恩替卡韦分散片对HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者T细胞亚群的影响

钟艳丹 赵磊 熊清芳 胡志亮 杨永峰

恩替卡韦(entecavir)为环氧羟碳脱氧鸟苷，具有强有力抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用，且耐药率低，为国内外慢性乙型肝炎(CHB)防治指南一致推荐的抗HBV治疗的一线药物[1-3]。恩替卡韦分散片是江苏正大天晴药业研制的用于CHB抗病毒治疗的药物，前期研究显示其药效学、动物毒性试验与人体药代动力学与恩替卡韦相似。研究报道，HBeAg阴性CHB患者HBsAg的携带率占33%，且呈增加趋势[4]。本文通过比较HBeAg阴性CHB患者在恩替卡韦分散片治疗前后T淋巴细胞的变化，旨在了解恩替卡韦分散片治疗对HBeAg阴性CHB患者免疫功能的影响。

资料和方法

一、病例来源

62例HBeAg阴性CHB患者均系2015年1月至2017年12月在我院门诊及住院患者，其中男46例，女16例，年龄20～56岁，平均年龄(35±8)岁，诊断符合2010年《慢性乙型肝炎防治指南》的标准[5]，并符合下列入选条件：(1)HBeAg阴性；(2)血清HBV DNA>1×104拷贝数/ml；(3)ALT>2倍正常值上限。排除标准：(1)既往使用过核苷(酸)类似物、干扰素或其他免疫调节剂(如胸腺肽)；(2)合并甲型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、巨细胞病毒和EB病毒感染者；(3)合并妊娠、肝硬化、甲状腺功能亢进症、系统性红斑狼疮，严重心脏、肾、内分泌和造血系统疾病者。

二、治疗方法

62例患者除一般护肝治疗外，加用恩替卡韦分散片(江苏正大天晴药业)0.5 mg，口服，1次/d，观察24周。

三、检测方法

(1)肝功能(包括ALT、AST、TBil、Alb、GLO)：治疗前后用Beckman公司自动生化仪检测；(2)血清HBV标志物(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe):治疗前后用微粒子酶免疫荧光检测(AxSYM系统，购自美国Abbott公司)；(3)HBV DNA：采用罗氏(Cobas Ampliprep/Cobas Taqman)第二代实时PCR法(检测下限值为20 IU/ml)；(4)T细胞亚群：采用流式细胞仪检测(荧光标记单克隆抗体购自Beckman-Coulter公司)。

四、统计学处理

结 果

一、 疗效情况

在治疗24周结束时，62例CHB患者肝功能ALT、HBV DNA水平较治疗前明显下降，差异有统计学意义(P<0.05，表1)。

二、 治疗前后外周血T淋巴细胞亚群的变化

患者治疗后外周血CD3+、CD4+和CD8+细胞计数较治疗前升高，CD4+/CD8+比值也明显高于治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)(表2)。

讨 论

恩替卡韦分散片是国产新一代鸟嘌呤核苷类似物，通过在人体内磷酸化成为具有活性的三磷酸盐，与HBV多聚酶的天然底物三磷酸脱氧鸟嘌呤核苷竞争，从而作用于HBV复制的启动、逆转录和合成三个步骤，阻断HBV病毒的复制，达到治疗慢性乙型肝炎的目的[6]。本研究通过观察62例HBeAg阴性CHB患者的治疗效果，发现恩替卡韦分散片能迅速降低HBV DNA水平，使ALT复常，临床疗效好。本文也评估了恩替卡韦在高效抗病毒的同时对HBeAg阴性CHB患者免疫功能的影响。

研究显示宿主的细胞免疫功能，特别是HBV特异性CD4+T 细胞反应和CD8+T细胞反应对HBV的清除和疾病的转归有重要意义。CD4+T 细胞数量下降是导致机体无法有效清除病毒，使感染变得迁徙的重要因素[7]。CD4+/CD8+比值常作为评估免疫状态的指标，比值上升提示免疫应答的正调节占优势，比值下降，提示免疫功能低下。检测外周血T细胞亚群能反映机体细胞免疫状态，当T淋巴细胞亚群的数量和功能发生异常时，可导致免疫功能紊乱而发生持续的HBV感染。研究显示，CHB患者体内存在细胞免疫功能的紊乱，T淋巴细胞亚群失衡导致机体不能有效清除入侵的HBV，导致疾病的发生和发展。有研究表明[8]，CHB 患者CD4+细胞减少，CD8+细胞升高，使CD4+/CD8+比值下降。CHB患者在HBV DNA复制时，T细胞亚群存在明显的紊乱。

本研究提示，HBeAg阴性CHB患者使用恩替卡韦分散片治疗24周后， HBV DNA水平明显下降，CD3+、CD4+、CD8+水平升高，CD4+/CD8+比值也升高，表明恩替卡韦分散片可能通过抑制HBV复制、降低CHB患者体内病毒载量，间接引起机体细胞免疫功能的改善，但确切免疫调节机制有待深入研究。

表1 62例CHB患者治疗24周前后肝功能和HBV DNA水平(±s)的变化

表2 62例患者治疗24周前后T淋巴细胞亚群(±s)的变化