使用高效液相色谱法检测蔬果中啶虫脒等5种农药残留

□ 余晓波 刘 冲 枝江市公共检验检测中心

1 材料与方法

1.1 仪器与设备

在本次研究中，使用LC—20A高效液相色谱仪（紫外检测器，LCsolution色谱工作站，日本岛津公司）；HY—5回旋式振荡器（金坛市鸿科仪器厂）；TG16—WS台式高速离心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司）；RE—52CS旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；AL204电子天平（梅特勒—托利多仪器（上海）有限公司）；0.22μm微孔滤膜（天津市津腾实验设备有限公司）；Milli—Q direct8超纯水机（密理博公司）。

1.2 材料与试剂

本次研究所使用果蔬的样品均在本地的农贸市场采购，进行粉碎后备用。所使用的农药啶虫脒、嘧霉胺、氟虫腈、辛硫磷和哒螨灵标准物质（浓度为1 000μg/mL，青岛捷世康生物科技有限公司）；甲醇、乙腈（色谱纯，MREDA公司）；二氯甲烷（色谱纯，MERCK公司；氯化钠（分析纯，南京化学试剂股份有限公司）；NH2小柱（500 mg/6 mL，上海安谱实验科技股份有限公司）；在本次的实验过程中所使用的水都是超纯水[1]。

1.3 试验方法

1.3.1 制备标准溶液

100 μg/mL农药标准储备液：取1 000 μg/mL农药标准溶液各1 mL，放在10 mL刻度管中，使用甲醇稀释到刻度，再对其进行摇匀。1 μg/mL的农药标准工作液：把0.1 mL标准储备液移入10 mL的刻度管中，使用甲醇将其稀释到刻度，再对其进行摇匀。标准工作液：根据要求使用甲醇—水（1∶1，V∶V）稀释到合理的浓度。

1.3.2 对样品进行预处理

称取10 g已经粉碎好的蔬果样品，放在50 mL的离心管里，再加入20 mL的乙腈，在恒温摇床上振荡30 min后，再放入10 g的氯化钠，盖上盖子，使用恒温摇床振荡1 min，以4 000r/min的速度离心5 min，取上清液10 mL放入50 mL的梨形瓶里，在40 ℃下旋转蒸干。加入4 mL的二氯甲烷—甲醇（97∶3，V∶V）洗脱液对残渣进行溶解，等候净化。使用5 mL的洗脱液活化氨基小柱，抛弃洗脱液，当液位将要达到氨基柱吸附层表面时，马上把样品溶液转移到氨基小柱里，把流出的液体收集在50 mL的鸡心瓶里，然后用洗脱液分两次清洗梨形瓶，每次3 mL，也转移到氨基柱中，将洗脱液混合进鸡心瓶中，在30 ℃环境下旋转蒸发到接近干燥，再使用洗耳球将其吹干，使用1 mL甲醇—水（1∶1，V∶V）进行定容，旋涡混合均匀，使用0.22 μm的滤膜进行过滤，再应用高效液相色谱法进行测定[2]。

1.3.3 液相色谱条件

使用Dikma Spursil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流速为1 mL/min；柱温为35 ℃；进样量为20 μL；流动相A为水，流动相B为甲醇。

2 结果与讨论

2.1 方法的线性范围和定量限

本次研究配置质量浓度为0.1、0.25、0.5、1.0μg/mL 和 2.0 μg/mL的混合标准溶液，经过测定之后发现，不同的农药在0.1～2.0 μg/mL的浓度范围内与色谱峰面积具有较好的线性关系，相关系数为0.999 4～0.999 7。按照仪器的灵敏度和加标回收试验，根据信噪比（S/N）≥10计算方法得出，定量限为0.006～0.02 mg/kg，能够满足国家限量标准的规定。

2.2 方法回收率与精密度

对蔬果样品进行添加回收实验，加标的浓度分别为0.02、0.05、0.1 mg/kg， 不同农药的加标回收率在70.4%～112.8%的区间内，而RSD则为2.2%～11.7%。试验结果说明，经过氨基固相萃取柱的净化，高效液相色谱紫外变波长检测蔬菜和水果中多种农药残留具有较高的准确性[3]。

3 结语

本文提出了测定蔬菜和水果中啶虫脒、嘧霉胺、氟虫腈、辛硫磷以及哒螨灵等农药残留的高效液相色谱方法。本研究所使用的样品经过乙腈提取，氨基固相萃取小柱富集和净化。将样品中的目标化合物与干扰共提物分离的同时，将被分析物浓缩，方法定量限为0.006～0.02 mg/kg。这一方法较为简洁和高效，符合多种农药残留检测的要求，因而具有适用性，值得在蔬果农药残留检测中进行推广。