多囊卵巢综合征患者血浆骨膜蛋白水平变化及意义*

陈萍， 吕媛媛， 陈定宇

广州市第一人民医院内分泌科(广东广州 510180)

多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄期女性常见的一种多系统内分泌疾病，主要表现稀发排卵或无排卵、多囊卵巢及高雄激素血症，多伴有肥胖、胰岛素抵抗(IR)、糖脂代谢紊乱，其中PCOS患者肥胖的发生率约50%～80%[1-3]。Lu等[4]研究发现长期的营养过剩或者肥胖状态可以通过碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)使肝脏骨膜蛋白(periostin)的表达上调，periostin通过参与JNK通路下调过氧化物酶增殖体激活受体α(PPARα)的表达抑制脂肪酸氧化从而调节三酰甘油(TG)在肝脏中异常沉积，最终导致高三酰甘油血症和非酒精性脂肪肝。然而TG作为一种能源物质主要存储于脂肪组织中，TG在肝脏的异常沉积多与代谢综合征密切相关[5]。新近的基础研究[6-7]显示periostin的丧失会减弱脂肪组织的代谢并改善其炎症状态,periostin是否参与人体代谢紊乱呢？本研究通过测定PCOS与对照组人群中血浆periostin水平变化，并分析其与胰岛素抵抗、肥胖、糖脂代谢紊乱的关系，以期进一步探讨periostin与代谢性疾病的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 筛选2017年7月至2018年4月广州市第一人民医院内分泌科门诊收集的PCOS患者68例(PCOS组)，所有患者均符合美国生殖医学学会鹿特丹工作组修正的关于PCOS的诊断标准：(1)稀发排卵或无排卵；(2)高雄激素血症的临床表现和(或)高雄激素血症；(3)卵巢多囊样改变：一侧或双侧卵巢中直径2～9 mm的卵泡≥12个，和(或)卵巢体积≥12 mL；(4)上述3条中符合2条，并排除其他致雄激素升高的病因。另选取同期在我院健康体检的72名女性作为对照组，对照组纳入标准：(1)雄激素水平无异常；(2)月经周期正常；(3)妇科B超未示卵巢多囊样改变。所以研究对象均不合并高血压、脂肪肝等其他内分泌疾病，无近期急性感染史，近期无妊娠史，近期未服用任何影响血脂、血糖、血压的药物。研究对象均签署知情同意书。

超重和肥胖的诊断标准：根据2000年国际肥胖组对亚太地区新定义的超重和肥胖标准：体质指数(BMI)≥23 kg/m2为超重，BMI≥25 kg/m2为肥胖，将PCOS组分为超重/肥胖亚组 (OP,n=43)，正常体重亚组 (LP,n=25)；将对照组分为超重或肥胖亚组(OB,n=12)，正常体重亚组(LC,n=60)。

1.2 方法

1.2.1 人体一般参数测定 由专人负责对受试者采用统一测量工具进行身高(H)、体重(W)、腰围(WC)、臀围(HC)测定，并计算BMI(BMI=W/H2)和腰臀比(WHR=WC/HC)。在安静状态下休息10～15 min后测量血压。

1.2.2 生化指标测定 所有受试者于清晨空腹状态下测定血糖、胰岛素、血脂、生化等指标，并测定口服75 g葡萄糖2 h后血糖(2hPG)，月经规律者安排月经第2～4天清晨8：00取血，月经稀发或闭经者妇科B超示无优势卵泡时清晨空腹取血。通过稳态模型(HOMA)评估胰岛素抵抗(HOMA-IR=FBG×Fins/22.5)，其余血样离心存于-80℃冰箱同期测定periostin。periostin采用ELISA方法测定(试剂盒来自武汉优尔生科技有限公司，批间CV<12%，批内CV<10%)，糖化血红蛋白(HbA1C)采用高压液相法，胰岛素采用化学发光法，血糖采用葡萄糖氧化酶法，血脂采用生化自动分析仪测定。

2 结果

2.1 一般临床及生化指标的比较 PCOS组和对照组间年龄、血压未见明显差异，PCOS组BMI、WHR、空腹血糖(FBG)、2hFPG、空腹胰岛素(Fins)、HOMA-IR、血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、黄体生成素(LH)/卵泡刺激素(FSH)明显高于对照组(P<0.01)。在4个亚组中OP亚组的BMI、WHR、FBG、2hFPG、Fins、HOMA-IR、TG、TC、LDL-C、LH/FSH水平最高，HDL-C水平最低(P<0.01，P<0.05)。见表1～2。

2.2 血浆periostin水平的比较 PCOS组血浆periostin水平明显高于对照组(P<0.01)。按照BMI分组表明OP亚组血浆periostin水平最高，LC亚组血浆periostin水平最低(P<0.01)。见表1～2。

2.3 血浆periostin与糖脂代谢、肥胖、胰岛素抵抗的关系 相关性分析提示血浆periostin与BMI、WHR、FBG、2hFPG、Fins、HOMA-IR、TC、LDL-C、LH/FSH呈正相关(r=0.591、0.512、0.167、0.492、0.535、0.570、0.220、0.205、0.201;P<0.01，P<0.05)，与年龄、SBP、DBP、TG、HDL-C无明显相关性(P>0.05)，校正年龄、BMI、WHR后，血浆periostin与2hFPG、Fins、HOMA-IR、TC、LDL-C呈正相关(r=0.243、0.225、0.331、0.233、0.181;P<0.01,P<0.05)。

以血浆periostin为因变量，以年龄、BMI、WHR、2hFPG、 TG、TC、LDL-C、 HDL-C、HOMA-IR、LH/FSH为自变量，进行多元线性逐步回归分析,结果表明BMI、HOMA-IR是血浆periostin的独立影响因素(P<0.01，P<0.05)。见表3。

项目PCOS组(n=68)对照组(n=72)年龄(岁)26±4.9 25±2.5收缩压(mmHg)114±11 110±8 舒张压(mmHg)76±7.0 74±8.0BMI(kg/m2)24.8±3.9△20.6±2.8WHR0.9±0.1△0.8±0.1FBG(mmol/L)4.9±0.6△4.4±0.42hFPG(mmol/L)7.1±1.7△5.5±1.1Fins(mU/L)19.8±12.9△7.8±3.2HOMA-IR4.2±2.9△1.5±0.6TG(mmol/L)1.4±0.71.2±1.0TC(mmol/L)4.5±0.9△3.8±0.9LDL-C(mmol/L)2.6±0.8△2.2±0.8HDL-C(mmol/L)1.5±1.81.2±0.3LH/FSH1.3±0.8△0.7±0.4periostin(ng/mL)32.5±5.5△25.9±3.6

△与对照组比较P<0.01

3 讨论

periostin又被称为骨特异性因子，由POSTN基因编码，是一种进化相对保守的细胞外基质蛋白，其相对分子质量为90 kD，包含有811个氨基酸残基[8]。periostin广泛表达于人体的多种组织，尤其高表达于富含胶原的组织，例如：心脏瓣膜、肌腱、骨膜、角膜，既往研究报道骨膜蛋白主要参与肿瘤、骨髓纤维化、心肌梗死、血管重塑、创伤修复等疾病的病理过程[9-11]。近年有研究[12-15]发现periostin可致糖脂代谢紊乱，与肥胖、非酒精性脂肪肝相关并加重胰岛素抵抗，所以本研究通过分析不同体重PCOS人群与对照组的periostin水平，进一步探讨periostin在代谢性疾病中的作用。

本研究发现，血浆periostin水平在新诊断的PCOS组较对照组明显升高，Person相关性分析提示血浆periostin与FBG、2hFPG、Fins、HOMA-IR、TC、LDL-C、LH/FSH呈正相关，多元线性逐步回归分析表明HOMA-IR是血浆periostin的独立影响因素，提示periostin与糖脂代谢、胰岛素抵抗相关。Lu等[4]研究证实periostin与胰岛素抵抗密切相关，该研究发现敲除编码periostin基因db/db试验小鼠组较野生小鼠组的FBG及胰岛素敏感性有明显改善；同时该研究证实骨膜蛋白可下调PPARα及其调控相关靶基因的表达，如肉毒碱棕榈酰基转移酶1A (Cptla 1A)的编码基因。Cptla基因参与脂肪酸氧化过程，研究发现敲除Cptla基因后，小鼠的胰岛素敏感性下降，可能Cptla基因缺失导致血脂升高，然而脂代谢紊乱可影响胰岛素受体表达及葡萄糖转运体活性从而加重胰岛素抵抗。

项目OP(n=43)LP(n=25)OB(n=12)LC(n=60)年龄(岁)25±5 26±4 27±4 25±2BMI(kg/m2)27.3±2.5▲▲△△#20.8±1.8△△#26.0±2.1#19.6±1.4WHR0.87±0.1▲#0.83±0.1#0.85±0.1#0.78±0.1FBG(mmol/L)4.9±0.6△#4.8±0.6#4.6±0.44.4±0.4Fins(mU/L)19.8±12.9▲▲△△#13.9±12.3#10.8±5.37.2±2.4 HOMA-IR5.1±2.9▲▲△△#2.9±2.5#2.1±1.01.4±0.5TG(mmol/L)1.4±1.01.2±0.51.2±0.81.1±0.9TC(mmol/L)4.5±0.9△△#4.0±0.93.9±0.63.8±0.9LDL-C(mmol/L)2.7±0.8△#2.6±0.72.1±0.52.0±0.9HDL-C(mmol/L)1.6±2.41.3±0.41.2±0.31.3±0.5LH/FSH1.5±0.9△△#1.3±0.80.6±0.50.5±0.3periostin(ng/mL)34.9±5.2▲▲△△#28.8±3.530.7±3.7#25.1±2.8

#与LC组比较P<0. 01;与 OB 组比较△P<0.05，△△P<0. 01;与LP组比较▲P<0.05，▲▲P<0.01

表3 血浆periostin水平影响因素的多元逐步回归分析

本研究按照BMI分组后发现，PCOS组和对照组中超重或肥胖亚组的血浆periostin水平均高于体重正常亚组，相关性分析提示periostin水平与BMI、WHR呈正相关，多元线性逐步回归分析示BMI、HOMA-IR是血浆periostin水平的独立影响因素，故推测肥胖和胰岛素抵抗对periostin水平的表达上调可能有叠加作用。Lu等[4]研究同时发现高脂饮食喂养的肥胖小鼠血清periostin水平较对照组明显升高。Ali Khan等[16]对肥胖的脂肪肝人群进行连续16周奥利司他治疗，治疗后患者TG、体重、胰岛素敏感性较治疗前下降的同时伴随血浆periostin水平明显下降。本研究进一步校正年龄、BMI、WHR后发现，血浆periostin与2hFPG、Fins、HOMA-IR、TC、LDL-C仍呈正相关，提示血浆periostin水平与IR、脂代谢紊乱关系可能并不依赖于肥胖本身。

综上所述，periostin水平在PCOS、超重或肥胖人群中有所升高，且与胰岛素抵抗、糖脂代谢异常相关，结合既往动物及人群研究，periostin有可能成为改善肥胖、PCOS的新靶点，但还需进一步大量研究证实。