慢性肾衰竭患者Cys C、β2-MG、Hcy的检测及其相关性分析

董海芸，金石昆，黄静蓉，张 翔

（1.青海大学附属医院肾内科，青海 西宁810001；2.中山大学附属第五医院肾内科，广东 珠海519000；3.青海大学附属医院检验科，青海 西宁810001）

慢性肾衰竭（chronic renal failure，CRF）是肾功能遭受持续破坏，肾单位数量减少，内分泌代谢功能和排泄功能均受损，造成水电解质平衡失调，引起体内多种成分的改变，与疾病的发生和发展均有关［1-2］。血清胱抑素C（cystatin C，Cys C）是一种神经内分泌基本多肽，与肾小球滤过率呈负相关，在CRF检测中具有较高的价值。同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）的代谢与排泄均在肾脏中进行，肾功能损伤后会导致Hcy的水平显著上升［3］。血清β2-微量球蛋白（β2-microglobulin，β2-MG）可反应肾小球滤过功能的较灵敏的指标［4］。但Cys C、Hcy及β2-MG中的某项结果难以鉴别急性肾功能衰竭与慢性肾功能衰竭。本结果通过检测CRF患者的Cys C、Hcy及β2-MG的水平，并进行相关性分析，以期为CRF的诊断提供参考依据。

材料和方法

1 临床资料

收集2015年7月至2017年8月我院收治并确诊的慢性肾衰竭患者120例为研究组，纳入标准：①符合K／DOQI慢性肾脏病（CKD）临床实践指南中CRF的相关诊断标准［5］；②年龄18～79岁。另选择同期体检的健康人群80例作为对照组。观察组中男性63例，女性57例，年龄31～78岁，平均年龄52.6±5.7岁；对照组中男性47例，女性33例，年龄32～79岁，平均年龄53.6±5.3岁。GFR的测定：静脉注射99Tcm-DTPA后，依据放射性药物被清除的速度和数量计算GFR，GFR（mL／min 1.73m2）＝186×（血肌酐）-1.154×（年龄）-0.203×（0.742女性）。依据CKD分期标准将患者分为CKD3期组、CKD4期组、CKD5期组。CKD3期组男性29例，女性21例，年龄31～74岁，平均年龄51.7±5.2岁；CKD4期组男性17例，女性17例，年龄32～75岁，平均年龄52.2±5.4岁；CKD5期组男性19例，女性17例，年龄32～78岁，平均年龄54.6±5.5岁。排除标准：①恶性肿瘤患者；②心、肝、肺功能严重不全者；③自身免疫性疾病者。各组患者在性别、年龄等一般资料差异不具有统计学意义。

2 观察指标

①采集对照组及研究组患者空腹外周血2mL，混匀，2000r／min、离心5min，取上清。采用ADVIA 2400全自动生化分析仪（西门子医学诊断产品（上海）有限公司）检测血清肌酐（Serum creatinine，Scr）和尿素氮（Blood urea nitrogen，BUN）；②采集对照组及研究组患者空腹外周血2mL，离心取上清，采用ELISA法检测血清中Cys C、β2-MG、Hcy水平，ELISA试剂盒均购自江苏科晶生物有限公司。上述实验操作严格按照试剂盒说明书及仪器说明书进行。

3 统计学处理

采用SPSS18.0统计学软件对实验数据进行分析，计量资料采用（）表示，两组间比较采用独立t检验，多组间比较采用方差分析，采用Spearman秩相关分析分析炎症因子的相关性。绘制Cys C、β2-MG、Hcy ROC曲线，并计算3者ROC曲线下面积，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

结 果

1 两组血清Scr、BUN、Cys C、β2-MG、Hcy水平比较

研究组血清Scr、BUN、Cys C、β2-MG、Hcy水平均明显高于对照组（P＜0.05）。2

表1 两组血清Scr、BUN、Cys C、β-MG、Hcy水平比较（）

表1 两组血清Scr、BUN、Cys C、β-MG、Hcy水平比较（）

注：与对照组比较，*P＜0.05

组别 n Scr／（μmol／L） BUN／（mmol／L） Cys C／（mg／L） β2-MG／（mg／L） Hcy／（μmol／L）研究组 120 432.56±45.96* 25.18±2.71* 2.16±0.30* 13.36±1.31* 21.59±2.23*对照组 80 61.37±6.20 4.36±0.48 0.88±0.10 2.05±0.237.99±0.85

2 不同分期慢性肾衰竭患者血清Scr、BUN、Cys C、β2-MG、Hcy水平比较

研究组患者Scr、BUN、Cys C、β2-MG及Hcy水平随着病情发展而升高，分期越高，Scr、BUN、Cys C、β2-MG及Hcy水平越高，差异均具有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 不同分期慢性肾衰竭患者血清Scr、BUN、Cys C、β2-MG、Hcy水平比较（）

表2 不同分期慢性肾衰竭患者血清Scr、BUN、Cys C、β2-MG、Hcy水平比较（）

组别 n Scr（μmol／L） BUN（mmol／L） Cys C（mg／L） β2-MG（mg／L） Hcy（μmol／L）CKD3期组 50 284.44±29.55 15.45±1.56 1.57±0.19 11.06±1.19 15.54±1.42 CKD4期组 34 315.87±33.12 19.66±1.98 2.24±0.23 14.22±1.46 18.97±1.99 CKD5期组 36 458.79±48.79 29.84±2.85 2.88±0.30 17.99±1.81 29.59±3.22 F值 5.697 4.758 4.956 5.363 7.559 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

3 Scr、BUN、Cys C、β2-MG、Hcy相关性分析

根据Spearman秩相关分析显示，研究组患者血清Scr、BUN与Cys C、β2-MG及Hcy水平呈正相关（P＜0.05），见表3、表4。

表3 Scr与Cys C、β2-MG、Hcy相关性分析

表4 BUN与Cys C、β2-MG、Hcy相关性分析

4 Cys C、β2-MG、Hcy诊断效能比较

以GFR小于或等于60 mL／min 1.73m2作为CKD诊断标准。Cys C对慢性肾衰竭的灵敏度明显优于β2-MG和Hcy（P＜0.05），以灵敏度评价3者在慢性肾衰竭患者的诊断价值，Cys C在慢性CKD 3、4期的灵敏度明显优于 β2-MG和Hcy（P＜0.05），而CKD 5期3者灵敏度比较差异不具有统计学意义（P＞0.05），见表5和6，见图1。

表5 Cys C、β2-MG、Hcy诊断效能比较

表6 Cys C、Scr评价CKD灵敏度

图1 Cys C、β2-MG、Hcy ROC曲线图

讨 论

CRF是肾内科的常见疾病，发病率逐年上升。肾功能损伤会使患者出现贫血、呕吐、水肿和夜尿增多，病情严重者会发展为尿毒症，危及患者生命安全［6］。Scr和BUN是肾功能常用的检测指标，易受到肾性或非肾性因素的影响，检测的特异性及灵敏度较低［7］。因此，需要发现新的有效的标志物对于CRF的诊断具有重要意义。

Cys C亦称胱抑素C，是由机体有核细胞中分泌的是一种小质量分子，由120个氨基酸组成的碱性非糖化蛋白质，因分子质量小可自由出入肾小球滤过膜，被肾小管重吸收，不重回血液。Cys C水平与肾小球滤过率具有密切关系，是反映肾功能的较灵敏的指标［8］。Hcy是一种含巯基酸的蛋氨酸代谢的中间产物，本身并不参加蛋白质的合成。Hcy的代谢和排泄器官主要是肾脏，肾功能受损会直接影响其水平，有研究发现，Hcy可作为肾衰竭、动脉粥样硬化等多种疾病的标志物［9］。β2-MG被认为是衡量肾功能轻度下降的指标，主要作用是监测肾脏内近端肾小管的功能［10］。本研究结果发现，研究组血清Scr、BUN、Cys C、β2-MG和Hcy水平均明显高于对照组（P＜0.05）。结果表明Scr、BUN、Cys C、β2-MG和Hcy均可在一定程度上反映肾功能情况，与以往研究一致［11］。

CKD分期是是依据肾小球滤过率分期的，疾病严重程度越高，即分期越高，其肾小球滤过率减少也越多。CRF患者肾脏各功能细胞受损，肾小球滤过功能降低，进而影响Cys的滤过，血清中Cys水平提高，有研究表明血清中Cys C水平随肾功能损伤的加重而升高［12］。

CRF患者肾功能受损情况越严重，Hcy的排泄出体内的量就越少，参与Hcy转化的合成酶越少，Hcy水平越高［13］。研究发现，当患者肾功能损伤时，机体对β2-MG的清除能力降低，所以疾病程度越高，β2-MG水平越高［14］。本研究结果发现，研究组患者Scr、BUN、Cys C、β2-MG及Hcy水平随着病情发展而升高，分期越高，Scr、BUN、Cys C、β2-MG及Hcy水平越高，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结果说明Cys C、β2-MG及Hcy水平不仅能够反映CRF疾病的严重程度，还可以反映肾脏排泄及代谢功能，有助于早期肾损伤的诊断。其可能的原因是CRF患者肾功能受损程度越严重，机体对Cys C、β2-MG及Hcy能力就越低，导致三者水平也越高。进一步分析发现，研究组患者血清Scr、BUN与Cys C、β2-MG及Hcy水平呈正相关（P＜0.05），与以往研究一致［15］。BUN与Scr指标虽能反映CRF患者肾功能变化情况，但是肾脏具有较强大的储备能力，因此只有当肾小球滤过率降低＞50%时，患者体内BUN与Scr指标才会有较明显变化，延误了最佳治疗时间，而Cys C、β2-MG及Hcy在CRF患者早期水平变化相对明显，尤其是Cys C，更易及早发现疾病的变化，可采取有效的措施治疗此疾病。

利用ROC分析Cys C、β2-MG和Hcy对CRF患者早期肾功能的诊断效能，结果显示Cys C对CRF的灵敏度明显优于 β2-MG和Hcy（P＜0.05），以灵敏度评价3者在CRF患者的诊断价值，Cys C在慢性CKD 3、4期的灵敏度明显优于β2-MG和Hcy（P＜0.05），而CKD 5期3者灵敏度比较差异不具有统计学意义（P＞0.05），提示在CRF诊断上，Cys C的灵敏度明显优于β2-MG和Hcy，Cys C对评价CRF肾功能变化具有较高的临床价值。

综上所述，CRF患者Cys C、Hcy、β2-MG水平可反映慢性肾衰竭的严重程度，为慢性肾衰竭患者的治疗效果及预后提供参考，临床意义较高。三者联合检测有助于CRF的诊断及治疗效果的监测。本研究研究CRF患者例数较少，一定程度上影响结果。因此仍需扩大病例数进行深入研究，更好的指导临床。