乳腺癌患者D-双功能蛋白表达与肿瘤标志物CEA和CA153关系的临床研究

路欣，孔令玉，邱宁

乳腺癌是常见的恶性肿瘤，在妇科系统肿瘤中长期居于首位。乳腺癌早期的症状不易发现，很多患者就诊时已经到中晚期。术后转移是造成乳腺癌患者死亡的重要原因，对妇女的健康构成了极大的威胁，如果能发现乳腺癌更好的早期预警手段，提高早期诊断水平，就可以降低乳腺癌患者的致死风险，提高生存周期[1-2]。D-双功能蛋白(D-bifunctional protein，DBP)，也称为17β-雌二醇脱氢酶IV(17β-hydroxysteroid dehydrogenase IV, HSD17B4)，是一种过氧化物的酶蛋白，在类固醇激素的代谢中发挥着重要作用。最近的研究报道DBP在前列腺癌、肝癌等肿瘤中表达水平明显升高[3]。笔者在前期基础实验和临床研究结果显示，DBP在肝癌细胞、动物组织以及肝癌患者的肿瘤组织中高表达，通过诱导雌二醇(estradiol, E2)脱氢失活机制，因而促进肝癌细胞的增殖[4]。所以考虑DBP水平升高也可能和某些与雌激素相关肿瘤有很大的关系。本课题对乳腺癌肿瘤组织DBP水平进行检测，同时观察乳腺癌患者和健康女性外周血癌胚抗原(CEA)以及糖类抗原153(CA153)的表达，探讨研究DBP在乳腺癌中的表达水平及其与发病的关系，以及早期诊断的临床相关性，报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2012年1月—2015年12月在唐山市妇幼保健院施行乳腺癌手术的20例女性患者为试验组，年龄35～65(38.5±4.9)岁；随机抽选同期进行健康查体的20例正常女性为健康对照组，年龄27～65(43.0±6.5)岁。乳腺癌患者全部经病理和临床证实，手术前未经过放化疗等治疗，无其他特殊病史。20例乳腺癌女性患者术后的肿瘤组织和距离肿瘤边缘1 cm以上的癌旁正常组织留取病理标本。并且经2名资深的病理科医师确认病理结果。2组年龄等差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会审批通过，全部受试者知情同意并签署知情同意书。

1.2 检测指标与方法 2组试验对象晨起空腹采取静脉血液，在离心机上离心分离血清后用DX-800i化学发光仪，采用化学发光免疫法测量CEA 和CA153的表达水平，所用试剂购买自美国贝克曼公司；癌组织和癌旁正常组织标本石蜡包埋后用莱卡组织切片机切片，组织切片后先用HE染色进行初步确认对比后，然后应用免疫组织化学检测试剂盒(北京中杉金桥生物公司)检测DBP表达水平，DBP表达水平用积分光密度(IOD)表示。

2 结 果

2.1 试验组与健康对照组血清CEA和CA153水平比较 试验组血清肿瘤标志物 CEA、CA153水平显著高于健康对照组，2组比较差异有统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1 试验组与健康对照组血清CEA、

2.2 乳腺癌肿瘤组织和癌旁正常组织DBP表达水平比较 免疫组化染色结果显示癌组织DBP表达水平显著高于癌旁组织。进一步通过灰度值分析，乳腺癌组织DBP表达的灰度值为(96.3±11.4)，癌旁组织为 (29.8±5.7)，差异具有统计学意义(t=2.301,P<0.05)。

2.3 试验组CEA、CA153与DBP表达水平的相关性 对试验组CEA和CA153表达水平与DBP表达水平进行了相关性分析, 结果显示，DBP与CEA和CA153的表达量均呈正相关(r=0.800,P<0.01；r=0.709,P<0.01)，见图1。

图1 CEA、CA153与DBP表达水平的相关性

3 讨 论

乳腺癌是门诊和住院中常见的妇科恶性肿瘤，目前仍没有敏感性特别好的非创伤性检测方法，除了影像学诊断和病理诊断，血清肿瘤标志物检测是临床最为常用的肿瘤诊断方法之一，但与影像学诊断和病理相比血清肿瘤标志物检测简单快捷，因此有较好的临床实用意义[5]。CA153是乳腺癌诊断应用较为普遍的监测因素，有研究显示大约有1/3的乳腺癌患者血清CA153水平升高，并且升高和变化与乳腺癌的好转或恶化有关，本研究也表明乳腺癌患者的CA153水平较健康对照组有显著升高。CEA常作为腺癌的非特异性诊断标记物，在其他恶性肿瘤的鉴别诊断、疗效监测中有重要的临床意义, 但是由于CA153为非特异性指标, 常与其他指标联合检测[6]。虽然乳腺癌的血清学检测方法较为简便快捷, 但是血清肿瘤标志物检测的敏感性和特异性并不高，况且血清学检测也受到外部和体内诸多环境的影响，因此如果血清学肿瘤标志物检测联合应该能够更好地提升乳腺癌检出准确率。

DBP基因是一种与炎性反应、脂肪酸代谢、性类固醇代谢密切相关的酶蛋白分子。最近研究显示，DBP与肿瘤有密切关系，DBP在前列腺癌组织比癌旁正常组织高表达，并可以作为前列腺癌预后差独立标记物[7]。另外其他肿瘤组织如肝细胞肝癌、直肠癌中都高度表达，DBP在卵巢高表达和通过对雌激素失活的作用防止E2在卵巢积聚，为卵巢癌的预防和治疗提供了新靶点[8-13]。

本课题在前期研究基础上，率先以DBP为切入点，探索和揭示了乳腺癌DBP与CEA、CA153的关系，与前期肝细胞肝癌、子宫内膜癌的研究结果表现出一致性，研究结果不仅证实乳腺癌肿瘤组织DBP的表达显著升高，并且显著高于癌旁正常组织，乳腺癌的血清CEA和CA153水平表达显著高于正常女性 (P<0.01)，进一步研究显示，试验组肿瘤组织DBP的表达水平与患者血清CEA、CA153水平呈正相关。由于DBP在血液中几乎不表达，能够作为良好的基因检测和治疗观察靶点，这恰恰补充了血清肿瘤标志物检测的不足，结果清晰地表明乳腺癌患者DBP联合血清学肿瘤标志物CEA和CA153的检测能够更好地提高乳腺癌早期的诊断率， 此外DBP还可以作为乳腺癌术后观察和病情监测的新基因靶点。

利益冲突：无

作者贡献声明

路欣：设计研究方案，实施研究过程，论文撰写，论文修改；孔令玉：设计研究思路，分析试验数据，论文审核；邱宁：实施研究过程，资料搜集整理