高龄妊产妇MTHFR C677T基因多态性与妊娠期焦虑的关系

张菘, 胥雄阳, 唐剑萍, 侯艾林, 严小玲, 虞宝中, 杨若涵, 罗敏, 冉双铭, 唐瑛, 贺汉军

(广元市第一人民医院，四川广元628017)

目前，随着国家生育政策、大众生育观念及医学辅助生育技术的不断进步，高龄妊产妇(年龄≥35岁)人群大量增长[1, 2]。研究显示，随年龄增大人体主要器官以及生殖系统老化，许多妊娠期代谢相关性疾病逐步显露，高龄妊产妇妊娠反应、并发症、不良妊娠发生率上升，新生儿神经发育异常状况增加[3, 4]。妊娠期焦虑是妊娠期和围产期间发生的一种妊产妇的不良情绪反应，高龄妊产妇更易形成妊娠期焦虑[5, 6]，严重者可导致流产、早产等不良事件的发生[7]。同型半胱氨酸(Hcy)是甲硫氨酸循环的正常代谢物质，参与体内多种重要代谢过程。目前，很多研究认为体内Hcy水平升高与焦虑发生关系较大。亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)是叶酸代谢过程中的关键酶，对人体血清Hcy水平有较大影响[8, 9]。本研究检测高龄妊娠期虑患者血清Hcy水平变化，探讨高龄妊娠焦虑与Hcy、MTHFR基因多态性的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2016年7月～2018年10月本院行妊娠产检汉族妇女600例，年龄35～45(38.56±4.37)岁；孕1～13周 532例，孕14～28周48例，孕28周以上20例；孕 1次 73 例，孕≥2 次 527 例；有既往不良孕产史163 例，无不良孕产史364例。纳入标准：排除妊娠期高血压、糖尿病、严重肝肾功能障碍及其他恶性疾病；有独立行为能力；无先兆流产、无精神病史；近期未用抗焦虑或抗抑郁药物。

1.2 妊娠期焦虑调查及评估 本研究在取得患者本人或家属知情同意后，由临床研究人员向高龄妊产妇发放调查问卷。本次研究设计调查问卷以焦虑自评量表为主,总共20项，其中包括正向评分15项，反向评分5项，每项分4级评分，评定过去l周内的焦虑情况。评分50分以下为正常，50～59分为焦虑轻度，60～69分为焦虑中度，≥70分为焦虑重度。

1.3 血清Hcy水平测定 清晨采集测试者空腹静脉血5.0 mL，放置低速离心机离心10 min后，留取上层血清，采用西门子全自动生化分析仪(ADVIA 2400)检测Hcy水平。具体操作参照仪器及试剂说明书，遵循检测实验质控原则。Hcy测定试剂盒为北京九强生物技术股份有限公司产品。

1.4 MTHFR C677T基因多态性检测 清晨采集测试者空腹静脉血5.0 mL，采用MTHFR基因检测试剂盒(武汉芝友医疗科技股份公司)进行DNA提取。样本经PCR反应释放不同的荧光信号，监测相应通电信号强度，定性分析检测结果[10]。

2 结果

2.1 高龄妊产妇焦虑发生情况 本研究总共发放600份调查问卷，回收596份。焦虑自评量表评分显示无焦虑418例，存在妊娠期焦虑178例，焦虑发生率为 29.87%；其中轻度焦虑148例，中度焦虑27例，重度焦虑3例。随机选取焦虑高龄妊产妇100例(焦虑组)及无焦虑高龄妊产妇100例(无焦虑组)进行后续研究。

2.2 有无焦虑高龄妊产妇血清Hcy水平比较 焦虑组血清Hcy水平为(18.03±3.88)μmol/L，无焦虑组血清Hcy水平为(11.06±4.06)μmol/L，两组血清Hcy水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。以血清Hcy水平超过10 μmol/L为高同型半胱氨酸血症诊断标准，焦虑组高同型半胱氨酸血症发生率为79%(79/100)，无焦虑组高同型半胱氨酸血症发生率为32%(32/100)，两组高同型半胱氨酸血症发生率差异有统计学意义(P<0.05)。

2.3 有无焦虑高龄妊产妇MTHFR C677T 基因多态性比较 两组TT基因型及T等位基因频率比较差异有统计学意义(P均<0.05)。见表1。焦虑组CC、CT、TT基因型患者血清Hcy水平分别为(13.89±2.74)、(16.76±2.82)、(20.01±3.30)μmol/L，携带TT基因型患者血清Hcy水平高于CC、CT基因型患者(P均<0.05)。

表1 两组高龄妊产妇MTHFR C677T 基因检测结果(%)

注：与无焦虑组比较，*P<0.05。

3 讨论

焦虑是人处在各种危险、威胁状况下的一种必然反应特殊情绪，是一种负面心理活动。妊娠期焦虑症是一种复杂疾病，目前其发病机制尚不明确。国内研究显示，妊娠期焦虑发生率为12.5%～55.32%[11, 12]，本研究高龄妊产妇焦虑发生率为29.87%，与相关研究基本一致。高龄妊产妇妊娠期代谢相关性疾病增多，分娩时子宫破裂、胎儿缺氧等高危风险增加，剖宫产率升高，产妇生理压力、心理压力同步上升，易产生各种心理焦虑问题。因此关注高龄妊产妇易发心理焦虑人群，及时提供有针对性的心理健康指导十分必要。

Hcy是甲硫氨酸循环中S-腺苷甲硫氨酸(SAM)代谢中间产物， SAM是DNA甲基化不可或缺的物质。体内SAM去甲基化后代谢生成S-腺苷同型半胱氨酸，经过脱去腺苷生成Hcy，Hcy在相关酶代谢下重新生成甲硫氨酸，形成一个循环过程，称为甲硫氨酸循环。本研究显示焦虑组血清Hcy水平、高同型半胱氨酸血症发生率均高于无焦虑组，表明血清Hcy水平与高龄妊娠焦虑存在密切联系，高同型半胱氨酸血症是高龄妊娠焦虑发生的潜在危险因素。研究表明，Hcy引起焦虑的机制可能涉及以下3个方面：①血清Hcy升高影响单胺递质的甲基化过程； ②血清Hcy升高影响胸腺嘌呤及 DNA 合成和修复；③Hcy及其相关代谢物可抑制离子通道和神经递质，使其产生神经毒性作用，诱发细胞凋亡导致焦虑症。

Hcy在体内代谢的关键酶分别是胱硫醚B合成酶和MTHFR。多项研究指出MTHFR C677T基因多态性是高同型半胱氨酸血症发生的关键影响因素，TT基因型人群MTHFR活性仅有正常人水平的50%[13]。本研究MTHFR C677T基因多态性检测显示焦虑组TT基因型及T等位基因频率升高，焦虑组携带TT基因型患者血清Hcy水平高于CC 、CT基因型患者。MTHFR C677T基因分型TT基因型高龄妊产妇可能易产生体内叶酸代谢酶活性缺陷导致血清Hcy水平升高，高龄妊娠期焦虑发生率和发生风险存在较大个体差异[14]。因此，对高龄妊产妇进行MTHFR C677T基因多态性检测，筛选易发焦虑人群早期干预有重要意义。