联合抗SSA、SSB、ANA以及抗环胍氨酸肽抗体对诊断原发性干燥综合征的临床意义

温丽娴 高 敏 林 城 张世豪▲

1.广东省东莞市石排医院检验科，广东东莞 523330；2.广东省东莞市人民医院病理科，广东东莞 523059

原发性干燥综合征主要对机体的外分泌腺造成影响，口干、眼涩是其典型的临床表现，可累及全身多脏器及系统并引起自身免疫性病变[1-2]。目前对此疾病的发病原因暂不明确，可能是遗传、感染、内分泌等多种因素共同作用的结果。有报道称在干燥综合征患者血清中可检测到抗SSA和SSB抗体，推测抗SSA和SSB抗体与干燥综合征的发生及进展有关，可作为临床诊断干燥综合征的指导指标之一。本研究通过分析2015年1月～ 2017年12月我院收治的疑似干燥综合征患者血清SSA、SSB、ANA以及抗环胍氨酸肽抗体的差异，旨在为临床提高干燥综合征检测阳性率提供指标，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取东莞市人民医院2015年1月～2017年12月收治疑似干燥综合征患者239例作为研究对象，纳入标准：入组者均符合2012年美国风湿病学会原发性干燥综合征分类标准[3]，且入院时有口眼干涩、眼内有异物感、口腔溃疡频繁、腮腺持续肿大等症状，并经唇腺病理活检确诊（诊断标准：唇腺活检存在灶性淋巴性涎腺炎，灶性指数≥1灶/4mm2，且至少有50个以上淋巴细胞聚集于间质者为1个灶）。排除标准：颈部、头部及脸部有放疗史；淋巴瘤；结节病、艾滋病及丙型肝炎病毒感染；近期应用阿托品、莨菪碱、颠茄等抗乙酰胆碱药物治疗者。根据所有研究对象确诊结果分成患病组105例和未患病组134例。患病组中男16例，女89例，年龄26～81岁，平均（53.7±11.7）岁；病程1～6年，平均（3.47±0.76）年。未患病组中男29例，女105例；年龄22～85岁，平均（51.9±12.6）岁；病程1～6年，平均（3.52±0.79）年。两组患者性别、年龄及病程等一般资料相比差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

采集所有受检者清晨空腹静脉血5mL，以3500r/min转速离心10min，分离血清并保存于-20℃冰箱待用。抗SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La采用免疫印迹法测定抗体的血清水平，试剂由深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司提供；ANA抗体和抗环瓜氨酸肽抗体采用化学发光法测定抗体水平，其中ANA抗体试剂由深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司提供，使用亚辉龙iFlash3000化学发光仪测定；抗环瓜氨酸肽抗体则由美国雅培公司提供，并使用雅培i2000化学发光仪测定。

1.3 观察指标

两组患者抗体SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La、ANA以及抗环瓜氨酸肽抗体的阳性率，以及联合检测上述抗体在原发性干燥综合征的阳性率、敏感度及特异度。

1.4 统计学方法

采用SPSS20.0统计软件进行数据处理分析，定性资料以百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各抗体敏感度和特异度分析

抗 体 SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La、ANA以及抗环瓜氨酸肽抗体在患病组患者中的阳性率分别为46.67%、44.76%、16.19%、85.71%及11.43%，未患病组患者的阳性率分别为23.13%、16.42%、5.22%、91.79%及8.96%，见表1。同时患病组各抗体检测敏感度中ANA较高，而抗环瓜氨酸肽抗体较低。患病组SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La检出阳性率较未患病组高，差异有统计学意义（P＜0.05）；而ANA以及抗环瓜氨酸肽抗体与未患病组检出阳性率相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.2 各抗体联合检测在原发性干燥综合征患者中的敏感度和特异度分析

患病组联合检测阳性病例为94例，阳性率89.52%，敏感度89.52%，特异度90.30%；未患病组联合检测阳性病例为13例，阳性率9.70%，两组联合检测阳性率相比，差异有统计学意义（χ2=151.699，P=0.000）。

表1 各抗自身抗体敏感度和特异度分析

3 讨论

抗体SSA及SSB抗体是目前临床上诊断干燥综合征最为常用的自身抗体[4]，但此两种抗体均存在局限性，其中抗SSB抗体对干燥综合征的敏感度相对较低，而抗SSA抗体在系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病中的阳性率亦较高，易造成干燥综合征的漏诊和误诊[5-6]。唇腺活检对干燥综合征诊断的特异性较高，但其为有创检查，费用较高且较多基层医院没有开展病理检查，限制其在临床中的应用。因此，寻找一种敏感度、特异度高且实惠的检查方式是目前临床诊断干燥综合征急需解决的问题。抗环瓜氨酸肽抗体为风湿性关节炎特异性抗体，对风湿性关节炎的诊断阳性率较高，且广泛应用于其早期诊断[7]。原发性干燥综合征的致病因素和发病机制目前尚未清楚，但目前普遍认为可能与病毒感染[8]、性激素异常[9]及遗传[10]等因素共同作用下，引起机体自身免疫紊乱、细胞及及体液免疫异常反应，促使机体合成及分泌多种炎症介质、细胞因子，从而损伤组织，浆细胞及淋巴细胞进行性浸润靶器官，可损伤皮肤、泪腺、肝肾及肺等组织及脏器[11-13]。目前，临床上对原发性干燥综合征的诊断主要有血清抗SSA、SSB抗体及唇腺活检。SSA、SSB自1975年从淋巴细胞提取物被检测出，此两种蛋白是组成核糖体蛋白的部分片段，亦在原发性干燥综合征血检中发现，但抗SSA抗体在众多自身免疫性疾病的阳性率较高，原发性干燥综合征仅为自身免疫性疾病之一，因此对原发性干燥综合征缺乏特异性；抗SSB抗体对干燥综合征的敏感性则较低，故此抗SSA、SSB抗体局限自身因素，限制其在诊断原发性干燥综合征的特异度及敏感度；而唇腺活检为有创检查，费用相对昂贵且较多基层医院没有开展病理检查，也限制其在临床上的广泛应用。因此目前缺乏特异性诊断原发性干燥综合征的指标，为此我们努力探索联合使用其它自身免疫相关抗体来提高原发性干燥综合征敏感度和特异度的诊断方法。

经研究对比发现部分自身免疫相关抗体血清检测水平对干燥综合征也具有提示意义，例如：ANA抗体和抗环瓜氨酸肽抗体检测。ANA靶抗原已扩展至细胞浆、细胞骨架及细胞核等整个细胞。目前ANA是指细胞内全部抗原成分的总称[14]。ANA可存在于血液中，亦有部分分布于尿液、胸腔积液及关节滑膜液中，ANA可与动物所有细胞核相互作用，故而可在多种自身免疫性疾病检测到，缺乏特异性。抗环瓜氨酸肽抗体为环状聚丝蛋白的多肽片段，为诊断风湿性关节炎的特异性抗体，但在其他自身免疫性疾病亦发现抗环瓜氨酸肽抗体存在，故而具有一定临床意义。Taraborelli等[15]研究结果认为抗环瓜氨酸肽抗体可作为预测系统性红斑狼疮患者关节侵蚀的指标，可作为预后的判断指标之一。本研究结果显示，抗体SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La、ANA以及抗环瓜氨酸肽抗体在患病组患者中的阳性率分别为46.67%、44.76%、16.19%、85.71%及11.43%，未患病组患者的阳性率分别为 23.13%、16.42%、5.22%、91.79% 及 8.96%。联合检测抗体SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La、ANA以及抗环瓜氨酸肽抗体患病组患者阳性率为89.52%，敏感度为89.52%，特异度90.30%。可见上述血清因子联合检测对诊断原发性干燥综合征的阳性率优于单独，可推断联合检测上述指标能有效的提高原发性干燥综合征的诊断准确率，避免误诊、漏诊或延误治疗时机。

综上所述，抗体 SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La、ANA以及抗环瓜氨酸肽抗体联合检测，可提高对原发性干燥综合征的诊断敏感度。随着对干燥综合征不断研究，从最开始1965年提出的Bloch标准到最新的美国风湿病协会（ACR）与欧洲抗风湿病联盟（EULAR）标准制定[16]，干燥综合征的诊断及分类标准不断优化，但局限于干燥综合征的发病机制仍未研究清楚，致使目前干燥综合征仍然缺乏客观的诊断金标准，此时联合抗体检测可以发挥其在原发性干燥综合征诊断特异性较高的优势，具有较好的临床应用价值。