乳腺癌患者血清性激素、IGF-1、VEGF和组织LOX水平与淋巴结转移的相关性分析

邢海霞 赵明燕 郭勇

乳腺癌为我国常见恶性肿瘤，随着大众饮食结构及生活习惯的改变，乳腺癌呈现发病年轻化趋势[1]。淋巴系统转移为乳腺癌转移的主要途径之一，转移状态是影响患者预后的重要因素[2]。故探析乳腺癌淋巴结转移发生的影响因素，有其必要性。近期有学者研究发现，乳腺癌患者可发生不同程度性激素代谢紊乱，性激素水平与患者淋巴结转移等临床特征具有一定相关性[3]。赖氨酰化酶（lysyl oxidase，LOX）是细胞外基质的主要成分，可氧化胶原蛋白及弹性蛋白上的特殊氨基酸残基，对细胞外基质发育、成熟及维持其稳定性具有重要作用。LOX与恶性肿瘤发生发展、侵袭转移关系密切[4]。另外，近年来，胰岛素样生长因子1（insulin-like growth factor 1，IGF-1）、血管内皮生 长 因 子（vascular endothelial growth factor，VEGF）与恶性肿瘤的关系受到学术界广泛关注，IGF-1可刺激乳腺癌细胞分裂，而增加其恶性程度及转移潜力；VEGF则为刺激血管和淋巴微管形成的信号蛋白，可促进恶性肿瘤细胞增殖[5]。基于此，本研究回顾性分析驻马店市中心医院86例行手术治疗的乳腺癌患者临床资料，以评估组织LOX表达情况、血清性激素及IGF-1、VEGF水平与乳腺癌淋巴结转移的相关性，为临床尽早诊治乳腺癌提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2015年2月至2017年12月我院86例行手术治疗的乳腺癌患者临床资料，其中伴淋巴结转移者44例（转移组），无淋巴结转移者42例（无转移组），并将同期入院的40例乳腺良性肿瘤患者纳入良性组。纳入标准：经手术病理学检查确诊为乳腺癌或乳腺良性肿瘤者；年龄为18～65岁者；临床资料完整者。排除标准：伴严重感染、糖尿病等手术禁忌证者；既往放化疗或激素治疗者；合并其他恶性肿瘤者；妊娠或哺乳期妇女。3组患者均为女性。转移组年龄40～63岁，平均（51.15±9.65）岁；体质量指数（body mass index，BMI）18～24 kg/m2，平均（21.68±2.05）kg/m2。无转移组年龄 41～63岁，平均（50.84±9.17）岁；BMI 19～24 kg/m2，平均（21.92±1.94）kg/m2。良性组年龄 40～62岁，平均（50.22±9.36）岁；BMI 18～24 kg/m2，平均（22.04±2.11）kg/m2。3 组年龄、BMI等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 研究方法

转移组及无转移组乳腺癌患者均行改良乳腺癌根治术，良性组患者均予以弧形切口切除手术治疗。于术前，使用化学发光免疫法检测3组血清雌二醇（estradiol，E2）、睾酮（testosterone，T）、孕酮（progesterone，P）水平；使用酶联免疫分析法检测3组血清IGF-1、VEGF水平；通过灌胶、电泳、转膜、封闭后加抗体检测LOX在乳腺癌患者乳腺癌组织及良性组良性病变组织中表达情况，并利用发光法以目的条带面积灰度值做半定量检测LOX相对表达量。

1.3 试剂及仪器

化学发光免疫法试剂购自德国罗氏公司；酶联免疫分析法试剂购自美国R&D公司；LOX抗体试剂购自北京博奥森生物技术有限公司；化学发光仪购自德国罗氏公司；酶标仪购自澳大利亚博赛生物公司。

1.4 观察指标

3组患者术前血清E2、T、P、IGF-1、VEGF 水平及组织（乳腺癌患者取乳腺癌组织、良性组取良性病变组织）LOX相对表达量和术后4周时血清IGF-1、VEGF水平差异，同时分析乳腺癌患者术前血清E2、T、P、IGF-1、VEGF水平、组织LOX相对表达量与淋巴结转移的相关性。

1.5 统计学方法

数据处理用SPSS 19.0软件，计量资料以表示，多组间比较使用多因素方差分析，2组间采用独立样本t检验；计数资料以n（%）表示，采用χ2检验；相关性分析使用Spearman相关性分析法；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组术前血清血清E2、T、P、IGF-1、VEGF水平及组织LOX相对表达量比较

3组术前血清T水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；而血清E2、P、IGF-1、VEGF水平及组织LOX相对表达量比较，均为转移组高于无转移组及良性组（P＜0.05），且无转移组高于良性组（P＜0.05），见表1。

表1 3组术前血清E2、T、P、IGF-1、VEGF水平及组织LOX相对表达量比较（±s）Table 1 Comparison of preoperative serum levels of E2，T，P，IGF-1，VEGF and relative expression level of tissue LOX in the 3 groups（± s）

表1 3组术前血清E2、T、P、IGF-1、VEGF水平及组织LOX相对表达量比较（±s）Table 1 Comparison of preoperative serum levels of E2，T，P，IGF-1，VEGF and relative expression level of tissue LOX in the 3 groups（± s）

与转移组比较，aP＜0.001；与无转移组比较，bP＜0.001。

组别转移组无转移组良性组n 44 42 40 F P E2（pg/mL）210.41±15.49 175.22±12.36a 93.45±10.17ab 17.452 0.000 T（ng/dL）50.78±9.45 52.47±9.12 52.98±9.09 1.743 0.214 P（ng/mL）0.39±0.05 0.32±0.06a 0.28±0.04ab 9.476 0.000 IGF-1（ng/mL）232.54±19.47 153.78±15.46a 114.26±10.69ab 22.652 0.000 VEGF（pg/mL）229.45±18.72 189.74±17.46a 134.26±14.33ab 19.869 0.000 LOX相对表达量0.65±0.12 0.41±0.10a 0.15±0.04ab 26.874 0.000

2.2 转移组及无转移组手术前后血清IGF-1、VEGF水平比较

术前，无转移组血清IGF-1、VEGF水平低于转移组（P＜0.05）；术后4周时，2组血清 IGF-1、VEGF水平均较术前降低（P＜0.05），且无转移组仍低于转移组（P＜0.05），见表2。

表2 2组手术前后血清IGF-1、VEGF水平比较（±s）Table 2 Comparison of serum IGF-1 and VEGF levels before and after operation in the 2 groups（± s）

表2 2组手术前后血清IGF-1、VEGF水平比较（±s）Table 2 Comparison of serum IGF-1 and VEGF levels before and after operation in the 2 groups（± s）

组别n t P t P转移组无转移组44 42 27.284 26.581 0.000 0.000 12.888 14.821 0.000 0.000 t P IGF-1（ng/mL）术前232.54±19.47 153.78±15.46 20.712 0.000术后160.23±15.69 101.26±10.15 20.587 0.000 VEGF（pg/mL）术前229.45±18.72 189.74±17.46 10.161 0.000术后195.41±16.32 152.36±15.23 12.633 0.000

2.3 乳腺癌患者术前血清E2、T、P、IGF-1、VEGF水平及组织LOX与淋巴结转移的相关性分析

将乳腺癌转移定义为1，无转移定义为0，经Spearman相关性分析，发现乳腺癌患者血清T及P水平与其淋巴结转移无相关性（P＞0.05），而血清E2、IGF-1、VEGF水平、乳腺癌组织LOX相对表达量与其淋巴结转移呈显著正相关（P＜0.05），见表3。

表3 乳腺癌淋巴结转移的相关性分析（n=86）Table 3 Correlation analysis of lymph node metastasis in breast cancer（n=86）

3 讨论

淋巴结转移在乳腺癌中发生率较高，淋巴结转移不仅影响手术疗效，亦是导致患者预后不良的重要因素[6]。目前，临床诊断乳腺癌患者是否发生淋巴结转移，多通过电子计算机断层扫描（computed tomography，CT）、钼靶等影像学检查，均可出现一定漏诊及误诊[7]。影像学检查常造成不同程度辐射损伤，使其使用受到一定限制。故利用血清学指标筛选出淋巴结转移风险较高者，对其予以重点监测，受到学术界广泛关注。

乳腺癌病因与遗传基因缺损、内源性性激素-免疫激素-细胞基因受体等生理病理变化有关，其中内源性性激素可促进乳腺局部E2合成增多，E2具有刺激乳腺导管上皮细胞增生等作用，可提高乳腺癌细胞增殖能力及转移潜力[8]。故乳腺癌患者血清E2水平与其淋巴结转移可能存在相关性。T、P等性激素能刺激乳腺细胞增殖，并促进乳腺上皮组织内生长因子合成，与乳腺癌恶性程度具有一定联系[9]。外国学者[10]研究发现，血清T水平与乳腺癌淋巴结转移状态呈正相关。而本研究结果显示，转移组血清E2、P水平均高于无转移组及良性组，但3组T水平比较，差异无统计学意义。提示E2、P能通过性激素代谢等生理病理反应，使乳腺癌细胞增殖，并增加淋巴结转移发生率。血清T水平则对乳腺癌增殖及淋巴结转移等情况影响较小，与上述外国学者研究结果不同。考虑造成该结果的原因有人种差异、内分泌代谢不同或检验方法不一致。

据文献报道，LOX可参与胃癌、乳腺癌等恶性肿瘤的发生发展，并推测其原因可能为LOX异常表达使细胞外基质结构及功能异常，进而破坏肿瘤转移的生理屏障，达到促进肿瘤转移的作用[11]。而本研究也发现，转移组乳腺癌组织LOX相对表达量显著高于无转移组，且转移组及无转移组的组织LOX相对表达量均高于良性组的良性病变组织，与上述报道结果一致。然而，组织LOX表达情况需要通过病理活检检出，在术前评估中受到一定限制。但也有学者指出，仍可利用术后病理组织检查LOX表达情况等方式，分析恶性肿瘤情况发展状态，对手术效果及患者预后情况作出预测[12]。

另外，日本学者 Mahdavi等[13]指出，IGF-1 不仅能作用于乳腺细胞基质，还能刺激乳腺癌患者雌激素活性，同时促进卵巢功能兴奋，使机体雌激素水平升高，并与雌激素产生协同作用，以促进乳腺癌细胞增殖，提高其转移潜能。本研究结果也显示，转移组术前血清IGF-1水平高于无转移组和良性组，与上述学者研究结果一致。说明血清IGF-1在恶性肿瘤增殖中具有重要作用，能通过促进乳腺癌细胞增殖等方式，刺激癌细胞淋巴结转移，进而影响患者预后。不仅如此，大量实验数据显示，VEGF不仅能导致乳腺组织血管增生，还能刺激癌周围间质淋巴管增生扩张，而促进癌细胞进入淋巴管，引起淋巴结转移[14]。本研究中，转移组术前血清VEGF水平高于无转移组及良性组，且无转移组血清VEGF水平高于良性组，与学术界研究结果一致[15]。这也初步证实，VEGF在乳腺癌转移中具有重要作用。提示血清VEGF水平较高的乳腺癌患者淋巴结转移风险较高，术后存在一定肿瘤复发、转移等风险，可造成患者预后不良。术后2组IGF-1、VEGF水平较术前降低，但无转移组仍低于转移组。分析其原因可能与手术虽然能降低IGF-1、VEGF表达，但伴淋巴结转移者术后存在较大的肿瘤复发风险，使IGF-1和VEGF仍然高表达有关。

除上述结论外，本研究还发现，血清E2、IGF-1、VEGF水平、乳腺癌组织LOX相对表达量与乳腺癌淋巴结转移呈显著正相关。该结果机制可能为：血清E2、IGF-1能通过协同刺激乳腺癌细胞增殖，提高其恶性程度及转移潜力[16]；血清VEGF增加能同时刺激乳腺癌细胞增生、间质淋巴管扩张，使乳腺癌患者出现淋巴结转移[17]；乳腺癌组织LOX的高表达可影响细胞外基质功能，促进乳腺癌细胞迁移，而刺激病情进展，增加淋巴结转移风险[18]。因此，临床在乳腺癌患者治疗前，可通过检测其血清E2、IGF-1、VEGF水平，观察其淋巴结转移情况，并联合手术组织病理检测乳腺癌组织LOX表达水平，综合评估患者病情，预测患者预后。

综上所述，乳腺癌患者血清E2、IGF-1、VEGF水平、乳腺癌组织LOX表达与淋巴结转移呈正相关，临床可根据血清E2、IGF-1、VEGF水平及乳腺癌组织LOX表达水平评估患者淋巴结转移及病情进展情况，预测患者术后恢复状况。