抗核抗体谱在类风湿性关节炎患者中的检测意义

张思荣，陈艳芝

（云南省保山市人民医院检验科，云南 保山678000）

类风湿性关节是以对称性、多发性关节炎症为主的一种慢性全身性自身免疫性疾病，其发病率有不断上升趋势，且可造成肢体严重畸形［1-2］。类风湿性关节临床特征主要为进行性、慢性、对称性多关节炎，但病情和病程有个体差异，有时会伴多系统损害［3］。类风湿性关节炎病理改变主要为关节增生形成绒毛状突起、滑膜慢性炎症，侵犯关节软骨、肌腱、韧带等，从而造成关节功能丧失和畸形［4］。类风湿性关节炎具体发病机制较为复杂，认为其发生与免疫因素、感染因素、环境因素和遗传因素等相关［5］。目前，认为类风湿性关节炎为一种自身免疫性疾病，近年来研究报道证实抗核抗体（ANA）在自身免疫性疾病诊疗中具有重要临床意义［6］。ANA为针对细胞核内蛋白、RNA、DNA和细胞浆成分等的自身抗体，组成抗核抗体谱（ANAs）［7］。本文研究探讨ANAs检测在类风湿性关节炎患者中的运用价值，旨在为诊断和治疗类风湿性关节炎提供依据。见下文相关报道。

资料与方法

1 临床资料

纳入研究的类风湿性关节炎患者103例选自我院2015年9月至2017年9月间康复免疫科收治的类风湿性关节炎患者，依据《类风湿关节炎诊断及治疗指南》［8］中相关诊断标准。排除合并其他风湿病，如干燥综合征、进行性系统硬化症、系统性红斑狼疮、混合性结缔组织病等；晚期关节严重畸形者；精神疾病者；妊娠期及哺乳期妇女。纳入的103例患者中，男34例、女69例，年龄24～75岁、平均年龄53.1±5.7岁。另选我院2015年9月至2017年9月间到我院体检中心进行体检的健康体检者120例作为对照组，男性45例、女性75例，年龄24～75岁、平均年龄52.7±5.1岁。两组一般资料具有可比性。

2 试剂和仪器

2.1 主要试剂 人ANA试剂盒（欧蒙公司），人ANAs试剂盒（欧蒙公司）。

2.2 主要仪器 莱卡DM1000荧光显微镜，欧蒙免疫印迹仪。

3 方法

3.1 血清标本采集方法 所有研究对象均于清晨空腹采集5 mL外周静脉血，分离血清标本，置于-70℃下保存待测。离心条件：离心半径15 cm、离心转速3000 r／min、离心时间10 min。

3.2 ANA检测方法 采用间接免疫荧光法检测ANA，操作严格按照试剂盒说明书标准检测。

4 观察指标

（1）观察两组ANA阳性情况；（2）观察类风湿性关节炎患者ANA阳性核型分布情况；（3）观察两组ANAs各项阳性情况。

5 统计学方法

以统计学SPSS22.0处理，对于计数资料，采用χ2检验，百分率表示，具有统计学意义以P＜0.05表示。

结 果

1 两组ANA阳性情况比较

研究组ANA阳性率（60.19%）明显高于对照组（5.00%）（P＜0.05）。见表1。

表1 两组ANA阳性情况比较

2 类风湿性关节炎ANA阳性核型分布情况

类风湿性关节炎ANA阳性核型分布中，以胞浆颗粒型、核均质型和核颗粒型为主。见表2。

表2 类风湿性关节炎ANA阳性核型分布情况（n＝62）

3 两组ANAs各项阳性情况比较

见表3。类风湿性关节炎患者103例中，ANAs阳性71例，阳性率为68.93%；对照组80例中，ANAs阳性0例，阳性率为0.00%。类风湿性关节炎患者中，以抗Ro-52、抗SS-A和抗SS-B为主。研究组抗Ro-52、抗SS-A、抗SS-B、抗nRNP和抗dsDNA阳性率高于对照组，且有统计学差异（P＜0.05）；研究组抗核小体、抗CENPB、抗Sm、抗Scl-70、抗Jo-1、抗Histone和抗PCNA阳性率高于对照组（P＞0.05），差异无统计学意义。

表3 两组ANAs各项阳性情况比较［n（%）］

讨 论

类风湿性关节炎在出现症状2年内，50%～90%有关节受损的放射学改变，是常见的一种系统性自身免疫性疾病［9-11］。目前，类风湿性关节诊断主要依赖于其临床症状，作为一种自身免疫性疾病，其体内可能存在多种自身抗体，而这些自身抗体在诊断类风湿性关节中具有重要意义［14-15］。

ANA是具有多种细胞核成分的一种自身抗体，主要是检测总的抗核抗体的抗体，具有较高的阳性率但其特异性不强［16］。ANA靶抗原成分主要是由传统的细胞核抗原扩展到现在的整个细胞，包括细胞分裂周期相关蛋白、细胞浆、细胞骨架及细胞核等，且能够与不同来源的细胞核起反应，无种属特异性与器官特异性［17］。ANA是一种最常用的筛查自身免疫性疾病的检测项目，目前主要采用间接免疫荧光法和酶联免疫吸附法（ELISA法）测定ANA。其中间接免疫荧光法检测ANA的特点主要是基质中含抗原谱完整，能够产生特征性荧光模型。研究报道显示，类风湿性关节炎阳性率为33%～73%［18］。ANA阳性率波动较大，其原因可能是间接免疫荧光法ANA结果的判读主要取决于操作人员的工作经验和cut off值的设定。间接免疫荧光法检测ANA，不仅能够检测出ANA阳性，且能够观察ANA阳性荧光模式。本文研究表明，研究组ANA阳性率明显高于对照组，类风湿性关节炎ANA阳性核型分布中，以胞浆颗粒型、核均质型和核颗粒型为主。传统对自身免疫性疾病检测抗核抗体时，因ANA的高敏感性，首先采用间接免疫荧光法检测ANA，筛选自身抗核抗体，再对单一抗原成分特异性检测，从而明确体内的抗核抗体谱，进一步有利于明确自身免疫性疾病［19］。目前，国内主要采用免疫印迹法或斑点法检测ANAs，采用免疫印迹法能够一次同时检测15种不同抗原免疫球蛋白G类抗体［20］。不同类型的自身免疫性疾病的血清中能够出现一种或几种不同免疫球蛋白G类抗体。临床上关于自身免疫性疾病ANAs中不同抗体的出现情况和阳性情况很不一致。目前，临床上尚无有关ANAs检测在类风湿性关节炎患者中的相关研究。本文研究表明，103例类风湿性关节炎患者中，ANAs阳性71例，以抗Ro-52、抗SS-A和抗SS-B为主。

综上所述，ANAs检测在类风湿性关节炎患者中具有重要价值，能够明确患者血清中自身抗体类型，值得临床研究。但本文研究相对还存在一些不足之处，观察纳入研究对象相对较少，因此还需在后续研究中增加纳入研究对象，进一步深入研究，提供可靠的临床参考价值。