E-cadherin在前列腺癌中的表达及其临床病理意义

前列腺癌（PCa）是最常见的泌尿系统恶性肿瘤之一，其病因不明，发病隐匿，早期症状不明显，部分患者诊断时肿瘤已发生转移，丧失手术根治切除的机会。因此迫切需要发现有效的肿瘤标志物用于诊断前列腺癌。现有研究表明，当肿瘤细胞之间的相互黏附作用减弱，癌细胞便可能从原发病灶脱落，伴随血液或淋巴系统转移到人体其他部位，是恶性肿瘤侵袭、转移的关键。能抑制肿瘤细胞从原发灶脱落，最主要的指标是E-钙粘附素（E-cadherin）[1]。E-cadherin蛋白在前列腺癌中的表达研究不多，我们使用了免疫组织化学的方法检测、测定E-cadherin基因在84例前列腺癌患者中的表达，其目的是开发一种潜在的能诊断和监测前列腺癌预后的标志物，做到早诊断、早治疗，提高患者的生存率。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取我科在2008年2月—2015年2月收集的84例接受了前列腺穿刺或手术治疗的前列腺腺癌患者的石蜡标本，并取20例良性前列腺增生组织作为对照组。84例前列腺癌患者中，39例患者年龄≤65岁，45例患者年龄＞65岁。标本分为T1a-T2b期（40例）和T2c-T4期（44例）。55例血清PSA≤20 ng/mL，29例患者＞20 ng/mL。31例低Gleason评分4～7分，53例高Gleason评分8～10分。所有患者均未接受术前化疗或放疗。

1.2 方法

使用免疫组化SP法，实验操作参考文献[2]，将标本切成4 μm连续切片，60℃ 烘烤60 min，然后脱蜡。将切片浸入压力锅中，在EDTA抗原回收缓冲液中放置10 min，然后冷却20 min，用3%双氧水处理，然后与正常血清孵育，阻断非特异性结合，切片用一抗（兔抗人E-cadherin抗体 1：100，北京博奥森生物技术有限公司），在4℃孵育，PBS缓冲液漂洗，添加二抗（北京博奥森生物技术有限公司），室温孵育1 h，再添加链霉亲和素-辣根过氧化物酶，室温下孵育20 min。PBS缓冲液漂洗，然后加DAB显色液显色 。染色结果判断：根据细胞染色强度分为0（阴性）、1（弱）、2（中）和3（强）；根据阳性细胞染色率分为0（0%）、1（1%～25%）、2（26%～50%）、3（51%～75%）和4（76%～100%）。两者之和为总分，其分数＞2时，定义为阳性（+，高表达）；当分数≤2时，为阴性（-，低表达）。

1.3 统计学方法

使用SAS 9.2软件包对实验数据进行统计分析，组间数据比较采用χ2检验，当P＜0.05时可认为差异有统计学意义。

2 结果

E-cadherin以细胞膜被染成棕黄色、棕褐色为阳性细胞。E-cadherin阳性表达在前列腺癌组织中占39.3%（33/84），低于前列腺增生组织的90.0%（18/20）（P＜0.001）。其在不同临床参数的前列腺癌组织中的表达比较见表1。

3 讨论

E-cadherin是一种钙依赖性细胞粘附分子，介导细胞连接，维持正常的上皮细胞形态和组织结构的完整性，能抑制肿瘤细胞从原发灶脱落，抑制肿瘤转移，是上皮细胞-间充质转化（EMT）的分子标志物[3-6]。上皮细胞-间充质转化是指上皮细胞通过特定程序转化成为间质细胞的过程，其参与了恶性肿瘤的发生、发展的多个环节，和肿瘤侵袭、转移密切相关[5-6]。E-cadherin在多种肿瘤如肾癌、食管鳞癌、结直肠癌、肝癌中下调或缺失，与肿瘤的发生、发展密切相关[3，6-10]。

在本研究中，结果表明E-cadherin蛋白在良性前列腺增生组织中表达明显高于前列腺癌组织，另外，E-cadherin蛋白表达的检测在PSA高水平组（＞20 ng/mL）和低水平组（≤20 ng/mL）进行比较，有显著性差异，这表明E-cadherin基因的缺失，可能参与前列腺癌的发生。本研究中E-cadherin蛋白阳性率在高Gleason评分组低于低Gleason评分组，此外，E-cadherin阳性率在低TNM分期组（t1a-t2b）较高分期组（T2c-T4）更高，这些提示E-cadherin缺失在肿瘤发展中起重要作用。研究发现E-cadherin低表达或缺失与患者预后密切相关。秦乐等[7]研究发现结直肠癌中E-cadherin蛋白低表达的患者相对于高表达者，预后差。赵海涛等[11]在胰腺癌中也有类似发现。随着分子生物学研究的发展，易敏等[12]发现下调E-cadherin基因后，甲状腺癌细胞的转移、侵袭能力明显增强，提示其有可能成为肿瘤基因治疗的新靶点。

总之，结合文献及本次研究结果，笔者认为E-cadherin蛋白的下调或缺失有助于前列腺癌的诊断，并可用于患者预后监测。E-cadherin的缺失，促进前列腺癌发生、发展，对其具体作用机制进行更深入研究，E-cadherin可能成为前列腺癌基因治疗的新靶点。

表1 E-cadherin在前列腺癌组织中的表达[例（%）]