比黑马尔江散抗胃溃疡、抗炎及镇痛药效学观察

张 燕， 马艳艳， 斯地克·麦麦提， 翟筱妍， 李雅婷， 张之

(1乌鲁木齐新疆军区总医院儿科， 乌鲁木齐 830000； 2新疆医科大学临床14-5定向班， 乌鲁木齐 830011；3新疆喀什地区维吾尔医医院骨科， 新疆 喀什 844000； 4新疆医科大学药学院药理教研室， 乌鲁木齐 830011)

胃溃疡是在多种致病因子的作用下，发生的胃黏膜炎性反应与坏死性病变，临床症状主要为长期性、周期性、节律性的上腹部隐痛或烧灼样疼痛[1]。胃溃疡是临床常见病，具有发病率高，胃出血、穿孔等并发症多，容易反复发作，缠绵难愈等特点。西医治疗主要以抑酸药来解除胃酸对溃疡面的刺激和腐蚀，临床效果显著, 但复发率较高,不良反应较大[2]。 中医药在治疗胃溃疡尤其防止复发方面具有独特的优势[3]。比黑马尔江散(BHM)由没食子、黑种草子、菝契、海螵蛸、珊瑚等8味药材组成，临床上多用于消化性溃疡的治疗。目前对BHM的研究主要集中在抗菌作用[4]和含量测定[5]方面，本研究采用水浸应激和吲哚美辛药物致大鼠胃溃疡模型，探究BHM的抗胃溃疡及抗炎、镇痛作用，现报道如下。

1 材料与方法

1.1动物KM小鼠，雌雄兼有，体质量( 20±2)g；清洁级雄性SD大鼠，体质量 (200±20) g，由新疆医科大学实验动物中心提供，合格证号SCXK(新) 2016-0004。

1.2药物比黑马尔江散由喀什地区维吾尔医医院制剂中心提供，批号 MZJ-W-0321-2009 ；吲哚美辛为广东华南药业集团有限公司生产，批号：国药准字H44020701。

1.3仪器GL522-1SCN型电子分析天平 ( 德国赛多利斯有限公司 )，RL118121型电子显微镜(河北德科机械科技有限公司)。

1.4抗胃溃疡作用实验

1.4.1 水浸应激诱发大鼠胃溃疡模型建立 取35只SD大鼠禁食不禁水48 h，随机分为正常对照组、模型组、BHM低剂量组、BHM高剂量组、阳性对照组，每组7 只，BHM高、低剂量组分别灌胃给予比黑玛尔江散6.250、3.125 g/kg体质量，阳性对照组灌胃枸橼酸铋钾颗粒0.012 5 g/kg体质量，模型组、正常对照组灌胃等量蒸馏水10 mL/kg体质量。除正常组外其他各组大鼠灌胃后，将大鼠固定于鼠板上，垂直浸入20℃的水中，水面浸至剑突处，12 h后取出，麻醉处死，摘取全胃放入蒸馏水漂洗干净，浸入1%甲醛溶液轻微固定。

1.4.2 吲哚美辛致大鼠胃溃疡模型 取21只SD大鼠禁食不禁水48 h，随机分为正常对照组、模型组、BHM给药组，每组7 只，BHM给药组大鼠灌胃给予比黑马尔江散6.25 g/kg体质量，1 h后模型组、BHM给药组大鼠灌胃给予吲哚美辛0.04 g/kg致胃溃疡。

1.4.3 观察指标 (1) 沿胃大弯刨开胃，肉眼观察胃黏膜整体外观情况：胃粘膜水肿情况，点状或条状出血和溃疡情况，拍照，千分尺测量胃壁厚度。 (2) 胃黏膜溃疡指数(UI)评定 : 测量每个溃疡的长径，计算溃疡指数。按Guth标准计数胃黏膜UI并累计计分：斑点糜烂计1分；糜烂长度<1 mm计2分；1～2 mm计3分；2～3 mm计4分；>4 mm计5分；宽度>2 mm时分值乘2。(3)胃黏膜组织病理学标本制备及观察:于胃黏膜损伤最明显处取0.5 cm×1.0 cm组织块，10%甲醛溶液固定，石蜡包埋、切片、HE染色，观察胃黏膜病理组织学变化 。

1.5镇痛实验取18 只KM小鼠随机分为模型组、BHM给药组，每组9 只，BHM给药组小鼠灌胃给予比黑马尔江散30 g/kg体质量，每天1 次，连续3 d，模型组小鼠给予蒸馏水10 mL/kg体质量，每天1 次，连续3 d，末次给药1 h后，2组小鼠均腹腔注射0.7%醋酸溶液0.2 mL，观察记录各组扭体潜伏期，15 min内小鼠发生的扭体反应(腹部收缩内凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行)的鼠数和各鼠扭体次数。扭体反应抑制率%=(对照组平均扭体数-给药组平均扭体数)/对照组平均扭体数×100%。

1.6抗炎实验取18 只KM小鼠，测定小鼠给药前左后足跖厚度后，随机分为模型组、BHM给药组，每组9 只，BHM给药组小鼠灌胃给予比黑马尔江散3 g/kg体质量，模型组小鼠给予蒸馏水10 mL/kg体质量，每天1 次，连续3 d，末次给药1 h后，左后足跖皮下注射0.1 m L蛋清致炎，观察记录致炎2 h后左后足趾厚度，比较足跖肿胀度，计算肿胀抑制率。肿胀抑制率%=(对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/对照组平均肿胀度×100 %。

2 结果

2.1BHM对胃溃疡模型大鼠胃外观的影响

2.1.1 BHM对水浸应激诱发胃溃疡模型大鼠胃外观的影响 正常对照组大鼠胃腔无血性积液，黏膜呈淡红色，光滑完整；模型组大鼠胃腔内有大量血性积液，黏膜表面附着大量血痂，黏膜充血水肿，呈深红色，见弥漫性点线状出血、糜烂及溃疡形成；BHM低剂量组大鼠胃腔内有中量血性积液，黏膜面附着中量血痂，胃黏膜有充血水肿，但程度较溃疡模型组略轻，见散在斑点状糜烂；BHM高剂量组大鼠胃腔内有少量血性积液，黏膜面附着少量血痂，胃黏膜虽有充血水肿，但程度较溃疡模型组减轻，见图1。

2.1.2 BHM对吲哚美辛诱发胃溃疡模型大鼠胃外观的影响 正常对照组大鼠胃腔无血性积液，黏膜呈淡红色，光滑完整；模型组大鼠胃腔内有大量血性积液，黏膜表面附着大量血痂，黏膜充血水肿，胃壁厚度增厚，呈深红色，见弥漫性点线状出血、糜烂及溃疡形成；BHM给药组大鼠胃腔内有少量血性积液，黏膜面附着少量血痂，胃黏膜轻度充血水肿，见图2。

a: 正常对照组

b: 模型组

c: BHM高剂量组

d: BHM低剂量组

e: 阳性对照组

图1对水浸应激诱发胃溃疡实验各组大鼠胃黏膜外观图

a: 正常对照组

b: 模型组

c: BHM组

图2吲哚美辛诱发胃溃疡实验各组大鼠胃黏膜外观图

2.2BHM对胃溃疡模型大鼠胃溃疡指数的影响

2.2.1 BHM对水浸应激诱发胃溃疡模型大鼠胃溃疡指数的影响 与正常对照组比较，模型组大鼠胃壁厚度增厚，溃疡指数为12.4，差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,BHM高剂量组大鼠胃壁肿胀厚度降低，差异有统计学意义(P<0.05)，BHM高、低剂量组大鼠溃疡指数减小，差异有统计学意义(P<0.05，P<0.01)，见表1。

组 别剂量/(g/kg)溃疡指数胃壁厚度/mm抑制率/%正常对照组10(蒸馏水) 00.223±0.016-模型组10(蒸馏水)12.4±3.4#0.279±0.050#0BHM低剂量组3.1257.4±2.4*0.271±0.03158.0BHM高剂量组6.2505.8±3.2**0.183±0.041*53.2阳性对照组0.012 57.0±4.8*0.235±0.041*43.5

注：与正常对照组比较，#P<0.05，##P<0.01； 与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。

2.2.2 BHM对吲哚美辛诱发胃溃疡模型大鼠胃溃疡指数的影响 与正常对照组比较,模型组大鼠平均溃疡指数为40.3,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,BHM给药组大鼠溃疡指数为12.8,差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

组别剂量/(g/kg) 体质量/g溃疡指数抑制率/%正常对照组0198±15.00-模型组0.04201±18.840.3±9.0#0BHM给药组6.25204±13.412.8±10.1*68.2

注：与正常对照组比较，#P<0.05；与模型组比较，*P<0.05。

2.3大鼠胃黏膜病理组织学变化

2.3.1 BHM对水浸应激诱发胃溃疡模型大鼠胃病理组织学的影响 正常对照组大鼠胃黏膜结构完整，腺体排列整齐，未见炎性细胞浸润及黏膜下出血；模型组大鼠胃黏膜毛细血管扩张、充血及出血，间质见炎性细胞浸润，部分区域黏膜坏死、脱落，溃疡形成；BHM低剂量组大鼠胃黏膜血管轻度扩张、充血，部分区域黏膜表层上皮细胞坏死、脱落，间质见少许炎性细胞浸润，未见明显溃疡灶，损伤略轻于溃疡模型组；BHM高剂量组大鼠胃黏膜血管轻度扩张、充血，部分区域黏膜表层上皮细胞脱落，损伤轻于溃疡模型组，见图3。

a: 正常对照组

b: 模型组

c: BHM低剂量组

d: BHM高剂量组

e: 阳性对照组

图3应激胃溃疡实验各组大鼠胃组织病理图(HE×200)

2.3.2 BHM对吲哚美辛诱发胃溃疡模型大鼠胃病理组织学的影响 模型组大鼠胃黏膜充血，炎性细胞浸润，部分区域黏膜脱落，溃疡形成；BHM给药组大鼠胃黏膜血管轻度扩张、部分区域黏膜表层上皮细胞脱落，未见溃疡灶，见图4。

a: 模型组

b: BHM给药组

图4吲哚美辛诱发胃溃疡实验各组大鼠胃组织病理图(HE×200)

2.4BHM镇痛实验结果与模型组比较,BHM给药组小鼠潜伏期延长, 30 min扭体次数减少，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 BHM对醋酸致小鼠扭体反应的影响

注：与模型组比较，*P<0.05。

2.5BHM对小鼠足跖炎症肿胀的影响与模型组比较,BHM给药组小鼠足跖肿胀度减少轻，差异有统计学意义(P<0.05)，见表4。

表4 BHM对蛋清致小鼠足趾肿胀的影响

注：与模型组比较，*P<0.05。

3 讨论

精神紧张、应激压力性焦虑[6]和服用非甾体类解热药物是引起胃黏膜糜烂、胃溃疡的重要因素，根据胃溃疡的这2种主要发病机制，本实验成功建立了应激性和化学药物诱发的胃溃疡大鼠模型。鉴于近年来植物药对慢性疾病的化学预防成为研究热点，加之溃疡的高复发率特点[7]，本研究考察了BHM对胃溃疡的预防作用，结果表明大鼠预先灌胃给予BHM可减轻由于化学药物或应激刺激引起的溃疡，改善胃水肿和出血症状；镇痛实验和抗炎实验表明BHM具有抗炎镇痛作用。

BHM复方的抗溃疡、抗炎镇痛作用与其组方中的没食子酸、海螵鞘、黑种草子等物质的作用密不可分。有研究表明，没食子是多酚类物质，有抗氧化抗炎作用[8-9]，海螵蛸有中和胃酸、保护黏膜、收敛止血、清创等作用[10-11]，郑红[12]通过动物实验发现, 海螵蛸可调节胃黏膜组织中的一氧化氮含量, 加强胃黏膜的屏障功能,促进胃组织中前列腺素E2的合成, 加速溃疡的愈合, 清除氧自由基和减轻脂质过氧化反应, 并参与调节胃黏膜损伤的炎症反应。黑种草子具有抗氧化[13]、抗炎[14]、促进血管新生[15]等多方面药理作用。这些组方药物及其活性成分构成了BHM防治胃溃疡的物质基础。