除疣液的研制及临床应用※

刘瑞玉，井学娟，尹继旺，王光照

(山东省临朐县中医院，山东 潍坊262600)

皮肤疣是由人类乳头瘤病毒(HPV)感染引起的皮肤科常见病、多发病，表现为皮肤表面异常增生的良性赘生物。目前，临床治疗方法虽然多种多样，但治疗效果不甚理想，极易反复发作。为探讨中医药治疗该病的方法，近年来笔者研制出一种外用搽剂——除疣液，局部外涂治疗本病，初步临床应用取得较为理想的效果，现将除疣液的主要组成、制备方法、质量检验和临床应用介绍如下。

1 除疣液的制备

1.1 处方组成 鸦胆子1 000 g，石见穿500 g，蚤休300 g，板蓝根200 g，白花蛇舌草300 g，五倍子300 g，白及200 g，二甲基亚砜、丙二醇，95%乙醇适量，配成5 000 mL混合液。

1.2 配制方法 ①中药粉碎：取方中鸦胆子与其他中药饮片分别粉碎为粗粉。②取鸦胆子粗粉加入二甲基亚砜(无锡市亚泰联合化工有限公司，500 mL/瓶)浸泡，4 h搅拌1次，浸泡24 h，收得药液称为“a”。③取a加入丙二醇(天津市北联精细化学品开发有限公司，500 mL/瓶)浸泡鸦胆子药渣，4 h搅拌1次，浸泡24 h，过滤收得药液称为“b”。④取b加入鸦胆子药渣及处方中其他中药饮片粗粉，再加入95%乙醇(新乡县先丰医药新材料有限公司，2 500 mL/桶)浸泡24 h，过滤收得药液称为“c”。⑤全部的药渣置于渗漉桶中，以“c”为溶媒，以渗漉法收取药液，最后添加95%乙醇，收集至规定量的渗漉液，分装于30 mL或50 mL容器，贴签即为成品。

1.3 质量检验 参照2015版《中国药典》第一部中规定的鸦胆子、蚤休的质量检验方法[1]，做薄层色谱法检验。检验结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

(1)含量测定 采用气相色谱法(通则0521)测定[1]。聚乙二醇20 000(PEG-20 M)毛细管柱(柱长为30 m，内径为0.25 mm，膜厚度0.25μm)，检测器温度为250℃(火焰离子化检测器，FID)，进样口温度为250℃，柱温为205℃，分流比为20∶1。理论板数按油酸峰计算应不低于5 000。

(2)校正因子测定 按照2015版《中国药典》中鸦胆子的含量测定方法测定[1]，计算校正因子。

(3)测定法 ①三步溶媒法：取除疣液3 mL，精密量取，自“置10 mL具塞试管中，用氮气吹干”起，同对照品溶液制备方法制备供试品溶液。精密量取供试品溶液和内标溶液各1 mL，摇匀，吸取1μL，注入气相色谱仪，测定，即得。②超声提取法：取鸦胆子粗粉约3 g，精密称定，加入石油醚(60～90℃)30 mL，超声处理(功率280 W，频率42 k Hz)30 min，滤过，滤液置50 mL量瓶中，用石油醚(烟台三和化学试剂有限公司，规格：500 mL/瓶)(60～90℃)15 mL，分次洗涤滤器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加石油醚(60～90℃)至刻度，摇匀。精密量取3 mL，自“置10 mL具塞试管中，用氮气吹干”起，同对照品溶液制备方法制备供试品溶液。精密量取供试品溶液和内标溶液各1 mL，摇匀，吸取1μL，注入气相色谱仪，测定，即得。③煎煮法：取鸦胆子粗粉约3 g，精密称定，加水50 mL，煎煮30 min，滤过，精密量取滤液3 mL，自“置10 mL具塞试管中，用氮气吹干”起，同对照品溶液制备方法制备供试品溶液。精密量取供试品溶液和内标溶液各1 mL，摇匀，吸取1μL，注入气相色谱仪，测定，即得。

2 除疣液含量

采用三步溶媒法和超声法提取，样品中油酸含量远高于煎煮法；三步溶媒法和超声法所测得结果没有显著性差异，而三步溶媒法比超声法所制得的溶液更方便于临床应用，故确定提取方法为三步溶媒法。见表1。根据上述样品的含量测定结果，并结合《中国药典》2015年版一部鸦胆子饮片中油酸的含量限度，暂定本品每1 mL含鸦胆子以油酸(C18H34O2)计，不得少于6.0 mg。

表1 不同提取溶剂考察结果

3 典型病案

(1)患者，男，52岁，2017年3月26日初诊。主诉：面部起扁平丘疹4年。现病史：患者4年前面部起扁平丘疹，在当地乡镇医院诊断为扁平疣，曾用聚肌胞肌内注射、口服阿昔洛韦片、薏苡仁煎汤代茶服用等各种方法治疗两年之久，效果不显著，近两年来患者面部扁平疣不断增多。查体：面部见数十个针头至米粒大小的浅褐色扁平丘疹，高起皮肤，表面粗糙，呈圆形或椭圆形，境界清楚。舌质暗，苔薄白，脉沉紧。西医诊断：扁平疣。中医诊断：扁瘊；辨证：气血瘀滞证；治则：活血化瘀，软坚散结。病因病机：平素嗜酒，致肝失疏泄，引起气血凝滞郁于肌肤而生。治疗方法：病变部位局部治疗，用刀片刮去增生的角质层，用除疣液(自制)外敷20 min，每日1次。敷药后第2日疣体由浅褐色变为黑色，第4日用无菌针头轻挑疣体即脱落，基底部光滑平整，后继续敷药3 d巩固治疗预防复发。

(2)患者，女，55岁，2017年4月5日就诊。主诉：左足底掌趾部位起圆形凸起物伴疼痛两年余。现病史：患者两年前左足底掌趾部位出现圆形凸起物，行走时疼痛甚，自行在家中烫洗、刮削，后日渐增多。查体：左足底见12个圆形乳头状角质增生，呈灰黄色，绿豆至蚕豆大小，表面粗糙，周围绕以增厚的角质环，挤压痛大于压痛。舌淡红，苔薄，脉涩。西医诊断：跖疣。中医诊断：跖疣；辨证：血瘀证；治则：化瘀散结。病因病机：足部长期受压，局部气血凝滞，复感毒邪，郁结肌肤所致。治疗方法：病变部位局部治疗，用刀片刮去增生的角质层，用除疣液(自制)外敷20 min，每日1次，7次为1个疗程，敷药第7日疣体突起减少，第14日皮肤平整，后继续用药7 d疣体消失，皮肤恢复正常。

(3)患者，男，29岁，2017年6月11日初诊。主诉：发现阴茎赘生物1周。现病史：患者1周前洗澡时发现阴茎赘生物，呈丘疹样，局部无疼痛，无瘙痒，未给予治疗，后丘疹样赘生物增长迅速，增大明显，呈鸡冠样，赘生物较前增多，遂来门诊就诊。查体：冠状沟、阴茎体菜花样赘生物，高起皮肤，边界清楚，散在分布，约黄豆粒大小，表面柔软，凹凸不平，龟头表面有白色分泌物，局部潮湿，无糜烂，无破溃。舌质红，苔黄，脉弦数。西医诊断：尖锐湿疣。中医诊断：臊疣；辨证：湿毒蕴结证；治则：利湿化浊，解毒散结。病因病机：交媾不洁，感受秽浊之毒，下注皮肤黏膜而生。治疗方法：病变部位局部治疗，用无菌针头破坏疣体表面，使黏膜破损，用除疣液(自制)外敷20 min，每日1次，7次为1个疗程。敷药后第4日疣体顶部开始脱落，第7日疣体较前明显变小，第11日皮损处变平整，无突起，继续用药3 d患者痊愈。

4 讨论

现代医学认为，HPV是一种DNA病毒[2]。临床治疗主要为局部治疗，采用物理或化学烧灼、冷冻乃至局部手术切除等，但患者痛苦较大，而且容易遗留瘢痕，复发率较高[3]。为探讨中医外治法治疗本病的有效方剂，笔者研制出“除疣液”治疗本病，取得了较满意的疗效。除疣液选用鸦胆子为主药，鸦胆子为苦木科植物鸦胆子的干燥成熟果实，成分包括大黄素、大黄酚苷、大黄酚、没食子酸、β2谷甾醇、油酸、三油酸甘油酯、香豆酰橄榄苦苷等，现代研究表明其具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎等多种作用[4]。该处方辅以蚤休清热解毒、消痈散结，为臣药，蚤休主要活性成分为甾体皂苷，包括重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等，还含有蜕皮激素、黄酮类等，具有抗肿瘤、增强免疫的作用[5]。板蓝根、白花蛇舌草、石见穿清热解毒、活血化瘀、清热利湿，共为佐药，板蓝根具有抗病毒作用，其抗病毒机制可能为能在细胞表面与病毒形成竞争性吸附，防止病毒入侵正常细胞及增强免疫力等[6]；白花蛇舌草对急性和慢性炎症模型均有抗炎作用[7]；石见穿可诱导细胞凋亡[8]。五倍子降火收涩、祛风除湿杀虫，白及收敛止血、消肿生肌，共为使药，五倍子鞣质能凝固破坏癌细胞，对病毒有抑制作用[9]，白芷提取物具有抗炎、抗癌作用[10]。全方共奏清热解毒、祛疣生肌之功。传统外用治疗方法多数使用原药材贴敷或制成水溶性制剂，效果不佳的重要原因是有效成分的浓度较低或皮肤渗透性欠佳。本研究所用的除疣液应用二甲亚砜、丙二醇及95%乙醇，采取三步溶媒浸提联合渗漉法的制剂工艺，使鸦胆子等脂溶性和醇溶性有效成分充分溶出，其浸提液具有较高的药物浓度，并且具有极强的皮肤渗透性，溶媒本身就具有良好的杀菌、抗病毒的治疗作用。临床应用中对疣表面进行处理更加强化了药物的渗透与吸收，使该治疗方法取得显著的效果。

综上所述，采用除疣液治疗寻常疣疗效肯定，制备和治疗方法简单，治疗过程中患者无痛苦，无毒副作用，适用于各类患病人群，治愈后无复发、无遗留瘢痕，值得临床推广。