PTX3在非酒精性脂肪肝患者血清中的表达及与肝纤维化评分的相关性

汤群 欧强

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)是一种与胰岛素抵抗(insulin resistance，IR)和遗传易感密切相关的代谢应激性肝损伤，疾病谱包括非酒精性肝脂肪变、非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis，NASH)、肝硬化和肝细胞癌[1-2]。随着肥胖、糖尿病和代谢综合征的全球化流行，NAFLD的发病率也逐渐升高，已成为慢性肝病的重要病因之一。大多数病情稳定，少部分NAFLD患者会进展为肝纤维化。

血清正五聚体蛋白-3(Pentraxin 3，PTX3)是一种长链五聚体蛋白，被认为是一种新的局部炎症和损伤的反应因子[3]。最近有研究表明，PTX3与2型糖尿病患者血糖、IR发生有关[4]，而IR是NAFLD发生的重要机制之一。为进一步明确PTX3在NAFLD患者血清中表达情况及与非酒精性脂肪性肝纤维化评分(NAFLDFS)的相关性，本研究检测并分析了143例研究对象血清PTX3表达情况，现报道如下。

资料和方法

一、 研究对象

选择2016年6月至2017年12月在上海市第八人民医院门诊就诊的成年NAFLD患者73例，诊断符合2018年中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组制定的《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南》的诊断标准[5]。另选取年龄、性别匹配的70名成年健康体检者作为健康对照组。所有患者均签订知情同意书，并经医院伦理委员会批准同意。

二、 方法

所有研究对象均详细询问其病史，记录年龄、性别、身高、体质量等一般资料，计算BMI。研究对象抽取空腹静脉血，高速离心20 min。收集上层血清1 ml于Eppendorf管中，置-80℃超低温冰箱保存待测。常规检测天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)，胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素、血小板、白蛋白，并采用稳态模型评估法计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR=FBG×空腹胰岛素/22.5)和NAFLDFS。ELISA法检测血清PTX3表达水平。

NAFLDFS[6]=-1.675+0.037×年龄(年)+0.094×BMI+1.13×空腹血糖调节受损或者糖尿病(是=1,不是=0)+0.99×ASI/ALT(率) -0.013×血小板(109/L)-0.66×白蛋白(g/dl)。根据NAFLDFS低诊断阈值-1.455，将NAFLD患者分成无肝纤维化组(NAFLDFS<-1.455)和肝纤维化危险组(NAFLDFS≥-1.455)。

三、 统计学方法

结 果

一、一般情况

NAFLD组73例，年龄18～84岁，其中男性39例，女性34例；健康对照组70名，年龄25～74岁，其中男性32例，女性38例。两组患者年龄、性别差异无统计学意义(P>0.05)。NAFLD组BMI(26.9±3.7对22.3±3.3，P<0.01)和腰围(91.2±8.5对77.6±6.6，P<0.01)明显高于健康对照组(P<0.01)。

二、NAFLD患者和健康对照者生化指标比较

NAFLD患者组AST、ALT、TC、TG、FBG、HOMA-IR、PTX3均显著高于健康对照组(P<0.01)，见表1。

三、不同肝纤维化程度NAFLD患者指标比较

肝纤维化危险组和无肝纤维化组BMI、AST、ALT、TC、TG、HOMA-IR水平差异无统计学意义(P>0.05)，而肝纤维化危险组PTX3、FBG水平明显高于无肝纤维化NAFLD患者组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

四、PTX3与NAFLDFS、FBG的相关性分析

Pearson相关性分析结果显示，PTX3与 NAFLDFS(r=0.429，P<0.01)、FBG(r=0.339，P<0.01)呈显著正相关，见图1。

讨 论

PTX3是一类含381个氨基酸的五聚体结构蛋白，分子量为40～50 KD[7]。单核/巨噬细胞、树突状细胞、脂肪细胞等在IL-1、TNF-ɑ、脂多糖等炎症因子的刺激下分泌PTX3，参与局部炎症反应，是炎症反应持续存在的重要标志物。PTX3可以结合多种可溶性受体配基，参与免疫防御、动脉粥样硬化形成和发展、细胞凋亡和血管再生的调节，具有保护或炎症损害等多种生物学效应[8]。还有研究发现PTX3与2型糖尿病患者血糖水平、IR和心血管事件发生有关[4]。

表1 NAFLD患者和健康对照者生化指标

表2 不同肝纤维化程度NAFLD患者生化指标比较

图1 PTX3与NAFLDFS、FBG的相关性

NAFLD 是全球最常见的慢性肝病，普通成人NAFLD 患病率介于6.3%～45%[9]。NAFLD发病机制目前尚未完全阐明，推测可能与IR、慢性炎症、氧化应激等因素有关[10]。有研究发现在小鼠中过表达PTX3脂肪因子可降低FBG，但可增加脂肪性肝炎的风险[11]。为明确PTX3在健康人群和NAFLD患者血清中的表达情况，本研究检测了143例研究对象血清PTX3水平，结果显示NAFLD患者血清PTX3水平显著高于正常对照组，与邓银芝等[12]报道结果一致，提示NAFLD患者体内炎症反应持续存在，PTX3升高可能与NAFLD发生发展有关。

尽管大多数NAFLD患者病情稳定，但仍有10%～20%患者会进展为NASH肝纤维化。由于肝穿刺活组织检查具有一定创伤性，目前很多非侵入性诊断方法用于替代肝活检。Angulo等[13]利用常规的临床和实验室数据，创建了一个NAFLD患者肝纤维化程度的评分系统(NAFLDFS)。ROC曲线下面积在实验组和验证组分别为0.88和0.82。NAFLDFS低于-1.455可以排除肝纤维化。Wong等[14]在中国人群中对该评分进行了验证，认为此评分低诊断阈值有较高排除肝纤维化的阴性预测值。通过NAFLDFS有助于判断NAFLD患者有无进展性肝纤维化。

Boga S等[15]研究发现NAFLD患者血浆PTX3水平与NAFLD活动度评分、纤维化分期和脂肪变性分级显著相关，提示PTX3可能是诊断NASH肝纤维化的一种重要血清学标志物。为明确PTX3与NAFLDFS的相关性，本研究按NAFLDFS的低诊断阈值(-1.455)将73例NAFLD患者分为无肝纤维化组和肝纤维化危险组，检测两组PTX3及其他生化指标。研究发现肝纤维化危险组和无肝纤维化组AST、ALT、TC、TG、HOMA-IR水平并差异无统计学意义，而肝纤维化危险组PTX3水平显著高于无肝纤维化组。Pearson相关系数分析进一步显示，NAFLDFS与PTX3显著正相关，PTX3越高，发生肝纤维化的风险越大。本研究结果证实，NAFLD患者高PTX3水平与肝纤维化密切相关，可作为NAFLD相关肝纤维化的一个新的评价指标。