肾综合征出血热患者血清同型半胱氨酸、胱抑素C水平检测及临床意义*

宋红波

西安市第八医院(西安 710061)

肾综合征出血热(Hemorrhagic fever with renal syndrome，HFRS) 又称流行性出血热，是一种自然疫源性疾病，因感染汉坦病毒引起，鼠类为其主要传染源，因该疾病严重危害人类健康，已成为全球范围内重大公共卫生问题之一[1]。我国HFRS发病率较高，发病人数约超过世界发病总数80%，多数患者临床表现为出血、充血、发热、低血压休克及肾脏损害，重症患者可导致死亡[2]。关于HFRS发病机制目前尚未完全明确，运用恰当的方法，选择合理的临床检测指标，对HFRS患者的诊治和预后具有重要的临床意义。近年来，医学检测技术快速发展，临床检验人员对HFRS的研究亦不断深入，通过检测血清中某些异常变化的指标水平，并将上述异常指标作为HFRS的诊断性标志物，可有效提升对HFRS病情的判断和制定合理的诊治方案。本文通过检测HFRS患者血清同型半胱氨酸(Homocysteine，Hcy)水平，同时测定胱抑素C(Cystatin C，Cys-C)水平，经过与正常对照组健康体验者上述指标的对比研究，探讨血清Hcy、Cys-C水平变化与HFRS病情严重程度的关系，现将研究结果报道如下，以期为HFRS临床诊治提供参考依据。

资料与方法

1 一般资料 选择2014年7月至2018年2月我院收治的105例HFRS患者为研究对象，均参照《肾综合征出血热诊断与治疗》[3]和《肾综合征出血热及并发症防治》[4]中HFRS的诊断标准进行诊断：患者血清流行性出血热免疫球蛋白M(IgM)抗体均呈阳性。其中男56例，女49例，年龄25～68岁，平均年龄(44.5±4.7)岁，将其根据患者病情特点分为轻型21例、中型27例、重型30例及危重型27例。另设正常对照组40例，均为同期在我院接受健康体检者，其中男25例，女15例；年龄25～66岁，平均年龄(43.6±4.5)岁。所有受试对象均排除合并糖尿病、高血压、心脏病、脑卒中、风湿性关节炎、肿瘤等慢性病史，且受试对象近期均未服用过能够影响血清Hcy、Cys-C水平的药物。HFRS组患者与正常对照组受试者在性别、年龄方面经比较，差异无统计学意义(P>0.05)。本研究已通过我院伦理委员会批准。

2 研究方法

2.1 实验标本处理： 所有HFRS患者均分别于发热期、少尿期、恢复期采集晨起空腹外周静脉血，正常对照组受试者于体检当日晨空腹采集外周静脉血，所有受试者采血量均为4 ml，常规方法(3000r/min离心10min)分离血清，置-80℃冰箱保存，用于测定血清Hcy、Cys-C指标水平。

2.2 试剂与方法：采用免疫比浊法检测血清中Hcy、Cys-C水平，测试仪器为全自动生化分析仪(日立7600型)，Hcy、Cys-C试剂盒购自上海研谨生物科技有限公司，检测过程由操作人员按照试剂盒说明书和仪器使用规程进行。

结 果

1 HFRS组与正常对照组受试者血清Hcy、Cys-C水平比较 HFRS组患者血清Hcy、Cys-C水平在发热期、少尿期、恢复期等各病程阶段均显著升高，尤以少尿期最高，与正常对照组比较，差异均具有统计学意义(P<0.05),见表1。

表1 HFRS组各病程阶段患者与正常对照组受试者血清Hcy、Cys-C水平比较

注:与对照组比较，*P<0.05

2 HFRS组少尿期患者与正常对照组受试者血清Hcy、Cys-C水平比较 HFRS组各病情状态患者在轻型、中型、重型、危重型等病情状态血清Hcy、Cys-C水平在少尿期阶段均显著升高，尤以危重型最高，均显著高于正常对照组，比较差异均具有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 HFRS组少尿期患者与正常对照组受试者血清Hcy、Cys-C水平比较

注:与对照组比较，*P<0.05

3 HFRS组少尿期患者血清Hcy与Cys-C水平的相关性分析 经Pearson相关性分析处理表明，HFRS组少尿期患者血清Hcy与Cys-C呈显著正相关(r=0.62，P<0.05)，见表3。

表3 HFRS组少尿期患者血清Hcy与Cys-C指标相关性分析(n=105)

讨 论

HFRS是由汉坦病毒感染引起的自然疫源性疾病，患者以肾脏损害多见，同时伴有全身广泛脏器损伤[5]。该病发病机制目前尚不十分明确，有学者认为是病毒直接作用，亦由学者认为是免疫病理损害[6-7]，目前学术界趋向于认同免疫发病机制[8]，认为汉坦病毒侵入机体后，可激活免疫细胞并释放细胞因子，细胞因子通过级联反应造成多器官免疫病理损伤[9]，诸如广泛的毛细血管弥漫性损伤，继而引起血浆外渗，血容量降低引起血压值偏低，肾小球滤过率降低，急性肾功能衰竭发生。目前临床多以尿素、肌酐等为肾功能检测指标作辅助诊断HFRS[10]，但易受肾内外多种因素的影响，而影响检测的应用。

Hcy是一种含硫氨基酸，可损伤血管，是蛋氨酸、半胱氨酸等脱甲基后的代谢产物，是人体内非必需氨基酸[11]，其在体内产生后随即被分解代谢，因此，正常人血中Hcy水平较低。肝脏和肾脏是Hcy主要代谢器官，因此肾脏病变将导致血清Hcy水平的升高[12]。现有研究表明[13]，肾脏疾病患者随着病情进展，其血清Hcy水平明显提升，Hcy可使自由基活性增加，促进内皮细胞损伤，降低肾小球基底膜细胞功能，改变肾小球过滤功能，增高肾小球内压，从而导致或加重肾脏疾病。

Cys-C属碱性非糖化蛋白质，也称为γ-微量蛋白及γ-后球蛋白，是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，在各种组织的有核细胞和体液中广泛存在，其分子量为13.3kD，是一种由122个氨基酸残基组成的碱性蛋白质，可显著抑制组织蛋白酶、基质金属蛋白酶和半胱氨酸蛋白酶活性。有研究报道[14]，机体内各种组织的有核细胞均可持续产生带正电荷的Cys-C，后者可被肾小管上皮细胞完全重吸收并降解Cys-C，能被其在血中保持稳定的水平，且不受性别、年龄、饮食、炎症、感染、肿瘤等因素的干扰，血中Cys-C主要经肾小球滤过而被清除。另有研究表明[15]，Cys-C是一种较为理想的内源性肾小球滤过率的内源性标志物，可敏感地反映肾功能轻度损伤血清水平，当肾脏轻微损伤时，血清Cys-C水平随即升高，并与病情严重程度呈正相关。

本研究选择血清Hcy、Cys-C为检测指标，对105例HFRS患者血清Hcy、Cys-C水平进行测定，并参照40例健康受试者检测结果，进行了对照型的研究。研究结果表明，HFRS患者血清Hcy、Cys-C水平在发热期、少尿期、恢复期等各病程阶段均显著升高，尤以少尿期最高；HFRS患者随着病情状态不同，患者血清Hcy、Cys-C水平亦有所区别，在少尿期阶段患者血清Hcy、Cys-C水平均显著升高，尤以危重型上述指标升高明显。以上研究结果表明，血清Hcy、Cys-C等检测指标对诊治HFRS及探讨其发病机制具有重要的临床意义。