精液与附睾结节穿刺标本结核杆菌DNA检测在附睾结核诊断中的价值

左建强,包建成,王惠泉,杨跃军,郭子臣,徐伟民,冯长梅

1.包头医学院第三附属医院泌尿外科,包头 014030; 2.包头医学院第三附属医院检验科,包头 014030

附睾结核也被称为结核性附睾炎,为男性生殖系统结核中最常见疾病。晚期附睾结核的诊断一般相对容易,常伴有典型的附睾硬结、皮肤粘连、窦道及串珠样输精管病变。但早期和急性发作的附睾结核非常容易误诊。早期附睾结核在临床应主要与慢性附睾炎、淋菌性附睾炎、阴囊丝虫病相鉴别,然而临床工作中鉴别诊断常存在一定难度,导致大量患者治疗延误。包头医学院第三附属医院泌尿外科自2010年1月—2018年2月对就诊的42例附睾结节患者,采取精液和附睾穿刺标本分别进行聚合酶链式反应(PCR)荧光定量方法检测结核杆菌DNA(TB-DNA),探讨其对于提高附睾结核诊断率的临床应用价值。

1 材料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析包头医学院第三附属医院泌尿外科2010年1月—2018年2月诊治的42例附睾结节患者(单侧53例,双侧3例),年龄18～65岁,平均(32±8.79)岁。阴囊皮肤与附睾结节粘连者11例,输精管呈现串珠样改变3例,同时查出肺结核7例。合并肾结核2例,32例患者临床表现为无痛性非特异性结节;其中16例患者有附睾隐痛或阴囊坠胀不适感。

1.2 测定方法

1.2.1 精液标本获取

42例患者精液提取方法:患者5～7 d禁止同房,使用一次性无菌尿杯,通过手淫的方式将精液标本留取于容器内,严禁使用避孕套内精液,留取后立即(<15 min)送检。获取的精液一部分行结核杆菌DNA检测,另一部分涂片查抗酸杆菌。

1.2.2 附睾穿刺标本获取

42例患者附睾结节穿刺方法严格执行外科无菌穿刺术,采用针吸细胞学检查,穿刺标本立即送实验室,一部分行结核杆菌DNA检测,另一部分涂片查抗酸杆菌。阴囊穿刺部位消毒包扎按压10 min。

1.2.3 结核杆菌DNA检测

采用中山大学达安基因股份有限公司出品的结核分枝杆菌核酸检测试剂盒(荧光法)。严格按说明书操作,提取样本后在实时荧光定量PCR仪DA7600上进行扩增,实验数据在相应软件上分析,同时进行标准品和质控品的检测,保证实验数据真实可靠。

1.2.4 涂片检测

精液标本与穿刺标本均匀涂片,行结核杆菌抗酸染色。采用珠海贝索结核菌染色液,产品批号416032,严格按说明书操作,显微镜下可见红色分枝杆菌为阳性涂片。

1.3 统计学方法

采用SPSS 15.0软件。两组标本间阳性率比较采用t检验,以a=0.05作为检验水准。

2 结果

精液标本行PCR荧光定量检测,结核杆菌DNA阳性率为28.57%(12例)。附睾标本行PCR荧光定量检测,结核杆菌DNA阳性率为42.86%(18例),两组比较差异显著(t=6.482,<0.001);精液标本涂片TB镜检阳性率为7.14%(3例),附睾穿刺标本涂片TB镜检阳性率为11.90%(5例),两组比较无差异(t=-2.684,P>0.05)。附睾穿刺组织查TB见图1、精液涂片查TB见图2。

图1 附睾组织涂片(HE×100)Fig.1 Epididymal smear(HE×100)

图2 精液涂片(HE×400)

3 讨论

在临床工作中,最常见的男性生殖系统结核是附睾结核,也有人将附睾结核归为泌尿系结核的一部分。附睾结核常伴有前列腺结核、精囊结核、肾结核或者肺结核。附睾结核患者主要通过血行感染途径患病[1-2]。结核菌也可以由肾、输尿管、膀胱、尿道,播散到前列腺、精囊,最后逆行感染到附睾,病变常出现在附睾尾部。附睾结核在临床中导致的后遗症不容忽视,主要是导致附睾组织内附睾管和附睾外近段输精管的不全或完全梗阻,进而出现少精或无精,最后导致精液质量下降,引起男性不育,严重病例可以导致整个附睾的干酪样坏死[3]。所以附睾结核的诊断显得尤为重要,对于一些输精管串珠样改变,或者合并附睾化脓感染、窦道形成等特异性表现者,诊断并不困难,但对于一些怀疑附睾结核,并伴有非特异性附睾结节患者,早期诊断在治疗中显得具有非常重要的价值[4-5]。诊断附睾结核的时候,如果有比较典型的临床特征,如附睾硬结、皮肤形成粘连、有窦道形成、发现串珠样的输精管病变特征,诊断完全可以确定。但早期和急性发作的附睾结核比较容易误诊。早期的附睾结核在临床上应与慢性附睾炎进行鉴别,慢性附睾炎疼痛一般相对比较明显,病史中常常有急性发作及反复发作史,慢性附睾炎的附睾肿块一般没有附睾结核的附睾肿物硬、也没有附睾结核的肿物大,在临床上很少形成局限性硬结,一般不会形成如结核特有的窦道,亦不会发生皮肤粘连,输精管的串珠样改变在附睾炎中一般也不会出现[6]。在临床上,淋菌性附睾炎患者,绝大多数既往有淋球菌的感染病史,临床发病比较急,在尿道分泌物中可查到细胞内革兰阴性双球菌,多聚酶链反应可查到尿道分泌物中淋球菌特有的氨基酸序列[7]。目前对于泌尿系结核的实验室诊断可以通过尿检查结核杆菌、尿液结核杆菌PCR检测等,检查手段比较多,但对于附睾结核,临床中尚无定型的实验室检查手段[8]。在泌尿系统结核诊断中,涂片检查并无特异性,抗酸染色结果并不可靠,尿结核菌DNA检测对结核菌具有较高的特异性及敏感性,但存在敏感性较低,特异性不高等特点,容易出现假阳性或者假阴性[9-10]。

本研究结果显示,结核杆菌DNA检测精液标本阳性率28.57%、附睾穿刺标本阳性率42.86%,两者比较差异有统计学意义。精液标本与附睾穿刺标本结核杆菌涂片检测阳性率比较差异无统计意义。

综上所述,在临床诊疗工作中,对可疑附睾结核的附睾结节患者行精液和附睾穿刺标本结核杆菌DNA检测,对于提高早期诊断率具有重要意义;为避免延误治疗,尽早明确诊断,两种方法可同时进行。