玉米砂粒母种的制作

1 培养基的制作

取干燥无霉变豌豆粒大小的玉米砂粒，最好经粉碎机加工，用筛子去除面粉和玉米皮，淘洗干净后置于石灰水清液（pH8左右）中浸泡2～3 h，再淘洗至无浑浊，沥水3～5 min，放入蒸锅蒸10～20 min至八成熟，盛入容器内，按每千克干粒加入磷酸二氢钾3 g，白糖20 g，复合肥8 g，搅拌溶化冷却呈砂粒状颗粒，如果不呈砂粒状说明蒸的时间太长，应重新置备，所以掌握好蒸玉米砂很关键。将制作好的玉米砂分别装入试管（干粒重10 g，用于转管生产和母种分离），用木棒轻压实，用湿棉塞（使用时捏挤至无水珠滴落为宜）封口，以手提棉塞头试管不掉下为宜，每7支扎成一捆，即可灭菌。用家用压力锅灭菌，先向锅内注水1.5 kg，试管直立于锅底，用绳将锅内小捆扎成一体。调大火至水开后盖上锅盖，排气孔排气5 min，限压阀喷蒸汽时开始计时，维持40～50 min，冷却后取出备用。也可用大锅常压灭菌，方法是锅盖四周排汽开始计时，维持2.5 h，同样能达到灭菌效果。无论用哪种方法灭菌，要注意试管棉塞不要挨着锅壁，以防冷凝水浸湿棉塞。停火后冷却至30℃以下开盖取出，这也是灭菌的关键。

2 母种转接

用甲醛和高锰酸钾熏蒸接种箱10～15 min，试管用75%酒精擦拭消毒。按常规接种方法进行操作。

3 母种简易保藏

当继代或传代母种试管内的菌丝萌发长至1～2 cm时，试管口棉塞剪齐与管口齐平，取白色蜡烛2支放入直径约5～6 cm的空罐内熔化形成蜡液并煮沸，迅速将剪好棉塞试管倒立，入溶沸的蜡液浸泡10 s，待蜡液不产生气泡时，自然冷却直至蜡烛的溶液与棉塞融合凝固（起隔绝空气作用），置室内阴凉黑暗处，可保存1～2年。