胃腺癌组织PELP1表达变化及其与患者临床病理特征的关系

张祎，陈畅

(宜昌市第一人民医院·三峡大学人民医院，湖北宜昌443000)

我国是胃癌高发国家，每年新发病例占全世界40%以上[1]。根据组织病理学分类，可将胃癌分为腺癌、鳞癌、腺鳞癌等，其中腺癌约占95%[2]。目前，根治性手术仍是早期胃腺癌的主要治疗手段。由于胃腺癌早期症状隐匿，大部分胃腺癌患者就诊时已属中晚期，错过了最佳手术时机，即使可手术切除，短期也易出现复发。近年随着分子生物医学迅速发展，分子靶向治疗成为中晚期恶性肿瘤的重要治疗手段。但目前缺少针对胃腺癌的分子治疗靶点。因此，探寻与胃腺癌发生、发展相关的分子机制，对其治疗和预后具有重要意义。脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(PELP1)基因定位于人染色体17p13.2，编码蛋白由1 130个氨基酸残基组成，相对分子质量为160 kD，因其氨基酸链中40%以上序列为脯氨酸、谷氨酸或亮氨酸而得名[3,4]。PELP1又被称为雌激素受体非基因组活性辅助调节因子，是一种新发现的甾体受体(SR)共调节分子，被认为是雌激素受体α(ERα)的共调节分子。有研究发现，在ERα阴性的乳腺癌组织中PELP1高表达，其高表达可促进肿瘤的侵袭和转移[3～5]。近年相继在卵巢癌、结直肠癌、乳腺癌等组织中发现PELP1异常表达[6～10]。但鲜见胃腺癌组织PELP1表达的报道。本研究观察了胃腺癌组织PELP1表达变化，并分析其表达变化与患者临床病理特征的关系。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2015年6月～2018年6月宜昌市第一人民医院收治的初诊胃腺癌患者80例。所有患者经术后组织病理检查明确诊断，且术前未行任何抗肿瘤治疗。其中，男48例、女32例，年龄32～75岁(≤55岁41例、>55岁39例)；血清CEA水平0.14～413.52 μg/L(<5 μg/L 66例，≥5 μg/L 14例)；肿瘤最大径0.8～7.5 cm(<5 cm 55例、≥5 cm 5例)；组织分化程度：高分化11例，中分化43例，低分化26例；有淋巴结转移者58例，无淋巴结转移者22例。本研究经宜昌市第一人民医院医学伦理委员会批准，患者或其家属知情同意。

1.2 PELP1表达检测 采用免疫组化法。取手术切除的胃腺癌组织及其配对的癌旁正常组织(距肿瘤组织边缘>5 cm)，甲醛固定，常规脱水、透明，石蜡包埋，5 μm厚连续切片。切片经脱蜡水化、抗原修复、封闭内源性过氧化物酶后，分别加入PELP1多克隆抗体、通用型二抗孵育。DAB显色，苏木素复染，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固，显微镜下观察。以PBS代替一抗作为阴性对照，用已知阳性胃腺癌组织切片作为阳性对照。采用双盲法由两位病理科医师独立阅片。PELP1阳性染色定位于细胞核，呈棕黄色颗粒状。每张切片随机选取3个400倍视野，计数每视野阳性细胞数，计算阳性细胞比例，同时评价染色强度。阳性细胞比例评分：无阳性细胞为0分，阳性细胞比例≤33%为1分；阳性细胞比例>33%～66%为2分，阳性细胞比例>66%为3分。染色强度评分：无色为0分，淡黄色为1分，桔黄色为2分，棕黄色为3分。根据阳性细胞比例评分和染色强度评分综合判定PELP1表达。二者乘积≤3为低表达、>3为高表达。

1.3 统计学方法 采用GraphPad Prism8.0统计软件。计数资料比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 胃腺癌组织与癌旁正常组织PELP1表达比较 胃腺癌组织PELP1高表达37例(46.25%)、低表达43例(53.75%)，癌旁正常组织PELP1高表达6例(7.50%)、低表达74例(92.50%)。胃腺癌组织PELP1高表达率明显高于癌旁正常组织(χ2=35.80，P<0.01)。

2.2 胃腺癌组织PELP1表达与患者临床病理特征的关系 见表1。胃腺癌组织PELP1表达与患者血清CEA水平、肿瘤最大径及淋巴结转移有关(P均<0.05)，与患者性别、年龄、组织分化程度无关(P均>0.05)。

表1 胃腺癌组织PELP1表达与患者临床病理特征的关系(例)

3 讨论

胃腺癌是临床常见的消化系统恶性肿瘤之一，其病因和发病机制尚不完全清楚。胃腺癌早期行根治性手术，患者预后较好，5年生存率90%以上。但由于胃腺癌早期症状不典型，易误诊或漏诊，多数患者就诊时已属中晚期，错过了最佳手术时机，即使勉强可以手术切除，术后也易出现复发和转移，预后较差。近年随着分子生物医学迅速发展，分子靶向治疗成为中晚期恶性肿瘤的重要治疗手段。但目前缺少针对胃腺癌的分子治疗靶点，可选用的靶向药物有限[2]。因此，探讨胃腺癌发病的分子机制，寻找新的治疗靶点十分迫切。

PELP1最初被发现在ER阳性的乳腺上皮细胞中丰度较高，之后被证实是SR下游信号通路转导过程中的一个调节分子[11]。根据细胞类型和配体表达量差异，PELP1既能促进SR下游信号通路转导，又能抑制SR下游信号通路转导。如在非小细胞肺癌A549细胞中内源性糖皮质激素受体表达量较高，PELP1可抑制糖皮质激素受体介导的信号通路转导；而在内源性糖皮质激素受体表达量较低的HEK293细胞中，PELP1可增强配体激活糖皮质激素受体介导的信号转导[12]。PELP1可与多种SR的转录共激活分子结合，如CREB结合蛋白[13]；还可作为“中间人”，让不能直接与SR结合的共调节因子与SR形成复合体，如PELP1可促进雄激素受体和FHL家族蛋白2结合，形成转录复合体，调控下游基因表达[14]。PELP1主要表达于细胞核，亦可在细胞质中表达。PELP1在细胞质中表达时，可促进ER与Src激酶结合，而PELP1突变则会破坏ER与Src结合，导致MAPK信号通路紊乱[15]。PELP1在细胞质中过表达会造成MAPK和AKT信号通路非激素依赖性激活[14]。此外，PELP1还可募集具有组蛋白修饰作用的蛋白，使染色质的性质和结构发生改变。如PELP1与组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1(KDM1)或共激活因子相关精氨酸甲基转移酶1(CARM1)结合，介导KDM1和CARM1对基因启动子区域组蛋白H3的表观遗传学修饰[16，17]。PELP1在信号转导以及表观遗传修饰中的关键作用，赋予它可参与调控细胞增殖、凋亡、迁移等，使其成为一个关键的肿瘤相关分子。如：PELP1可通过诱导芳香酶合成，促进雌激素生成，从而促进ER依赖性的乳腺癌细胞增殖[18]；PELP1可介导视网膜母细胞瘤蛋白的Ser807和Ser811磷酸化，使后者激活，从而促进肿瘤细胞增殖[19]；PELP1可调控p53磷酸化，其缺失会造成p53信号通路失常，导致细胞凋亡功能失常[20]；PELP1还可调控miRNA表达，其中不乏与肿瘤细胞侵袭和迁移相关的miRNA，如miR-200、miR-141[21]。另外，PELP1还是一些肿瘤相关miRNA的下游靶基因，如miR-497。有研究报道，二甲双胍可通过上调miR-497，降低PELP1表达，从而发挥抗肿瘤作用[22]。但目前鲜见胃腺癌组织PELP1表达的报道。

本研究结果发现，胃腺癌组织PELP1高表达率明显高于癌旁正常组织；胃腺癌组织PELP1表达与患者血清CEA水平、肿瘤最大径及淋巴结转移有关，与患者性别、年龄、组织分化程度无关。提示PELP1高表达可能促进胃腺癌进展。

综上所述，胃腺癌组织PELP1高表达，其表达变化与肿瘤进展有关。PELP1有可能成为胃腺癌的分子治疗靶点。