癌胚抗原、糖类抗原、CA125、血管生成素、细胞角蛋白19片段及甲胎蛋白检测在肺癌诊断中的临床研究*

王 玲，申 鸿

1.西安大兴医院检验科(西安 710016)；2.西安交通大学医院检验科(西安 710061)

肺癌发病率及病死率在我国均居恶性肿瘤之首，流行病学专家预测显示，我国2025年肺癌患病人数将突破1千万[1]。早发现、早诊断是提高患者治疗效果，改善患者预后的关键。然肺癌早期临床症状不明显，加之肺部丰富的血运易造成肿瘤细胞转移，因此绝大多数肺癌在发现时已处于晚期。伴随分子生物学发展，血清肿瘤标志物检测因取材方便、创伤性小和重复性较好等特点，使得其在肿瘤良恶性鉴别诊断和癌症早期筛查、临床疗效评价、预后判断等方面的价值越来越受关注[2-3]。癌胚抗原(Carcino-embryonic antigen， CEA)、糖类抗原199(Carbohydrate antigen，CA199)、CA125、血管生成素-2(Angiogenin-2， Ang-2)、细胞角蛋白19片段(Cytokeratin 19 fragment，CYFRA211)及甲胎蛋白(Alpha fetal protein，AFP)均是临床报道的与恶性肿瘤发生发展存在相关性的标志物。本研究通过回顾性分析本院收治的96例肺癌患者临床资料，并与同时期接受的肺部良性病变者和正常体检者血清肿瘤标志物表达水平进行比较。旨在通过对比分析，总结上述6项肿瘤标志物在肺癌诊断中的灵敏度、特异度、诊断符合率及其与肿瘤细胞分化程度、肿瘤分期、肝转移等病理特征的相关性。

资料与方法

1 一般资料 选取2013年1月至2017年12月本院初诊为肺部病变的患者150例作为研究对象。入选病例均经病理学检查确诊，未接受任何方式的放化疗和靶向药物治疗，且病历资料记录完整。其中包括74例肺癌患者(肺癌组)和76例良性病变者(良性组)，肺癌组男51例、女23例，年龄40～85岁，平均(57.12±5.68)岁；鳞癌37例、腺癌25例、小细胞癌12例；Ⅰ期7例、Ⅱ期21例、Ⅲ期32例、Ⅳ期14例。良性组男48例、女28例，年龄45～85岁，平均(57.35±5.64)岁；肺炎43例、支气管扩张13例、肺结核11例、肺脓肿8例、炎性假瘤1例。同时采用分层抽签方式从同期体检人群中选择70例健康人员作为对照组，男44例、女26例，年龄43～82岁，平均(57.28±5.69)岁。三组性别、均龄间对比差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

2 研究方法 三组研究者均取清晨空腹肘静脉血样5ml，加入无抗凝剂的无菌试管中保存于-20℃冰箱，待析出血清后，离心，3000r/min，10min，所分离血清-20℃保存。选择型号为DXI800的全自动生化分析仪(美国贝克曼库尔特公司生产)及其配套试剂等测定血清CEA；CA199、CA125、CYFRA211及AFP选择型号为E601的电化学发光全自动分析仪及配套试剂进行测定；Ang-2采用酶联免疫法检测，选择美国Bio-Kinet-ics公司提供的FL-312e全自动酶标仪及配套试剂。所有操作过程严格遵循说明书，质控符合要求。血清标志物正常参考范围：CEA<3.4ng/ml、CA199<39U/ml、CA125<35U/ml、Ang-2<278.5ng/ml、CYFRA211<3.3ng/ml、AFP<20ng/ml。

3 统计学方法 数据处理选择SPSS17.0统计学软件，各项检测指标水平以均值±标准差表示，不同组间计量资料比较行单因素ANOVA分析；阳性率间比较行卡方检验。检验水平为α=0.05。

结 果

1 三组研究对象血清肿瘤标志物检测水平 见表1。三组血清肿瘤标志物CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP检测水平间差异具有统计学意义(P<0.05)，肺癌组6项指标检测水平均明显高于良性组和健康对照组(P<0.05)，但对照组和良性组各指标检测水平间比较差异无统计学意义(P>0.05)。

2 不同癌变类型患者血清肿瘤标志物检测水平比较 见表2。鳞癌、腺癌、小细胞癌不同病变类型患者血清CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP检测水平间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。腺癌患者血清CEA、CA199、CA125、AFP检测水平均明显高于鳞癌及小细胞癌患者(P<0.05)；小细胞癌患者血清Ang-2显著低于鳞癌及腺癌患者，而鳞癌血清CYFRA211水平明显高于腺癌和小细胞癌(P<0.05)。

3 不同TNM分期患者血清肿瘤标志物检测水平比较 见表3。不同病理分期患者血清CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP检测水平间差异均具有统计学意义(P<0.05)。Ⅲ期患者标志物检测水平明显高于Ⅰ和Ⅱ期，Ⅳ期明显高于Ⅲ期(P<0.05)。

表1 三组研究对象血清肿瘤标志物比较

注：与对照组比较,*P<0.05；良性组比较,#P<0.05

表2 不同癌变类型患者血清肿瘤标志物检测水平比较

注：与鳞癌比较，*P<0.05；腺癌比较，#P<0.05

表3 不同TNM分期患者血清肿瘤标志物检测水平比较

注：与Ⅰ和Ⅱ期比较，*P<0.05；与Ⅲ期比较，#P<0.05

4 血清肿瘤标志物检测在肺癌诊断中敏感性、特异性和准确度 见表4。各指标单项检测肺癌诊断敏感度和准确度均较低，CA125+CEA+CA199+Ang-2、CA125+CEA+CA199+Ang-2+CYFRA211及CA125+CEA+CA199+Ang-2+CYFRA211+AFP联合检测诊断肺癌诊断敏感性和准确度明显高于单项检测及CEA+CA199、CA125+CEA+CA199(P<0.05)，而6项指标联合检测敏感性和准确度显著高于CA125+CEA+CA199+Ang-2、CA125+CEA+CA199+Ang-2+CYFRA211联合检测(P<0.05)，但特异度未出现明显下降(P>0.05)。

表4 血清肿瘤标志物检测在肺癌诊断中敏感性、特异性和准确度

注：与其他各指标及联合指标检测比，*P<0.05

讨 论

肺癌已成为全球性公共健康难题，为癌症主要死亡病因之一，5年生存率很低。我国江苏南通市2002-2014年肺癌5年生存率仅为12.40%[4]；珠海2003-2010年为15.70%[5];新疆2010-2014年则有相对较高生存率为19.42%[6]。肺癌早期诊断率低是患者预后不良及生存率低的主要因素。研究指出，早期肺癌临床确诊率不足15%，多数患者在确诊时已处于晚期[7]。因此，早期筛查、早期确诊、及早治疗是改善肺癌患者预后，提高其生存率的关键途径之一。CT等影像学检查在胸部病变诊断中应用广泛，可清晰显示肿瘤的形态特征，操作者可直观观察到肿瘤大小、位置、形态及边缘情况，甚至还可通过影像学重建方式观察肿瘤周围的大血管、心脏等，起到良好定位、分期等帮助[8]。但该诊断方式在肺癌早期筛查中的效果较差。肿瘤标志物是机体癌变发生发展过程中原癌基因及产物异常表达所产生的活性物质，其异常表达往往早于影像学可见的组织学表现[9]。肿瘤标志物主要存在于机体血液、体液和(或)组织间隙中，因此具有检测简单方便及可动态检测等优点，所以可通过测定机体肿瘤标志物表达水平辅助恶性肿瘤的筛查诊断。

CEA是最早发现与结肠癌及胎儿肠组织中的酸性糖蛋白，存在于各类癌变组织中，其表达水平在肺癌、胃癌、乳腺癌、肝癌中均明显升高，但糖尿病、吸烟、妊娠期等人群中15%～53%血清CEA也会升高，因此，其并非恶性肿瘤的特异性标志物，但在癌变筛查中具有辅助价值。国内外报道均显示，肺癌患者血清CEA表达水平明显高于良性病变者及健康人群[10-11]；且研究认为，CEA表达水平与癌变分期存在明确相关性，分期越晚，CEA浓度越高[12]。CYFRA211属于上皮细胞支架蛋白，主要分布于单层上皮细胞，因此在来源于上皮组织的肿瘤组织中具有很高的表达量，是诊断肺小细胞癌的敏感标志物，尤其是对鳞癌诊断具有较高特异度。CA199和CA125是肺癌中研究相对较少的肿瘤标志物。CA199属于酸化的乳-N-盐藻戊糖Ⅱ，其异常表达在多种恶性肿瘤中均有表现。CA199敏感度低、但具有相对较高的特异性，需要同其他标志物联合应用[13]。CA125属于卵巢癌相关抗原，其表达升高多见于妇科肿瘤患者，近期研究发现肺癌患者血清中亦存在此物质升高现象，尤其是肺腺癌患者中更为明显[14]。Ang-2属于分泌性糖蛋白，正常组织中表达水平低，但肿瘤细胞中呈高表达。近年关于Ang-2对结直肠癌、胃癌及非小细胞肺癌肿瘤细胞侵袭、生长、转移的研究日益增加，且结果显示，其具有损伤肿瘤周边原有正常血管，促进肿瘤细胞增殖、肿瘤血管形成，抑制肿瘤细胞分化等功效[15]。AFP是胎儿期即合成的糖蛋白，其在促生长、抗氧化、免疫调节及信号转导等多方面均具有重要作用。在胚胎组织及多数肿瘤细胞，尤其是生长迅速的肿瘤细胞中均有AFP受体表达。雷程琳等[16]研究显示，原发性肺癌患者血清AFP含量明显高于良性病变者和健康对照者，但其在原发性肺癌诊断中灵敏性及特异性均较低，而其与CYFRA211和神经元特异性烯醇化酶联合检测的灵敏性、特异性及准确度均得到明显提升。 本研究结果显示，肺癌组患者血清CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP检测水平均明显高于良性组和健康对照组，该结果与以往报道结果相吻合[12,17]。表明，本研究所选6项肿瘤标志物均在肺癌早期诊断中均具有一定应用价值。鳞癌、腺癌、小细胞癌不同病变类型患者血清CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP检测水平间比较差异均具有统计学意义。腺癌患者血清CEA、CA199、CA125、AFP检测水平均明显高于鳞癌及小细胞癌患者；小细胞癌患者血清Ang-2显著低于鳞癌及腺癌患者，而鳞癌血清CYFRA211水平明显高于腺癌和小细胞癌；不同病理分期患者血清CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP检测水平间比较差异均具有统计学意义。Ⅲ期患者各项标志物检测水平明显高于Ⅰ期和Ⅱ期，Ⅳ期明显高于Ⅲ期。提示，本研究所选6项标志物可用于腺癌、鳞癌及小细胞癌的癌变类型，同时也是判断癌变分期，判断患者预后的良好指标。而在肺癌早期诊断敏感性和准确性方面，6项指标联合检测效果均明显优于CA125+CEA+CA199+Ang-2、CA125+CEA+CA199+Ang-2+CYFRA211联合检测及各项指标单项检测，但特异度未出现明显下降。提示，CA125+CEA+CA199+Ang-2+CYFRA211+Ang-2+AFP联合检测具有很好的敏感度及准确性，但并不影响其诊断的特异性。

腺癌血清CEA、CA199、CA125、AFP水平明显高于鳞癌及小细胞癌；鳞癌血清CYFRA211水平明显高于腺癌和小细胞癌；小细胞癌血清Ang-2显著低于鳞癌及腺癌，且各项标志物表达水平与患者病理分析呈一定相关性。然而6项标志物在肺癌诊断中的敏感性及准确性均较低，而多种联合检测能显著提高对肺癌的敏感性及诊断准确性，有利于患者的早发现、早治疗，在肺癌诊断方面具有重要价值。