肖文敏 冯婷婷 高天 王灵丽
摘要:采用分光光度法对干燥苦菜中维生素C(Vc)提取条件进行了探索.结果表明:叶的Vc含量最高,茎的Vc含量稍高于根的,以乙醇为提取剂时,苦菜中提取Vc的最佳实验温度为30℃,最佳提取时间为40min.甲醇为提取剂时其最佳提取时间为60min.甲醇为最佳的苦菜中提取Vc的提取剂.
关键词:分光光度法;苦菜;维生素C
中图分类号:O642.1+1 文献标识码:A 文章编号:1673-260X(2019)01-0037-03
维生素C(Vc)又称抗坏血酸[1-4],是高等灵长类动物与其他少数生物的必须营养素.Vc的药效基团是抗坏血酸离子,最广为人知的是缺乏Vc会造成维生素C缺乏症.Vc不但是知名度最高的营养素,更是抗氧化、保护细胞,甚至是有效抗癌的维生素.Vc能阻断致癌物亚硝酸铵的形成,从而达到抗癌的效果.苦菜[5-6]是较为常见的一种植物,分布于中国的北部、东部和南部.苦菜中含有丰富的胡萝卜素、Vc、钙盐、钾盐等,具有较高的食用价值,苦菜具有清热解毒、凉血、止痢等功效.苦菜茶作为纯天然绿色的有机保健品,对于现代人的亚健康症状,有着显著的效果.因分光光度法灵敏度高、仪器简单、选择性好、样品用量少和测量速度快等优点.为研究苦菜中Vc的药用作用提供了条件,本文采用分光光度法对不同温度,提取时间,提取剂,苦菜不同部位[7],对苦菜中的Vc的提取影响做了探讨,为研究苦菜的药用价值提供一些依据.
1 实验部分
1.1 材料
原料:自然晾干的野生苦菜(赤峰学院院内).
主要试剂:抗坏血酸(AR),甲醇(AR),乙醇(AR).
1.2 仪器
TU-1810SPC型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司),SYC-15B超级恒温水浴(南京桑立电子设备厂),电子天平(TP-214),棕色容量瓶(100ml).
1.3 实验方法
1.3.1 维生素C标准溶液的制备
在电子天平上准确称取0.1gVc样品,置于100ml棕色容量瓶中,加入煮沸并冷却的蒸馏水,定容至刻度线,质量浓度为1g/L.用吸量管分别吸取10、12.5、16.7、20和25ml到6个洁净的100ml棕色容量瓶中,定容到刻度线.
1.3.2 样品处理
将苦菜进行清洗并晒干,分别称取切碎的根、茎、叶1.00g,放入100ml棕色容量瓶中,加入提取剂乙醇(甲醇)并定容,作为储备液.吸取3ml的储备液进行紫外扫描,根据吸光度值计算出Vc的质量浓度.
2 实验结果与讨论
2.1 标准曲线
利用紫外分光光度计以Vc浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制了Vc的标准曲线如图1所示.在我们所配制的浓度范围内,Vc溶液浓度随着吸光度呈线性变化,线性方程为:y=9.759x+0.0648,线性相关系数为:R=0.997,线性良好.
2.2 苦菜不同部位(根、茎、叶)对反应的影响
苦菜虽为绿色,因本实验将苦菜晒干作为原材料,提取液颜色很浅,那么颜色对实验误差的影响较小,因此未做脱色处理,直接取提取液测量其吸光度.
为了考察苦菜哪个部位含有的Vc含量更高,室温下,分别将根、茎、叶称取1g加入提取剂乙醇100ml,静置一段时间,取上层清液测其吸光度,测量结果如图2所示,叶的Vc含量最高,茎的Vc含量稍高于根的.由标准曲线准确测量出根、茎、叶的Vc含量分别为0.072g/L,0.034g/L,0.033g/L,说明叶子的Vc含量最高,是根和茎的约2.1倍之多.
2.3 温度对反应的影响
为了考察温度对Vc提取量的影响,本文以乙醇为溶剂,分别测量了温度在30℃,40℃,50℃,60℃时,苦菜提取液的紫外吸收光谱如图3所示.分析图谱发现,并不是提取温度越高,提取出來的Vc量越大,而是30℃时提取出来的Vc量最大,其次为50℃,再其次为60℃,40℃时提取量最低.因此在乙醇溶剂中,苦菜提取Vc的最佳实验温度为30℃.
2.4 不同提取时间对反应的影响
为了考察提取时间对苦菜中提取Vc含量的影响,本文分别在甲醇和乙醇提取剂中测量了20 min,30min,40min,50min,60min时提取液的紫外吸收光谱.甲醇为提取剂时,60min时提取的Vc含量最高,20min时的最低,因此其最佳提取时间为60min.乙醇为提取剂时,40min时提取的Vc含量最高,20min时的最低,因此最佳提取时间为40min.由此可知,提取剂不同,最佳提取时间也不同,因此在提取苦菜中的Vc时,要根据提取剂来确定最佳提取时间.
2.5 不同溶剂对反应的影响
本文在相同温度,相同浓度,相同提取时间下,测量了分别以甲醇和乙醇为提取剂的提取液的紫外可见吸收光谱,如图6所示.当提取剂为甲醇时,提取液的Vc含量远远大于提取剂为乙醇的.这说明甲醇更适合作为苦菜中提取Vc的提取剂.
3 结论
本文采用分光光度法系统地讨论了温度,提取时间,提取剂,苦菜不同部位,对苦菜中的Vc的提取影响,得出如下结论:
(1)叶的Vc含量最高,茎的Vc含量稍高于根的.由标准曲线准确测量出根、茎、叶的Vc含量分别为0.072g/L,0.034g/L,0.033g/L,叶子的Vc含量最高,是根和茎的约2.1倍之多.
(2)以乙醇提取剂时,苦菜中提取Vc的最佳实验温度为30℃.
(3)甲醇为提取剂时,60min时提取的Vc含量最高,20min时的最低,因此其最佳提取时间为60min.乙醇为提取剂时,40min时提取的Vc含量最高,20min时的最低,因此最佳提取时间为40min.因此,提取剂不同,最佳提取时间也不同,因此在提取苦菜中的Vc时,要根据提取剂来确定最佳提取时间.
(4)提取剂为甲醇时提取液的Vc含量远远大于提取剂为乙醇的.这说明甲醇更适合作为苦菜中提取Vc的提取剂.
参考文献:
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