血清sLOX-1在2型糖尿病合并OSAHS中的变化及与下肢血管病变的关系

白亚丽 范榕 赵雅宁 戈艳蕾 张馨

(华北理工大学，河北 唐山 063000)

凝集素样氧化低密度脂蛋白受体(LOX)-1是氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)在动脉粥样硬化(AS)斑块细胞表面的主要受体，参与AS斑块形成及破裂。LOX-1在细胞表面大量表达后经蛋白酶水解释放可溶性LOX(sLOX)-1，血清sLOX-1水平能够反映LOX-1的表达水平〔1〕。近年来学者对sLOX-1在急性冠脉综合征(ACS)、阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)、2型糖尿病(T2DM)等中的变化进行了研究，发现血清sLOX-1的变化是ACS的独立预测因子〔2～4〕。研究发现OSAHS与机体的糖代谢密切联系，糖尿病(DM)合并OSAHS的患者血糖控制差〔5〕。OSAHS越严重，血糖控制越差，发生DM慢性并发症的危险性也越高，但血清sLOX-1在DM合并OSAHS的患者中如何变化尚不清楚。下肢血管病变(PAD)是DM常见的大血管并发症之一。本研究探讨T2DM合并OSAHS患者血清sLOX-1水平的变化及与PAD形成的关系。

1 资料与方法

1.1研究对象 选取华北理工大学附属医院2015年3月至2016年10月就诊的T2DM患者，行夜间连续7 h以上多导睡眠图监测，依据OSAHS入选标准，筛选出T2DM伴OSAHS患者171例为观察组，单纯T2DM患者231例为对照组，两组性别、年龄、DM病程、糖化血红蛋白(HbA1c)、有无慢性病等方面差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。纳入标准：①经血糖监测符合世界卫生组织(WHO)1999年制定的T2DM诊断标准；②OSAHS患者符合中华医学会呼吸病学分会睡眠呼吸障碍学组制定的OSAHS诊治指南的诊断标准；③知情同意。排除标准：①急慢性感染性疾病、肿瘤及肿瘤术后；②服用镇静、助眠等神经、精神类药物者；③严重心、肝、肾功能不全者；④妊娠期患者；⑤合并甲状腺功能异常或有其他内分泌疾病。

表1 两组一般资料比较

慢性病包括高血压、高脂血症

1.2PAD检测 入组患者均于入院当日或次日采用德国西门子AcusonSequoia C512型彩色多普勒超声诊断仪，7.5～11.0 MHz线阵探头，患者分别采用俯卧位和仰卧位，检测动脉包括双侧股浅动脉、胫后动脉及足背动脉。患者均由华北理工大学附属医院超声诊断室同一位医师负责且检测前未被告知患者分组情况。PAD的诊断标准：将PAD的性质分为4种，并依据病变的严重程度评分，①血管内膜厚度：不厚(内膜增厚<1.0 mm)为0分，轻度增厚(内膜增厚1.0～1.2 mm)为1分，中重度增厚(内膜增厚>1.2 mm)为2分；②动脉硬化程度：正常为0分，轻度硬化(动脉内膜回声强但未增厚，无斑块)为1分，中重度硬化(轻度伴有斑块或狭窄)为2分；③斑块：正常(未发现斑块)为0分，单发为1分，多发斑块为2分，弥漫性斑块为3分；④狭窄：无狭窄为0分，轻度狭窄(狭窄程度为30%～50%)为1分，中重度狭窄(狭窄程度为51%～75%)为2分，闭塞(无血流)为3分。含有1种及以上则可诊断为PAD，得分越高血管病变越重。

1.3多导睡眠监测 符合入组的T2DM患者入院后均采用YH1000多导睡眠仪(澳大利亚Compumedics公司)进行多导睡眠图(PSG)监测，内容包括口鼻气流、体位、胸腹呼吸运动、鼾声、呼吸暂停低通气指数(AHI)及最低血氧饱和度(LSaO2)等，监测当日患者禁饮酒、浓茶、咖啡，禁服用镇静催眠类药物，2 w内无上呼吸道感染。所有研究对象需行整夜连续监测，时间不少于7 h。数据经睡眠分析软件初步分析后由人工进一步纠正，最终由专业医师确定监测结果。主要采集AHI及LSaO2为主要参考指标。

1.4血清sLOX-1水平监测 所有患者于入院后次日晨抽取空腹静脉血2 ml，以3 000 r/min离心20 min，分离血清，取上清液放置于-80℃下保存待测。待标本收齐后解冻统一采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定，试剂盒由天津灏洋生物制品科技有限责任公司提供。本研究依照两组患者血清sLOX-1的检测结果按照P50分层：血清sLOX-1水平超过P50者为异常。

1.5血液生化指标检测 所有患者于入院后次日清晨空腹(入院当日晚8点起禁饮食)抽取静脉血，采用葡萄糖氧化酶法测定HbA1c水平。

1.6统计学方法 采用SPSS17.0软件进行t检验，χ2检验，Pearson相关分析。

2 结 果

2.1两组患者PAD检出率、血清sLOX-1水平比较 观察组PAD检出率明显高于对照组(P<0.00)；与对照组比较，观察组患者血清sLOX-1水平显著升高(P<0.001)，见表2。

表2 两组PAD检出率、血清sLOX-1水平比较

2.2观察组患者AHI、LSaO2与血清sLOX-1水平的相关性分析 观察组AHI与血清sLOX-1含量呈正相关(r=0.791,P=0.000)，LSaO2与患者血清sLOX-1含量呈负相关(r=-0.705,P=0.000)。

2.3观察组内不同水平sLOX-1患者PAD发生率的比较 sLOX-1异常组PAD检出率〔n=81,67例(60.9%)〕显著高于正常组〔n=90,43例(39.1%)〕(χ2=8.475,P=0.004)。

2.4观察组PAD单因素分析 观察组患者依据有无PAD分为PAD组和无PAD组，两组在DM病程、HbA1c、OSAHS病情方面，差异有统计学意义(P<0.01) ，见表3。

表3 观察组PAD单因素分析〔n(%)〕

2.5观察组PAD多因素分析 观察组内以是否有PAD(有=1，无=0)为因变量，以DM病程、HbA1c、AHI、LSaO2、sLOX-1为自变量进行Logistic回归分析，多因素分析结果显示：DM病程、AHI、LSaO2、sLOX-1为OSAHS合并T2DM PAD的影响因素，见表4。

表4 观察组PAD多因素分析

3 讨 论

LOX-1最早在内皮细胞中表达，后来又发现在巨噬细胞、软骨细胞、平滑肌细胞中也有表达，具有结合、内吞、降解ox-LDL的功能〔6,7〕。近年来有研究显示sLOX-1与OSAHS也具有一定相关性。Xu等〔8〕研究结果发现OSAHS患者血清sLOX-1水平显著高于对照组，且升高程度与OSAHS的严重程度密切相关。也有学者指出〔9〕重度OSAHS男性血清中的sLOX-1 表达水平升高，在经过气道正压通气(CPAP)治疗1个月后，患者sLOX-1 水平显著下降。这表明，sLOX-1可能成为评价OSAHS严重程度和预后的新型指标。本研究结果提示血清sLOX-1水平在合并OSAHS后显著升高，且随着OSAHS病情加重，血清sLOX-1水平越高。OSAHS引起DM患者血清sLOX-1升高的机制可能为：①间歇低氧：OSAHS患者慢性间歇性低氧激发氧化应激反应可诱导急性期蛋白基因及相关细胞因子的表达增加，进而诱导LOX-1的上调〔10〕。②炎症反应：OSAHS属于炎症性疾病，研究发现IL-6水平的升高可刺激LOX-1的表达上调〔11〕。③交感神经兴奋：OSAHS反复的低氧/复氧可导致交感神经兴奋，研究显示〔12〕交感神经兴奋可通过诱导血管紧张素Ⅱ的表达引起sLOX-1的释放。此外本研究还说明OSAHS加重了DM患者PAD的发生，可能与血清sLOX-1的升高有关。

PAD是T2DM患者致死、致残的重要原因，其病理基础是AS〔13〕，氧化应激、炎症反应、胰岛素抵抗在AS发生、发展中发挥重要作用。本研究结果可得出血清sLOX-1水平与OSAHS病情呈正相关关系，当OSAHS病情越严重，血清sLOX-1水平越高，患者下肢血管病变越严重。本研究多因素分析结果说明血清sLOX-1参与了OSAHS合并T2DM患者血管病变的发生发展过程。机制可能为：被转运到血管内皮细胞的ox-LDL一方面可抑制血管内皮细胞的活性功能，促进单核细胞和血小板活化，加速单核细胞向血管内皮细胞黏附和聚集，促进泡沫细胞形成，触发AS〔14〕；另一方面，LOX-1还可介导ox-LDL促进血管平滑肌细胞增殖和迁移，诱导细胞凋亡，加速动脉硬化的进程〔15〕。此外，本研究多因素分析显示，长期的高糖刺激不仅导致胰岛β细胞功能进行性下降，同时患者炎症水平、糖脂代谢紊乱程度也不断加重，因此下肢动脉硬化的发生率也随之增高。间歇低氧可导致机体氧化应激反应增强，脂质过氧化，细胞黏附因子表达增强，导致单核细胞与内皮细胞黏附、聚集，引发血管内皮损伤；此外频繁低氧还导致炎性因子水平增高，引发炎症反应，导致大量单核巨噬细胞向血管内膜浸润，促进动脉硬化及血栓形成。本研究中HbA1c仅在单因素分析中有统计学差异，但并未进入多因素回归模型，考虑与样本量较少有关。

综上，OSAHS加重T2DM患者PAD的程度，因此对于就诊的T2DM患者若怀疑合并OSAHS疾病应及早进行筛查，以便及时给予有效干预，从而改善DM患者预后及血管并发症的严重程度。检测OSAHS合并T2DM患者血清sLOX-1水平对患者的PAD程度具有警示作用。