女性抗苗勒氏管激素在新鲜胚胎移植周期的临床研究*

马淑霞 高瑞格 白 静

(洛阳市妇女儿童医疗保健中心生殖医学研究所，河南 洛阳 471000)

近年来，随着人们生活环境、生活习惯、工作压力以及各种疾病等因素，导致不孕不育发生率呈现上升及年轻化趋势。数据报道显示[1]：在不孕不育夫妻中40.0%是男方原因，其中50.0%的不育男性为精子形态异常，导致越来越多的人不得不借助辅助生殖技术来获得孩子。在辅助生殖超促排卵中，卵巢反应具有个体差异性，而在外源性促性腺激素(Gn)刺激下，不同患者卵泡发育数量、质量不尽相同[2]。卵巢反应则主要由卵母细胞数量、质量，即：卵巢储备功能有关，临床多根据患者的年龄、基础激素水平、卵巢对各项试验的敏感性，但是女性抗苗勒氏管激素对新鲜胚胎移植周期的影响尚缺乏报道[3-4]。为了探讨女性抗苗勒氏管激素在新鲜胚胎移植周期中的检测意义，本研究回顾分析了2016年3月—2017年9月在本院行IVF/ICSI助孕的不孕症患者450例进行分析研究。

1 资料与方法

1.1临床资料 取2016年3月—2017年9月医院体外受精—胚胎移植/体外受精—胞浆内单精子注射不孕症患者450例，采用随机数字法分为卵巢低反应组、卵巢正常反应组和卵巢高反应组。卵巢低反应组140例，年龄(28～45)岁，平均(34.12±4.16)岁，体质量指数(19.83～25.31)kg/m2，平均(21.53±2.14)kg/m2。卵巢正常反应组140例，年龄(29～46)岁，平均(35.01±4.21)岁，体质量指数(19.91～25.98)kg/m2，平均(21.74±2.21)kg/m2。卵巢高反应组170例，年龄(27～46)岁，平均(35.12±4.21)岁，体质量指数(19.71～25.64)kg/m2，平均(21.83±2.31)kg/m2。纳入标准：①符合IVF/ICSI不孕症临床诊断标准；②入院后均经过生化指标、影像学检查得到确诊。排除标准：①排除不符合纳入诊断标准者；②排除合并有影响效应指标观测、判断其他生理或病理者；③排除多卵巢综合征、甲状腺功能异常者。

1.2方法 分组标准。根据获卵个数分为卵巢低反应组、卵巢正常反应组和卵巢高反应组。判断标准如下：(1)获卵数≤4个为卵巢低反应，获卵数≥20个为卵巢高反应组，获卵数5～19个为卵巢正常反应。胚胎移植后2周检查β-hCG，妊娠45 d超声下看到孕囊确定为临床妊娠。(2)促性腺激素释放激素激动剂短方案超排卵。3组患者从月经第2 d开始每天采用0.1 mg醋酸曲普瑞林(长春金赛药业有限责任公司，国药准字H20041531)，月经第3 d根据患者的年龄、基础内分泌激素、B超检查卵巢窦卵泡数，从而确定Gn使用剂量，开始促排卵治疗，对于至少有2个优势卵泡直径≥18 mm时开始注射5000 IU～10000 IU hCG，注射后35～36 h后经阴道超声下取卵。最后430个周期进行了新鲜胚胎移植。7例患者由于孕酮较高取消胚胎移植，1例由于内膜过薄取消新鲜移植。12例患者预防卵巢过度刺激综合征行全胚冷冻。(3)生化指标检查。3组患者均在促排周期月经第2 d及注射人绒毛膜促性腺激素当日检测三组血清抗苗勒氏管激素(AMH)、E2及孕酮(P)水平情况。血清储存在-20 ℃，采用高敏感双位酶联免疫吸附试验检测FSH、LH、E2及P水平。采用全自动免疫化学发光法检测3组卵巢激素，相关操作步骤必须严格遵循仪器、试剂盒操作说明进行[5-6]。

2 结 果

2.13组FSH、LH、E2及P水平比较 卵巢正常反应组FSH水平，低于卵巢低反应组(P<0.04)；卵巢正常反应组LH、E2及P水平、AMH水平，高于卵巢低反应组(P<0.05)，低于卵巢高反应组(P<0.05)，见表1。

表1 3组FSH、LH、E2及P水平比较

与卵巢低反应组相比，aP<0.05；与卵巢高反应组相比，bP<0.05

2.2妊娠患者与未妊娠患者Gn量、获卵数及AMH水平比较

胚胎移植430例患者中，162例未妊娠，268例妊娠。妊娠患者与未妊娠患者Gn量及获卵数比较差异无统计学意义(P>0.05)；妊娠患者AMH水平，高于未妊娠患者(P<0.05)，见表2。

表2 妊娠患者与未妊娠患者Gn量、获卵数及AMH水平比较

3 讨 论

辅助生殖技术属于是一种新型的帮助不孕患者受孕的方法，它是指通过对精子、卵子、受精卵、配体等操作进行处理，从而治疗不孕不育的技术。根据我国卫生部颁布的《人类辅助生殖技术管理方法》在实施人类辅助生殖技术时必须严格遵循我国人口和计划生育法相关条例规定，保证每一位患者均能获得健康、自然的孩子[7]。文献报道显示[8]：女性抗苗勒氏管激素(AMH)在新鲜胚胎移植中具有一定的指导意义，但是其具体机制尚不清楚。AMH属于是一种表达纯化的二聚体糖蛋白，在人体中主要位于19号染色体中，该糖蛋白与抑制素、激活素相同属于转化生长因子β超家族。文献报道显示：AMG在女性胎儿36周后由窦前卵泡以及小窦卵泡的颗粒细胞分化获得，并且在人体中能抑制卵泡的生长，能有效的防治卵泡过快过早消耗[9]。AMH在卵巢不同反应人群中表达不同。此外，AMH主要作用在靶器官细胞膜上，能发挥丝-苏氨酸激活酶活性的特异性II型受体作用，属于能间接作为卵泡质量及获卵数量的。本研究中，卵巢正常反应组FSH水平，低于卵巢低反应组(P<0.04)；卵巢正常反应组E2及P水平、AMH水平，高于卵巢低反应组(P<0.05)，低于卵巢高反应组(P<0.05)。由此看出：AMH与卵巢反应成正相关，FSH与卵巢反应呈负相关。此外，有人提出AMH能有效的预测卵巢过度刺激综合征的发生。国外学者对仅有单个卵泡发育的IVF患者作为研究对象，结果显示：卵泡液AMH水平与临床妊娠率、胚胎的种植率呈正相关，与流产率无关，因此，AMH并不能预测妊娠结局，难以直接反应卵母细胞及胚胎的质量[10]。本研究中新鲜胚胎移植430例患者中，162例未妊娠，268例妊娠。妊娠患者与未妊娠患者Gn量及获卵数比较差异无统计学意义，妊娠患者AMH水平高于非妊娠患者，差异有统计学院意义。可见AMH对预测临床结局有一定的指导意义。另一项研究统计≥35岁IVF患者认为，血清AMH是预测临床妊娠率的独立因素，妊娠者AMH平均水平为3.2 ng/ml,显著高于妊娠失败者1.15 ng/ml[11]。因此，临床上检测AMH水平可能能作为独立指标或联合其他指标预测患者卵巢的储备功能，可以初步判断助孕结局，并且根据检测水平及时采取有效的措施进行干预，对于卵巢高反应者可以通过减少Gn用量来降低卵巢风险，进一步提高妊娠结局，尽可能的让每一位女性都能获得健康的宝宝。

综上所述，女性抗苗勒氏管激素在IVF/ICSI不孕症患者中具有一定指导意义，可以预测卵巢高反应，对于妊娠结局的预测尚需进一步研究。