冠心病患者血清Lp-PLA2与HCY检测及其与冠状动脉病变程度的相关性分析*

刘亚东，冯莉莉，王海晶，王丽萍，李永莉

(1.延安大学附属医院心脑血管病区检验科，陕西延安 716000；2.安康市汉滨区第二医院检验科，陕西安康 725021)

在我国居民疾病死因构成中，心血管疾病死亡占40%左右，高据各种疾病死亡之首，并呈逐年升高趋势，而冠心病(coronary heart disease，CHD)是导致该趋势的主要原因[1]，其中95%的CHD是由冠状动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)引起的[2]，但传统的危险因素(血脂异常、高血压、吸烟、肥胖、糖尿病等)不能完全解释其发病机制[3]。炎症介质是AS形成的重要因素[4]，脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)是一种血管特异性炎症因子，直接影响AS的形成[5]。同型半胱氨酸(homocysteine，HCY)是CHD的独立危险因素[6]，主要通过影响脂质代谢、刺激血管平滑肌细胞增殖及诱导血栓形成等方面参与AS形成[7～9]。本实验通过回顾性分析我院诊治的CHD病例，分析CHD患者血清HCY，Lp-PLA2水平与冠状动脉病变程度的关系。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取2017年1月～2018年5月延安大学附属医院收治的266例冠心病患者为实验组，其中男性161例，平均年龄57.3±8.5岁，女性105例，平均年龄61.1±11.6岁。纳入标准：①冠状动脉造影证实至少有一支冠状动脉狭窄；②病史资料及血清生化指标等理化资料完整者。选取同一时期在我院冠脉造影阴性的180例健康体检者为对照组，其中男性97例，平均年龄54.6±10.5岁，女性83例，平均年龄47.5±6.3岁。记录所有纳入者性别、年龄、糖尿病史、卒中病史、心肌梗死病史、吸烟史、饮酒史及HCY，Lp-PLA2，空腹血糖(FBG)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和脂蛋白(a)[Lp(a)]等指标。

1.2 仪器与试剂 Lp-PLA2测定使用贝克曼AU2700全自动生化分析仪和德赛试剂及配套校准品，HCY，FBG，TG，TC，LDL-C，HDL-C，Lp(a)测定使用贝克曼AU2700全自动生化分析仪和宁波美康试剂及配套校准品。所用项目均通过室间质评及性能验证，且当日室内质控在控。

1.3 方法

1.3.1 Gensini积分分组：采用标准方法进行经皮冠状动脉造影，冠状动脉狭窄程度采用Gensini评分定量评定[10]：Gensini低积分组(Gensini积分<14分)、Gensini中积分组(Gensini积分14～28分)和Gensini高积分组(Gensini积分>28分)三组[11]，比较各组之间HCY，Lp-PLA2水平的差异。

1.3.2 冠状动脉不同病变支数分组：根据冠状动脉病变支数分：冠状动脉1支病变组、冠状动脉2支病变组和冠状动脉3支及3支以上病变组三组，比较各组之间HCY，Lp-PLA2水平的差异。

1.3.3 实验室检测：所有纳入者均在临床治疗前采血测定血液学指标并记录。测定方法：使用促凝管采集清晨空腹血液5 ml，待标本凝集后以3 000 r/min离心10 min，检测血清HCY，TG，TC，LDL-C，HDL-C，Lp(a)，FPG和Lp-PLA2等水平，所有检测在2 h内完成。

2 结果

2.1 实验组和对照组一般资料比较 见表1。实验组与对照组吸烟史、饮酒史及HCY，Lp-PLA2，Lp(a) 水平差异均有统计学意义(t或χ2=7.78～18.75，均P<0.05)。

表1 实验组与对照组患者基线资料比较

2.2 Gensini积分组Lp(a)，HCY和Lp-PLA2水平比较 见表2。采用秩和检验比较Gensini低积分组、中积分组和高积分组Lp(a)，HCY，Lp-PLA2水平差异，三组HCY，Lp-PLA2水平差异有统计学意义(Z=5.81，15.25，均P<0.05)。进一步使用t检验对三组HCY，Lp-PLA2水平进行两两比较，结果三组HCY，Lp-PLA2水平由低到高依次为：Gensini低积分组

表2 Gensini积分组Lp(a)，HCY和Lp-PLA2水平比较

2.3 冠状动脉不同病变支数组Lp(a)，HCY和Lp-PLA2水平比较 见表3。

表3 冠状动脉不同病变支数组Lp(a)，HCY和Lp-PLA2水平比较

采用秩和检验比较冠状动脉1支病变组、冠状动脉2支病变组、冠状动脉3支及3支以上病变组Lp(a)，HCY，Lp-PLA2水平的差异，三组HCY，Lp-PLA2水平差异有统计学意义(Z=5.63，17.91，均P<0.05)，使用t检验对三组HCY，Lp-PLA2水平进行两两比较，结果Lp-PLA2水平由低到高依次为：冠状动脉1支病变组<冠状动脉2支病变组<冠状动脉3支及3支以上病变组，差异有统计学意义(t=5.43～16.57，均P<0.05)；冠状动脉1支病变组和冠状动脉2支病变组HCY水平差异无统计学意义(t=0.82，P=0.84)，但均小于冠状动脉3支及3支以上病变组，差异有统计学意义(t=14.18，13.42，均P<0.05)。

2.4 Gensini积分与Lp(a)，HCY，Lp-PLA2水平的相关性分析 见表4。采用Pearson法进行相关性分析，结果Gensini积分与HCY，Lp-PLA2水平呈显著正相关(r=0.991，0.454，均P<0.05)。

表4 实验组Gensini积分与Lp(a)，Lp-PLA2，HCY水平的相关性

2.5 Lp-PLA2与HCY水平相关性分析 实验组Lp-PLA2与HCY水平呈正相关(r=0.336，P<0.05)，对照组Lp-PLA2与HCY水平无相关性(r=0.062，P=0.586)。

3 讨论

Carson于1962年最早发现HCY尿症患者有更高的动静脉血栓发生率，以后陆续发现冠心病、全身性动脉硬化、肾功能衰竭等许多疾病与高HCY(HHCY)相关。而机体炎症变化被认为是诱发冠状动脉粥样硬化的主要危险因素，新型炎症介质Lp-PLA2更是受到广泛关注。为进一步研究血清HCY和Lp-PLA2水平与冠状动脉病变程度的关系，本实验通过实验组(冠心病患者)和对照组(健康体检者)一般资料比较，并将实验组分别按照Gensini积分分组和冠状动脉不同病变支数分组，分别比较各组内HCY和Lp-PLA2水平差异，发现随冠状动脉病变程度增加及冠状动脉病变支数增多，HCY和Lp-PLA2水平逐渐升高，与黄晖等[18，19]研究结果一致，且相关性分析显示冠状动脉病变程度与HCY和Lp-PLA2水平呈正相关，表明检测血清HCY和Lp-PLA2水平在一定程度上可以反映冠状动脉的病变程度。

新型炎症介质Lp-PLA2是由单核细胞、巨噬细胞、肥大细胞、T淋巴细胞等分泌的，又称血小板活化因子-乙酰水解酶(PAF-AH)。循环血液中约有80%的Lp-PLA2与LDL-C结合，剩余的主要与HDL-C结合。有学者认为Lp-PLA2具有抗动脉粥样硬化作用[12，13]：①可将血小板活化因子(PAF)水解使其失去活性，抑制炎症与血栓的形成。②活化的Lp-PLA2可水解血液循环中的氧化磷脂类物质，降低机体的免疫原性、保护细胞不受活性氧簇诱导的凋亡。③一部分循环中的Lp-PLA2与HDL结合为HDL-Lp-PLA2，具有抗炎和抑制动脉粥样硬化作用，从而抑制泡沫细胞的形成及降低巨噬细胞内ox Lp(a)，ox-LDL积累量，限制其转化为泡沫细胞。而更多的研究认为Lp-PLA2是一种血管特异性炎症标志物，与动脉粥样斑块形成密切相关[14～16]：①Lp-PLA2可水解氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)产生溶血磷脂酰胆碱(Lyso-PC)和氧化型脂肪酸(ox FFA)，ox FFA和Lyso-PC可使血管壁内皮细胞功能障碍，同时诱导血管内皮细胞表达黏附分子，使得LDL-C，T淋巴细胞及巨噬细胞进入内膜，起始AS的发展过程。②ox FFA和Lyso-PC还可促使巨噬细胞表达促炎介质肿瘤坏死因子 α(TNF-α)，白细胞介素-6(IL-6)等，激活该区域炎症反应、产生泡沫细胞、形成坏死核、促使斑块不稳定。HCY是蛋氨酸代谢产生的一种非蛋白质含硫蛋氨酸，也称2-氨基-4-巯基丁酸，其代谢主要有两条途径：①在胱硫醚β合成酶的作用下需Vit B6辅助，与丝氨酸结合生成胱硫醚。②在蛋氨酸合成酶的作用下再甲基化生成甲硫氨酸。任意一条代谢途径发生障碍均可使HCY水平升高，形成HHCY血症，致CHD的机制为：①HHCY可降低一氧化氮(NO)对血管内皮细胞的保护作用及增加血管壁厚度，损伤血管内皮细胞及平滑肌细胞。②HHCY通过损伤内皮细胞使白细胞介素-8、单核细胞趋化蛋白-1、细胞黏附分子-1 (CAM-1)等分泌增加，上调趋化及黏附分子，促使T细胞及单核细胞进入血管病变区域，促使炎症反应。③HHCY使细胞内活性氧簇 (ROS) 增加，过核因子-κB(NF-κB)和Toll样受体(TLR4)过表达，还可抑制环氧化酶(COX)的活性和COX-17的表达，促使内皮细胞凋亡。④ HCY破坏谷胱甘肽过氧化物酶(GP)和超氧化物歧化酶(SOD)，进一步增加HCY诱导的氧化应激。⑤激活Ⅴ，Ⅹ，Ⅻ等凝血因子并抑制前列腺素和肝素合成，使机体处于血栓前状态。⑥使机体DNA去甲基化水平降低而致病[17]。本实验还发现CHD患者血清HCY和Lp-PLA2水平呈正相关。但是这种关系对CHD患者冠状动脉病变程度的影响还需进一步研究。

综上所述，HCY和Lp-PLA2是CHD的危险因素，检测CHD患者血清HCY和Lp-PLA2水平可反映冠状动脉的病变程度。