温正辉
(嘉应学院医学院附属医院药剂科,广东梅州 514031)
蒲桃是桃金娘科的常绿乔木,属于马来群岛与印度的主要原产地,在我国海南岛也有人工栽培的蒲桃。在古典药物奠基中有着关于蒲桃的记载,如《本草再新》中有“味甘酸,性热,无毒;人脾、肺二经;暖胃健脾”。蒲桃当中的不同部位均能够入药,以叶、花、果、种子以及树皮为主。对此,探讨蒲桃不同提取部位总黄酮含量比较研究具备显著实际意义。
本次研究主要应用了UV102的紫外可见光光度计、CP225D型的电子太平以及RE52-86A旋转的蒸发器以及循环水系统。在药物材料的选择方面以芦丁作为对照品,药物由生物制品检验所提供。蒲桃药材来源于广西,通过鉴定属于桃金娘科蒲桃,试剂均属于分析纯。
首先,制备对照品溶液,采用15 mg芦丁放入到50 mL溶液瓶中并加入乙醇摇匀,将宜春西施到定容和刻度后制作成为芦丁储备液,芦丁浓度为0.304,8 mg/mL,同样方式配置对照品储备液,芦丁的浓度控制为9.578 mg/mL[1]。其次,部位的清膏制备。采用蒲桃粗粉1 g,加入70%乙醇溶液,以常规加热之后回流2 h处理,滤液蒸干到无醇味之后残渣加水25 mL混悬处理,根据1:1的体积加入不同蒲桃部位;再次,供试品的溶液制备。采用上述不同部位的蒲桃清膏放入到10 mL瓶中,加入乙醇溶液并实行溶解与定容。精密度以1 mL位置,放入到10 mL的量瓶中,加入5%亚硝酸钠溶液,6 min之后加入10%硝酸铝,6 min后再加入氢氧化钠,采用70%乙醇稀释摇匀;最后,标准曲线的绘制[2]。将所蝴蝶的储备液分别放置在10 mL量瓶当中,在获得标准溶液之后以510 nm的波长测定吸光度,吸光度以对照品的浓度作为横坐标,绘制曲线,在获得回归方程后结果显示普调的不同提取部位总黄酮在15.25 μg/mL-76.25 μg/mL。另外,在稳定试验中,粗粉1 g按照处理之后,采取乙醇乙酯浸膏,在510 nm位置分别处理0.5 h、1.0 h、1.5 h、2.0 h后测定吸光度,吸光度的RSD为1.2%,结果显示样品室温之下放置2 h最为稳定。
在回流的温度方面需要控制在80oC,回流的时间为2 h,料液比例控制在1:100,乙醇的浓度需要适当提高尽可能保障蒲桃的黄铜提取量最大化,并且之后呈现出下降的趋势。料液比应当为1:100,此时随着时间的延长蒲桃的总黄酮溶出率会不断提升,在时间2 h左右时达到最大[3]。对此,可以将最佳的提取时间控制为2 h。提取的温度方面,乙醇的浓度为70%、时间2 h以及料液比1:100的条件之下,温度的提升会促使黄酮的提取量不断提高,并且黄酮类的化合物处于乙醇当中时溶解度与温度呈现出正相关,所以需要严格控制热效应这一问题。乙醇的提取属于一个次要的位置,一般情况下80oC应当为黄铜提取最佳温度。在对比显色之后,对照品与供试品在510 nm的位置上呈现出了最佳的吸收,所以最佳波长应当为510 nm。
综上所述,蒲桃的不同部位在总黄酮提取方面的总量并不相同,其中石油醚部位的总黄酮提取量最低,总量从低到高除了石油醚最低以外,其余部位的排名水部位、正丁醇部位以及氯仿、乙酸乙酯。乙酸乙酯部位的总黄酮提取量最高,并且属于中等极性的化合物。在本次研究当中,所应用的提取方式操作简单同时重复性优势突出,在黄酮提取方面的专属价值也比较明显,可以准确地测定黄酮的数值,可以为今后黄酮提取提供可靠的技术帮助,并且能够为质量标准提供指导帮助。