在世界范围食源性疾病问题都普遍存在,这其中很大程度上都与食源性致病菌有关系。因此,针对食源性致病菌的检验检测对于提高人们的健康水平有着至关重要的作用。而现代检测技术在不断发展的过程也形成了一套相对较为完整的食源性致病菌的检验检测体系。本文基于此开展研究,对食源性致病菌最新检测技术及其研究进展进行简述。
传统的细菌培养技术
在我国国标中,传统的细菌培养技术仍然是占有重要地位。其检验检测的原理主要是对样品中的微生物进行增殖,然后利用划线分离,实施选择性培养,进而观察菌落特征,实现检测目标。随着生物技术的不断发展,灵敏度高、特异性强显色培养基投入到检测过程,有效提高了筛选效率。在后续的生化鉴定过程中,全自动微生物鉴定分析系统的使用可以简化试验步骤、缩短试验周期,并且能更高效地得出试验结果。但是,该方法的弊端就在于操作繁琐,检测周期长,在一些应急情况下无法满足检测要求。
免疫学技术
ELISA技术。ELISA技术是基于免疫学抗原-抗体特异性结合的检测方法。对于沙门氏菌检测有着较好的检测范围和灵敏度。使用该方法进行沙门氏菌的检测也需要对于食品中的微生物进行增殖。很多学者利用该方法针对多种细菌进行检测,发现WLISA技术可以在24小时内实现对多种食源性致病菌。例如,应用ELISA原理生产出的mini- Vidas全自动免疫分析仪可在2天内完成对沙门氏菌、大肠埃希氏菌、单核细胞增生李斯特菌和空肠弯曲菌等细菌的筛选。
免疫荧光标记。该方法属于食源性致病菌检测中的一类新型免疫学检测法,原理上主要是基于特异性抗体敏化的免疫色谱卡片。在具体操作中,仅需要将实现进行增殖后的样品滴加到免疫色谱卡上,就能够用肉眼直接观察结果。该方法在操作上十分便捷,无需其他设备辅助,具有较好的适应性。虽然同ELISA法一样需要进行样品的增殖,但增殖后的操作时间大概仅有10分钟。
PCR技术
PCR法是基于核酸的一类检测方法,任何一类生物都有特异性的核酸片段,它们通过含有探针的补体核酸片段来进行检测,通常探针都是含有放射性同位素。该方法在沙门氏菌的检测中优点在于简便、快速、敏感性高和特异性强。近年来,用PCR技术在食源性致病菌领域发展很好,且具体应用方法也出现了多元化发展,包括实时荧光定量PCR、逆转录PCR和电化学发光PCR等,并成为一些食源性致病菌的行业检测标准。
代谢学检测技术
电阻抗技术。电阻抗法测定法是新型的生物学检测技术,目前在食品微生物检测的领域也有了较好的应用。其原理是细菌在繁殖的过程中,其代谢过程和代谢产物会导致培养基的阻抗发生变化,通过对这种变化的检测就能够实现对于相关微生物的判断。目前,电阻抗法已被AOAC接收,適用于检测食品中细菌总数、大肠杆菌和沙门氏菌等。
ATP生物发光法。ATP是细胞内必需的一种代谢产物,使用荧光虫素和荧光虫素酶可使之释放出能量,产生磷光。而在特定环境下,细菌细胞内的ATP含量是相对固定的。因此,通过对该磷光的强度检测实现对于细菌菌落总数的判定。由于该方法主要是对菌落总数进行检测,因此通常用于反映食品受污染的严重程度,具有简便、省时、快速等特点,还可以被用于大量食品样本中菌污染情况检测和食品现场快速检测等。但是,若样品中含有大量非细胞性ATP,则检测结果可受干扰。
综上,不同的检测技术都有不同的优势和劣势。在食源性致病菌的检测中,要根据检测需要、食品性质,以及已有的检测条件科学进行选择。但是,随着各项检测技术的不断进步,未来不同技术之间的联合检测将会得到更好的发展,这将极大的提高检测范围和灵敏度,从而为防控食源性疾病作出贡献。
作者简介:
杭婧(1987-),女,汉,江苏淮安人,本科,检验师(中级),食品药品微生物。