聚苹果酸钙对肉鸡血清钙、磷含量的影响

赵芝琼， 鲍文梅， 杨 林， 李正华， 李锦锦， 王立克， 王 翔*

(1. 安徽科技学院 动物科学学院，安徽 凤阳 233100；2. 安徽省饲料与健康养殖行业协会,安徽 合肥 230000；3. 安徽雪郎生物科技股份有限公司,安徽 蚌埠 233000)

聚苹果酸是一种具有生物相容性和生物可降解性的高分子聚酯[1]，其生产是以L-苹果酸为单体合成的，且侧链上有大量游离羧基，使其在水中水解和易被修饰，同时可降低溶液pH值[2]。此外，聚苹果酸还具有很好的生物可降解性和免疫原性等多方面优点[3]，且易被动物机体消化吸收利用不会对动物机体无毒害作用，并具有近似苹果的酸味，味道柔和，口感清甜等特点[4]。

近年来聚苹果酸在缓释系统、食品材料等多个领域展现的卓越优势和极高的经济价值，使其受到广泛关注[5]。聚苹果酸具有缓释特性，可以将分解产生的苹果酸从畜禽胃组织逐渐释放到小肠，其携带的有机钙有利于肠道吸收。同时还可以用作酸化剂，维持肠道健康，平衡胃肠道菌群，从而提高饲料利用率[6]。在肉鸡生长发育过程中钙、磷是不可或缺的矿物元素，是构成机体的重要成分。研究表明，当饲粮中钙磷水平缺乏时会降低肉鸡生产性能。当饲料中的钙、磷含量不能满足肉鸡正常需求时，机体会主动分解骨骼中的钙、磷以维持机体需求，导致骨中钙、磷含量降低[7]。若肉鸡缺乏磷时则会导致食欲不振、生产力下降，严重者可导致死亡[8]。目前尚未发现相关聚苹果酸钙对肉鸡影响的研究报道，本试验旨在研究聚苹果酸钙对肉用仔鸡血液中钙、磷含量的影响，为聚苹果酸钙在肉鸡生产中的应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料与试验动物

聚苹果酸钙由安徽雪郎生物科技股份有限公司提供，为液态聚苹果酸钙和固态聚苹果酸钙；钙与磷检测试剂盒由南京建成生物工程研究所提供；肉用仔鸡由蚌埠大成集团公司提供。

1.2 试验分组

试验采用单因素完全随机试验设计，选择1日龄AA肉鸡294只随机分成7个处理组，每个处理组设置3个重复，每个重复14只鸡。对照组饲喂基础日粮，常规饮水。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分別在饮水中添加2、4、6 mL/L的液态聚苹果酸钙；试验Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组分別在基础日粮中添加4、8、12 g/kg的固态聚苹果酸钙。

1.3 饲养管理与试验基础日粮

试验采用立体笼养方式，自由采食和饮水。试验期间的温度、湿度、光照、通风和免疫按常规饲养方式进行。根据肉鸡的生长特点，基础日粮为玉米-豆粕，参照NY/T33-2004配制，并分为前期(1～21 d)与后期(22～42 d)两个饲养阶段。各组的日粮组成与营养水平见表1。

表1 肉鸡基础日粮饲料配方和营养水平

1.4 血清的采集与保存方法

分别在21、42 d进行翅静脉采血，采血前处理为每组随机抽取8 只，再禁食12 h，采血量6～10 mL，置于非抗凝管内，并在4 ℃冰箱中静置30 min以上，等血清自然析出后，在4 ℃ 3 500 r/min离心10 min，分离血清，在-20 ℃条件下冷冻保存。

1.5 检测方法

钙离子检测：采用酶标仪检测，取10 μL的血清样品加入碱性溶液和甲基百里香酚蓝(1∶2)混合液中，混匀，静置5 min 在610 nm的波长下，检测待测样品的光密度(OD)值，并计算钙离子含量。

磷离子检测：取待测血清加入钼酸显色剂中混匀，37 ℃水浴30 min，冷却至室温，使用紫外可见光分光光度计在波长660 nm 的条件下，检测样品的吸光度值，并利用磷标准曲线计算出磷含量。

1.6 数据分析处理

使用SPSS 23.0计算各组数据的平均值和标准差，并对均数进行显著性检验，得出数据均以均值±标准差(Mean ±SD)来表示，P<0.05为差异显著。

2 结果与分析

2.1 聚苹果酸钙对21日龄肉鸡血液中钙、磷含量的影响

由表2可知，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组血清中的钙含量较对照组分别提高了1.55%(P>0.05)、2.58%(P>0.05)和6.70%(P<0.05)。试验组血液中磷含量较对照组差异不显著。与对照组相比，试验Ⅰ和Ⅱ组的钙磷比(Ca/P)分别提高了1.98%(P>0.05)和1.98%(P>0.05)差异不显著，试验 Ⅲ 组比对照组分别提高7.92%(P<0.05)差异显著。

试验 Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组血清中的钙含量较对照组分别提高了1.56%(P>0.05)、4.12%(P>0.05)和10.1%(P<0.05)，其中试验Ⅵ组差异显著(P<0.05)，试验Ⅳ、Ⅴ两组差异不显著(P>0.05)。试验组血清中磷含量较对照组差异不显著。此外，试验Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组的钙磷比较对照组分别提高5.12%、7.70%和13.86%差异显著(P<0.05)。

表2 聚苹果酸钙对21日龄肉鸡血清中钙、磷含量的影响

注：同列不同数据肩标标注有不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。下同。

2.2 聚苹果酸钙对42日龄肉鸡血清中钙、磷含量的影响

由表3可知，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的钙含量较对照组分别提高了2.06%、5.67%和7.73%。其中：试验Ⅰ组差异不显著(P>0.05)，试验Ⅱ、Ⅲ两组差异显著(P<0.05)。试验组血清中磷含量较对照组差异不显著。此外，与对照组相比，试验Ⅰ组的钙磷比提高了1.96%，差异不显著(P>0.05)，试验Ⅱ、Ⅲ组分别提高了7.84%和9.80%，差异显著(P<0.05)。

试验Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组的钙含量较对照组分别提高了5.83%、6.78%和10.60%。其中：试验Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ差异显著(P<0.05)；试验组磷含量与对照组差异不显著；此外，与对照组相比，试验Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组的钙磷比分别提高7.27%、9.73%和12.82%差异显著(P<0.05)。

表3 聚苹果酸钙对42日龄肉鸡血液中钙、磷含量的影响

3 结论与讨论

试验表明，饮水中4～6 mL/L和日粮中4～12 g/kg的聚苹果酸钙均能显著性提高肉鸡血清中的钙含量和钙磷比，促进对钙的吸收，对磷含量的影响则差异不大。其中，试验中日粮中添加12 g/kg的聚苹果酸钙对提高肉鸡血清中的钙含量和钙磷比的影响最大。鞠婷婷等[9]研究认为固体和液体的丁酸钠均能改善肉鸡的营养代谢，缓解机体应激条件下的不良反应。吴醒强[10]研究表明有机酸可以显著性的提高肉鸡机体性能，增强肉鸡对营养物质的吸收。李赞等[11]研究结果表明L-苹果酸能提高肠道消化酶活性,促进营养物质的消化和吸收，提高小肠对钙离子的吸收。程义等[12]认为苹果酸是体内三羧酸循环的中间代谢产物，在其氧化过程中可以减缓钙离子的释放从而提高钙的吸收利用率。本研究发现，0～21 d阶段和22～42 d阶段试验组的肉鸡血清中磷含量略微降低，钙含量和钙磷比有不同程度的增长。李万佳等[13]的研究表明动物机体内血磷和骨骼中的磷酸盐等含量处于动态平衡，当血钙浓度上升时抑制了甲状旁腺激素(PHT)的分泌，促使磷排泄增加，降低血磷浓度，提高了钙磷比，促进动物的骨骼发育。Anwar等[14]的研究表明血钙的浓度升高时会降低回肠的的表观消化率，导致非植酸磷的吸收受到影响，血液中的磷含量降低，从而提高钙磷比。邱梅平的研究表明，血液中钙磷的容度积是个常数，血钙的浓度升高会导致血磷的浓度降低，其整体的平衡是由于PTH的调节[15]。