）住院治疗确诊为肺癌合并胸腔积液的患者60例为观察组。纳入标准：①符合中国《原发性肺癌诊疗规范（2015年版）：外科部分》[6]的诊断标准;②留取胸腔积液标本前未经放疗、化疗。排除标准：①合并低蛋白血症、淋巴管引流手足引起的漏出性胸腔积液;②合并其他系统恶性肿瘤引起的转移性胸腔积液;③合并严重的自身免疫性疾病;④近期使用糖皮质激素、免疫抑制剂药物。选取同期在我院住院的结核性胸膜炎合并胸腔积液的患者60例作为对照组，所有患者均签署知情同意书，经我院医学伦理委员会批准后开展。两组患者性别、年龄、病程、吸烟史、饮酒史比较差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。见表1。

1.2 方法

所有患者入院后均进行胸腔穿刺或胸腔闭式引流，收集胸水标本15 mL，以8.5 cm的离心半径2500 r/min离心15 min，留取上清液置于-70℃冰箱保存备测。采用酶联免疫法检测标本中VEGF、EGFR及CD40的表达水平，相关试剂盒购于上海康朗生物科技有限公司（生产批号：20150207），严格按照试剂盒说明书操作。

1.3 统计学方法

采用SPSS 23.0统计软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用独立样本t检验，计数资料采用χ2检验或Fisher精确概率法，诊断价值分析采用受试者工作特征曲线（ROC），以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组胸腔积液中VEGF、EGFR及CD40表达比较

观察组胸腔积液中VEGF、EGFR及CD40表达水平均显著高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。见表2。

2.2 VEGF、EGFR及CD40对良恶性胸腔积液诊断的价值分析

ROC曲线分析显示，CD40诊断恶性胸腔积液的曲线下面积为0.911，以41.50 pg/mL为截点值，敏感性为85.00%，特异性为93.30%;VEGF诊断恶性胸胸腔积液的曲线下面积为0.840，以893.50 pg/mL为截点值，敏感性为70.00%，特异性为91.70%;EGFR诊断恶性胸腔积液的曲线下面积为0.839，以29.50 pg/mL为截点值，敏感性为80.00%，特异性为88.30%，CD40诊断良恶性胸腔积液的诊断效能要优于VEGF和EGFR。见图1。

3 讨论

胸腔积液是由于全身或局部病变使胸膜毛细血管、淋巴系统的滤过与吸收动态平衡受到破坏而产生。胸腔积液是许多肺部疾病常见的并发症，也是查找疾病病因、判断其良恶性的重要媒介[7]。恶性胸腔积液可发生于多种类型的恶性肿瘤，能导致呼吸困难，疼痛，体力活动下降甚至恶病质状态，而肺癌是引起恶性胸腔积液的主要原因之一[8]，肺癌在中国的发病率及死亡率均居首位，好发于60岁以上的老年人[9]，且起病隐匿，50%以上的肺癌患者伴有胸腔积液[10]。肺癌并发胸腔积液往往预示着生存时间较短[11-12]。目前胸腔积液的诊断主要依靠细胞学检验和胸膜活检后病理学证实，但阳性率低，假阴性率高，且活检为有创检查。因此，近年来采用肿瘤标志物联合检测来鉴别良恶性胸腔积液成为研究热点。本研究通过对胸腔积液中VEGF、EGFR、CD40进行检测，探讨其鉴别良恶性胸腔积液的准确性，以期进一步提高实验室检测对胸腔积液恶性程度判定的能力。

VEGF被称为血管通透因子，是一种功能性糖蛋白，能够刺激血管内皮细胞生长和增殖，促进体内新生血管的形成，同时能够促进纤维蛋白酶的表达，进而溶解血管基底膜及间质纤维，利于新生血管的生长，已被公认为肿瘤血管生成中最重要的调节因子之一，能够参与肿瘤生长、浸润及转移等多种生理病理过程[13]。研究表明，恶性肿瘤患者血清及肿瘤所致恶性胸腔积液中VEGF的水平均明显增高[14]。本研究中肺癌组胸腔积液中VEGF的水平高于结核性胸腔积液组，与以往文献报道一致[15]。VEGF促进内皮细胞的迁移，破坏细胞间的连接，增加细胞间隙而使血管通透性增加，血浆蛋白外渗使胸腔积液的生成超过吸收，进而促进胸腔积液的形成[16]。叶飒等[17]研究发现恶性胸腔积液中VEGF的水平与非小细胞肺癌患者的临床预后密切相关。值得注意的是，Popper[18]发现非小细胞肺癌细胞可以产生和分泌VEGF，促进胸腔积液形成、血管生成和肿瘤转移进展，可见VEGF可能是肺癌患者胸腔积液发生、发展的关键病理因素。本研究经ROC曲线分析发现VEGF诊断恶性胸腔积液的曲线下面积为0.840，诊断效率较好，可见VEGF可作为良恶性胸腔积液鉴别诊断的指标之一。