高效液相色谱测定食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠方法验证

◎ 吴 婷

（黄石市食品药品检验检测中心，湖北 黄石 435000）

1 实验材料

1.1 试剂与仪器设备

苯甲酸标准物质[1.0 mg·mL-1，编号：GBW(E)100006，中国计量科学研究院]、山梨酸标准物质[1.0 mg·mL-1，编号：GBW(E)100007，中国计量科学研究院]、糖精钠标准物质 [1.0 mg·mL-1，编号：GBW(E)100008，中国计量科学研究院]，电子天平、高速冷冻离心机、岛津LC-2030C 3D高效液相色谱仪。

1.2 仪器条件

色谱柱：Venusil C18Plus 4.6 mm×250 mm，5 μm；流动相：甲醇+乙酸铵溶液=10+90，pH为8.5；流速：1 mL·min-1；检测波长：230 nm；进样量：10 μL；柱温：30 ℃。

2 实验方法

2.1 混合标准溶液配制

精取苯甲酸标准物质、山梨酸标准物质、糖精钠标准物质各4.000 mL于20 mL容量瓶中，用水定容至刻度线，即得200 μg·mL-1混合标准溶液。用混标溶液逐级稀释为 100、50、25、12.5、2.5、0.5 μg·mL-1和 0.2 μg·mL-1标准工作液。

2.2 样品处理

称粉碎均匀的约2 g样品于50 mL离心管中，加水约10 mL，超声振荡提取20 min，取出后加入2 mL亚铁氢化钾溶液，摇匀，再加入2 mL乙酸锌溶液，加水至刻度，摇匀，离心，吸出上清液，过0.22 μm滤膜待上机。

计算公式：

式中：X为试样中待测组分的含量，单位g·kg-1；Cl为由标准曲线得出的试样液中待测物中质量浓度，单位mg·L-1；V为试样定容的体积，单位为mL；1 000为由mg·kg-1转换为g·kg-1的换算因子；m为试样质量，单位为g。

3 结果与结论

3.1 标准曲线

测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠在0.2～200 mg·L-1范围内线性良好，苯甲酸回归方程y=31 991.7x，相关系数为0.999 7；山梨酸回归方程y=60 861.2x，相关系数为0.999 8；糖精钠回归方程y=21 521.4x，相关系数为0.999 7。

3.2 检出限

苯甲酸在0.25 mg·L-1时，信噪比大于3∶1，检出限为 0.006 g·kg-1；山梨酸在 0.20 mg·L-1时，信噪比大于3∶1，检出限为0.005 g·kg-1；糖精钠在0.50 mg·L-1时，信噪比大于3∶1，检出限为0.012 5 g·kg-1。

3.3 精密度

将浓度为25 mg·L-1的苯甲酸、山梨酸、糖精钠混标连续进样6次，其结果见表1，RSD在0.02%～0.10%，精密度良好。

表1 苯甲酸、山梨酸、糖精钠的重复性试验表

3.4 回收率

准确称取3个约2 g白酒阴性样品，样1加入苯甲酸（1.0 mg·mL-1）、山梨酸（1.0 mg·mL-1）、糖精钠（1.0 mg·mL-1）0.14 mL，样2加入苯甲酸（1.0 mg·mL-1）、山 梨 酸（1.0 mg·mL-1）、 糖 精 钠（1.0 mg·mL-1）0.60mL，样 3加入苯甲酸（1.0 mg·mL-1）、山梨酸（1.0 mg·mL-1）、糖精钠（1.0 mg·mL-1）1.00 mL，实验结果见表2。苯甲酸加标回收率介于95.8%～100%，山梨酸加标回收率介于89.4%～99.8%，糖精钠加标回收率介于97.3%～102.7%。回收率较高，均能满足要求。

表2 回收率实验结果表

4 结论

按照GB 5009.28-2016《食品安全国家标准 食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的测定》测定[1]，苯甲酸、山梨酸、糖精钠在0.2～200 mg·L-1范围内均线性良好，相关系数均≥0.9997。苯甲酸检出限0.006 g·kg-1，山梨酸检出限为0.005 g·kg-1，糖精钠检出限为0.012 5 g·kg-1，与国家标准中 0.005 g·kg-1有些差别，可能与不同品牌仪器及色谱条件有关，有待进一步探讨[2-3]。苯甲酸、山梨酸、糖精钠的重复性试验RSD在0.02%～0.10%，精密度良好。加标回收率均在89.4%～102.7%，回收率良好。