养阴通里方剂预防术后粘连性肠梗阻药效学研究

邹丽园，杨振，倪赛宏，傅水莲，付萌，何丽明，刘玉梅※，洪铁※

（1.吉林大学中日联谊医院，长春 130000；2.吉林农业大学，长春 130000；3.吉林大学药学院，长春 130000）

术后粘连性肠梗阻是临床非常常见的一种术后并发症，是指因腹部或非腹部手术而引起的术后胃肠动力障碍性疾病，发病率较高。因此，临床急需研制一种能预防术后粘连性肠梗阻的药物[1～3]。我国于20世纪 70年代起应用叶舜宾教授研制的养阴通里方剂，大量临床实践证实，其对预防术后粘连性肠梗阻具有显著疗效。该方由大黄、莱菔子、赤芍、木香等4味中药构成，有破阻化瘀、消积、止痛的功效[4]。本研究采用擦拭法构建大鼠粘连性肠梗阻模型及小鼠离体肠管培养，探讨其作用机制。

1 动物、材料及仪器

1.1 动物

清洁级SD大鼠69只，体重180g～220g，昆明小鼠20只，18g～20g，购自辽宁长生生物技术有限公司，生产许可证号：SCXK（辽）2015-0001。

1.2 材料与仪器

养阴通里药液、硫酸阿托品注射液（上海浦津林州制药有限公司）；BL-420E+生物技能实验系统（成都泰盟科技有限公司）；肌张力换能器（JH-2，50g，北京航天医学工程研究所）；超级恒温器（SHC-501，上海沪粤明科学仪器有限公司）；平滑肌槽（ML110，ADInstruments公司）；全自动血流变快测仪（FASCO-3010，重庆大学维多生物工程研究所）。

2 方法

2.1 体内实验

2.1.1 实验分组 实验分为正常组（Normal group，N）、假手术组（Sham operated group，SO）、模型组（Model group，M）、养阴通里高剂量组（Yangyintongli high does group，YHD）、养阴通里中剂量组（Yangyintongli medium does group，YMD）、养阴通里低剂量组（Yangyintongli low does group，YLD）、莫沙必利组（Mosapride group，MO）、地塞米松组（Dexamethasone group，D）。养阴通里各剂量组每组9只大鼠，其余各组每组8只。养阴通里高、中、低剂量组给药剂量分别为 3.150 0g/kg、1.575 0g/kg、0.787 5g/kg（按成人处方日用量 17.500 0g/70kg计算），莫沙必利组1.35mg/kg，地塞米松组10mg/kg。各组大鼠每日灌胃给药1次，于造模前连续给药5d，造模后给药2d。

2.1.2 造模 根据文献[5]报道方法造模。大鼠术前禁食不禁水18h，除正常组外，其余各组大鼠均以10%水合氯醛（0.3mL/100g）腹腔注射麻醉，腹部备皮后碘伏消毒铺巾。于下腹部正中线做一个长约3cm的切口，取出全部小肠外置于湿纱布上，用湿棉球由小肠末端自下而上反复擦拭肠管6次。然后将全部肠管放回，关腹。其中假手术组只打开腹腔，立即缝合关闭。全部大鼠于造模48h后行腹部立位X线检查。

2.1.3 对胃肠动力的影响 上述各组大鼠于造模后末次给药2h后，灌胃给予0.04%酚红溶液（含10%明胶）2mL，15min后，腹腔注射水合氯醛麻醉，开腹观察肠管形态并对小肠粘连程度进行评级。取出胃和小肠（幽门至回盲部），小肠平铺于湿滑平面上，测量小肠全长及酚红在小肠的推进距离。将胃沿胃大弯剪开，于5%NaOH中充分洗净，取5mL，3 000r/min离心10min，取上清液，于560nm测其吸光度值OD；另取2只正常大鼠，给予酚红后立即处死，按照上述方法测其吸光度值，其均值作为胃排空速度的标准。胃排空率=（1-实验组OD/标准组OD）100%。

2.1.4 全血及血浆粘度 各组大鼠行腹主动脉取血，取3.6mL全血置于含0.4mL肝素的真空管中，测定全血粘度，3 000r/min离心10min，取上层血浆测定血浆粘度。

2.1.5 肠管形态及粘连程度结果 观察各组大鼠肠管形态，并参考Nair[6]制定的5级分类法进行粘连程度分级，统计每组各级粘连程度大鼠数量。0级：完全无粘连；Ⅰ级：内脏间或内脏与腹壁间 1条粘连带；Ⅱ级：内脏间或内脏与腹壁间二条粘连带；Ⅲ级：多于2条粘连带，而内脏未直接粘连到腹壁；Ⅳ级：内脏直接粘连到腹壁，而不管粘连多少。

2.2 体外实验

2.2.1 实验分组 考查不同浓度养阴通里药液对离体肠管收缩能力的影响，实验分为台氏液对照组、养阴通里高剂量组（1mg/mL）、养阴通里中剂量组（0.50mg/mL）、养阴通里低剂量组（0.25mg/mL）；考查不同浓度养阴通里药液对阿托品抑制作用的影响，实验分为台氏液对照组、阿托品组（A）（0.10mg/mL）、阿托品+养阴通里高剂量组（A+YHD）、阿托品+养阴通里中剂量组（A+YMD）、阿托品+养阴通里低剂量组（A+YLD）。

2.2.2 不同浓度养阴通里药液对离体肠管收缩能力的影响 取小鼠幽门以下1cm～5cm处肠管，用台氏液将内容物冲洗干净，剪成1cm～2cm数段，肠段上端接肌张力换能器，下端固定在金属钩上置于装满台氏液的恒温平滑肌浴槽内，并通入 O2+CO2混合氧气（95∶5），待肠管自发收缩活动平稳后，记录肠管正常舒缩曲线，然后向浴槽中滴加0.25mL养阴通里各浓度药液或台氏液，继续描记舒缩曲线。

2.2.3 不同浓度养阴通里药液对阿托品抑制作用的影响 离体肠管平滑肌稳定后，先向浴槽内加入阿托品，描记舒缩曲线5min，然后用台氏液冲洗3遍，待肠管收缩稳定后先加入阿托品，待其作用明显时再分别加入上述养阴通里各浓度药液，继续记录肠管舒缩曲线。

计算给药前后1min内肠管收缩幅度、频率及运动指数差值的平均值和标准差。肠的运动指数=肠的收缩频率 收缩幅度。

2.3 统计学分析

3 结果与分析

3.1 体内实验

3.1.1 腹部立位X线检查结果 X线检查结果显示，正常组与假手术组大鼠腹腔未见异常；模型组大鼠出现明显肠梗阻征象，肠管有大量积气、积液，可见气液平面；养阴通里各给药组大鼠积气、积液明显减少，高剂量效果为最好，中剂量组次之；阳性药莫沙必利与地塞米松组积气、积液在一定程度上减少，但治疗效果次于养阴通里给药组。见图1。

3.1.2 对各组大鼠胃肠动力的影响 实验结果显示，与假手术组相比，模型组胃排空率与小肠推进率明显降低（P＜0.01，P＜0.01）；与模型组相比，养阴通里高剂量组胃排空率与小肠推进率显著提高（P＜0.01，P＜0.01）；中剂量组胃排空率与小肠推进率明显提高（P＜0.05，P＜0.05）；低剂量组胃排空率明显提高（P＜0.05），但对于小肠推进率并无影响。结果见表1。

表1 各组大鼠胃排空率及小肠推进率Table 1 The gastric emptying rate and small intestinal propulsive rate of rats in each group (%)

3.1.3 对各组大鼠血粘度的影响 各组大鼠全血及 血浆粘度无统计学差异（P＞0.05）。见表2。

表2 各组大鼠全血及血浆粘度Table 2 Whole blood and plasma viscosity of rats in each group (mpas)

3.1.4 各组大鼠小肠粘连程度 实验结果显示，假手术组并未形成肠梗阻；模型组大鼠小肠粘连程度较重，大部分处于Ⅲ级粘连程度，小部分处于Ⅳ级粘连程度；养阴通里各给药组与模型组相比，粘连程度明显降低，大部分处于Ⅰ级、Ⅱ级粘连程度，小部分处于Ⅲ级粘连程度。各级粘连程度示意图见图2，各组大鼠粘连程度统计结果见表3。

图2 各级粘连程度示意图Fig.2 Schematic view of the degree of adhesion levels

表3 各组大鼠粘连程度统计表Table 3 Statistics of adhesion degree of rats in each group (a)

3.2 体外实验结果

1mg/mL、0.5mg/mL的养阴通里给药组能明显增加体外肠管的收缩幅度，并降低振动频率，且能够逆转阿托品对肠道蠕动的抑制作用。见图3、图4。

图3 不同浓度养阴通里药液对小鼠离体肠管收缩能力的影响Fig.3 Effects of different concentrations of Yangyintongli liquid on contractility of isolated intestine in mice

图4 不同浓度养阴通里药液对阿托品抑制作用的影响Fig.4 Effects of different concentrations of YangyinTongli liquid on atropine inhibition

4 讨论

术后肠梗阻是一种因手术造成的一种胃肠功能障碍性并发症，主要表现为术后腹痛、腹胀、肛门不排气、不能进食、甚至恶心呕吐等症状。它不能单纯地等同于机械性肠梗阻或术后麻痹性肠梗阻，而是指术后胃肠道所经历的一个功能障碍阶段[7]。

养阴通里方剂由大黄、莱菔子、赤芍、木香等4味中药构成。其中大黄攻下为主药，辅之以行气通滞之木香，化积行滞之莱菔子为辅。方中尚配以赤芍祛瘀止痛为佐，减轻峻烈攻下行气破阻药物作用下产生的不适感觉，故而4药配伍即可使梗阻得开，又不致由于药力太强而致患者痛苦。所以，4药配合共奏，有破阻化瘀、消积、止痛之功。

本研究结果显示，养阴通里可以明显提高大鼠胃排空率及小肠推进率，由此减短术后胃肠麻痹期，使胃肠快速恢复蠕动；在体外能够明显提高离体肠管的收缩幅度，并降低振动频率，利于术后肠道功能的恢复且不影响伤口愈合。此外，养阴通里可以逆转阿托品对于肠道平滑肌的抑制作用，推测其作用机制可能是通过刺激肠道平滑肌上的M受体。