子痫前期患者血清PTEN水平变化及其与氧化应激和妊娠结局的关系

王玉婷 ，刘亚军，孙妍，李文婷

(青岛市妇女儿童医院，青岛266011)

子痫前期(preeclampsia，PE)是常见的妊娠期疾病，主要表现为在妊娠20周以后出现的高血压、高蛋白尿，可对患者的心、肝、肾、脑等重要脏器造成一定损伤，并且可导致胎儿宫内缺氧、生长受限甚至胎死宫内，对患者及胎儿的健康造成巨大威胁[1]。第10号染色体缺失性磷酸酶和张力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten，PTEN)是一种抑癌基因，可通过负调控PI3K/AKT途径调节细胞的增殖、迁移等，过往研究[2，3]多围绕其与恶性肿瘤展开。然而近年研究[4]显示，PTEN在PE患者胎盘组织及外周血中呈异常表达，且表达水平与新生儿的预后有关，提示其可能在PE的疾病进展中起到一定的作用。氧化应激反应的激活是PE发病的重要环节[5]，而PTEN是一种与氧化应激密切相关的基因，但目前少有PTEN在PE氧化应激中的作用机制相关研究报道。我们观察了PE患者血清PTEN的表达变化，进一步分析其与PE患者氧化应激指标及不良妊娠结局的关系，以探讨PTEN在PE中的表达及临床意义，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2018年3～12月间我院收治的PE患者116例，均符合以下纳入排除标准，纳入标准：参考第八版《妇产科学》中关于PE的诊断标准[6]，入选病例均确诊为PE；均为单胎妊娠；均为自然受孕；④对本次研究内容知情，且在知情同意书中签字。排除标准：合并有恶性肿瘤者；合并有其他妊娠期疾病者；合并重要脏器功能损伤者；④合并精神疾病、认知功能障碍、免疫功能障碍者；⑤不在我院生产者。根据疾病严重程度[6]将116例PE患者分为重度PE组52例、轻度PE组64例。另选取同期在我院体检的健康妊娠女性50例作为对照组。三组一般资料见表1。重度PE组的舒张压和收缩压高于轻度PE组，重、轻度PE组的舒张压、收缩压、体质量指数高于对照组，差异均有统计学意义(P均<0.05)。本次研究通过我院伦理委员会的批准。

1.2 各组血清血清PTEN、8-iso-PGF2α、MDA、SOD检测 抽取三组空腹静脉血5 mL，采用3 000 r/min离心10 min，收集上清液，采用酶联免疫吸附法检测血清PTEN、8-异前列腺素F2α(8-iso-prostaglandin F2α，8-iso-PGF2α)，采用硫代巴比妥酸比色法检测血清丙二醛(malondialdehyde，MDA)，采用黄嘌呤氧化酶法检测血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD),相关试剂盒购于南京建成生物工程研究所，严格遵循相关试剂盒说明书进行操作。重复3次，取平均值。

表1 三组一般资料比较

注：与对照组比较，#P<0.05；与轻度PE组比较，*P<0.05。

1.3 妊娠结局观察 PE患者均随访至分娩，记录母亲及新生儿的健康情况，若出现胎盘早剥、子痫、HELLP综合征、医源性早产或引产、胎儿生长受限、胎儿窘迫、胎儿死亡等中的任意一项或多项则视为存在不良妊娠结局。

1.4 统计学方法 采用SPSS20.0统计软件进行处理。计数资料以%表示，采用χ2检验；计量资料均符合正态分布，以表示，多组间比较采用单因素方差分析，多组间两两比较采用LSD-t检验；Pearson相关性分析法分析血清PTEN水平与PE患者体质量指数、舒张压、收缩压及血清8-iso-PGF2α、SOD、MDA水平相关指标的相关性；采用非条件Logistic多元回归分析不良妊娠结局的独立危险因素以妊娠结局为应变量，其余指标为自变量，建立非条件Logistic多元回归模型。不良妊娠结局赋值为1，正常妊娠结局赋值为0，自变量均以均值为界，低于均值则为低表达，高于均值则为高表达，其中低表达赋值为1，高表达赋值为0。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

三组血清PTEN、8-iso-PGF2α、SOD、MDA水平比较见表2。

表2 三组血清PTEN、8-iso-PGF2α、SOD、MDA水平比较

注：与对照组比较，#P<0.05；与轻度PE组比较，*P<0.05。

116例PE患者中正常妊娠80例,不良妊娠36例。不同妊娠结局PE患者血清PTEN、8-iso-PGF2α、SOD、MDA水平比较见表3。

表3 不同妊娠结局PE患者血清PTEN、8-iso-PGF2α、SOD、MDA水平比较

注：与正常妊娠者比较，＊P<0.05。

血清PTEN水平与PE患者舒张压、收缩压及血清8-iso-PGF2α、MDA水平呈负相关(r分别为-0.382，-0.367，-0.451，-0.432；P均<0.05)，与血清SOD水平呈正相关(r=0.534；P<0.05)，与体质量指数无关(r=-0.138；P>0.05)。

血清PTEN、SOD水平过低是PE患者不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.05),见表4。

表4 PE患者不良妊娠结局的非条件Logistic多元回归分析

3 讨论

PE是导致孕妇和围产儿死亡的重要原因之一，邹郁松等[7]对7 794例高危及危重孕产妇的临床资料进行整理，结果显示重度PE和(或)子痫是排在首位的危重疾病，占比高达59.25%。目前PE的具体发病机制尚未完全阐明，两阶段学说是关于PE发病机制的经典理论，其认为PE发病主要分为两个阶段，第一阶段为滋养层细胞浸润能力下降，导致滋养细胞浸润子宫螺旋动脉过浅，使得胎盘出现缺血、缺氧现象，进而促进大量的胎盘因子分泌，第二阶段为胎盘因子进入母体血液循环，激活炎症反应和氧化应激反应，导致血管内皮细胞功能受损，进而引发一系列的病变[8]。从两阶段学说可以看出，氧化应激的激活是PE的重要病理改变。PTEN是一种蛋白酪氨酸磷酸酯酶，其催化活性依赖于高反应活性的半胱氨酸，然而半胱氨酸极易被氧化，因此在过氧化的坏境下易导致PTEN氧化失活[9]。除此之外，PTEN也可以调节氧化应激反应，杨玲竹等[10]研究显示，PTEN可通过正向调控抗氧化蛋白Peroxiredoxin Ⅱ的表达来起到抗氧化作用。由此可见，PTEN与氧化应激密切相关，然而PTEN是否能通过介导氧化应激来参与PE的疾病进展还有待进一步的研究。

氧化应激是指体内氧化与抗氧化系统失衡，主要表现为活性氧、氧化产物增多，抗氧化酶减少，导致机体被过度氧化。8-iso-PGF2α是氧自由基攻击细胞膜上的花生四烯酸而形成的稳定产物，而MDA是脂质过氧化反应的终末产物，二者均是常见的过氧化产物，SOD是生物体内重要的抗氧化酶，是机体消除氧自由基的重要蛋白[11，12]。本研究结果显示，重、轻度PE组血清中8-iso-PGF2α、MDA水平高于对照组，而SOD水平低于对照组，说明PE患者体内的存在明显的氧化应激。本研究还显示，PTEN在PE患者血清中呈低表达，且其表达水平与舒张压、收缩压、8-iso-PGF2α、MDA呈负相关，与SOD呈正相关。血管内皮功能受损是血压升高的病理基础[13，14]。闫博阳等[15]研究显示，PTEN可逆转氧化低密度脂蛋白对动脉粥样硬化小鼠血管内皮功能造成的损伤，其作用机制可能与STAT3信号通路的激活有关。另一方面，PTEN也可以通过调节氧化应激来减轻血管内皮细胞的氧化损伤。因此可以推测，PTEN主要通过调节血管内皮功能来影响血压。Iwasa 等[16]研究显示，PTEN表达下调可导致氧化产物增多。研究[17]显示，PTEN可降低细胞内活性氧的水平，并可调控Cu/Zn-SOD蛋白的表达。由此可见，PTEN参与了氧化与抗氧化系统的调节，可抑制机体的氧化应激，进而影响8-iso-PGF2α、MDA、SOD等的水平。临床治疗PE的主要思路是降低患者的血压、改善妊娠结局，然而由于孕期治疗受到诸多限制，早产、胎儿生长受限、胎儿窘迫等不良妊娠结局依然时有出现[18]。本研究结果显示，PTEN、SOD水平过低是PE患者不良妊娠结局的独立危险因素。这可能是由于PTEN、SOD水平过低会导致机体出现氧化性损伤，加重PE患者的病情，进而影响患者的妊娠结局。然而本次研究选取的病例数较少，且为单中心研究，以上结论还有待多中心、多病例数的研究进行验证。

综上所述，PTEN在PE患者血清中呈低表达，且其表达水平与机体的氧化应激程度有关。血清PTEN水平过低是PE患者不良妊娠结局的独立危险因素。血清PTEN可能在PE的疾病进展中起到一定的作用。