2017年山东省肉鸭大肠杆菌分离及敏感药物筛选

孙法良

（齐鲁动物保健品有限公司，山东 济南 250100）

鸭大肠杆菌病是由某些致病性大肠杆菌引起的局部或全身性感染的疾病，临床上常表现心包炎、肝周炎、气囊炎、输卵管炎、腹膜炎、脑膜炎等多种病变。肉鸭由于生长速度快、棚舍简陋、环境卫生差、饲养密度大、通风不良等不良因素导致后期发病率和死亡率较高，用药物控制越来越难，究其原因是缺乏科学用药，前期频繁药物导致耐药严重，后期用药疗效不佳，损失惨重。笔者把2017年送检的114份疑似肉鸭大肠杆菌病料进行细菌分离，分离出96株大肠杆菌，并作药敏试验，找出敏感药物，给大家科学用药提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病料 2017年采自潍坊、临沂、济宁、聊城、菏泽、德州、泰安7个地市114个肉鸭场疑似包心包肝的病死鸭。无菌采集病死鸭的心脏、肝脏、脾脏等病料，用于细菌分离。

1.1.2 培养基与试剂 鲜血琼脂培养基、麦康凯培养基、普通琼脂培养基，购自青岛海博生物科技有限公司；抗菌药物药敏片，购自杭州微生物试剂有限公司。

1.2 方法

1.2.1 大肠杆菌分离培养 无菌采集有明显包心包肝的病死鸭的肝脏和脾脏，接种于鲜血普通琼脂平板，置37℃恒温箱内，培养24h，观察菌落形态；再从鲜血琼脂平板上挑取单个光滑、圆润、隆起、乳白色、边缘整齐的中等偏大菌落，接种于麦康凯琼脂平板上，置 37℃恒温箱内，培养 24h，观察菌落形态；若在麦康凯琼脂平板上长出红色菌落，即可确定为大肠杆菌。

1.2.2 药敏试验 无菌条件下挑取麦康凯琼脂平板上的红色菌落，接种于普通琼脂培养基中，37℃震荡培养16h。取细菌培养液100μl均匀涂布于普通琼脂平板上，将庆大霉素、链霉素、环丙沙星、恩诺沙星、丁胺卡那、壮观霉素、新霉素、强力霉素、红霉素、林可霉素、阿莫西林、氟苯尼考、磺胺间甲氧嘧啶、多粘菌素、头孢氨苄等15种药敏片贴到涂好菌液的平板上，做好标记，置37℃恒温箱内，培养12h，测量抑菌圈直径大小，判断药物敏感度。

2 结果

2.1 大肠杆菌分离培养结果 从114份包心包肝病死鸭病料中分离到96株大肠杆菌，分离率高达84.2%。分离到的菌株在麦康凯琼脂平板上形成光滑、圆润、凸起、边缘整齐的中等大小红色菌落，确定为大肠杆菌。

2.2 药敏试验结果 对分离到96株大肠杆菌作药敏试验，测量得到抑菌圈直径与药敏试验判定标准进行比对。试验结果见表1。所测得15种抗菌药中，敏感药物有丁胺卡那（53.1%）、庆大霉素（50.0%）、新霉素（50.0%）、壮观霉素（34.4%）、头孢氨苄 （31.3%）、环丙沙星 （28.1%）、链霉素（28.1%）、阿莫西林（25.0%）；耐药率较高药物有磺胺间甲氧嘧啶（96.9%）、林可霉素（93.8%）、氟苯尼考（68.8%）、阿莫西林（50.0%）、强力霉素（46.9%）、红霉素（46.9%）、恩诺沙星（40.6%）。

表1 抗菌药物药敏试验结果

3 分析

从114份疑似病料中分离到96株大肠杆菌，分离率高达84.2%，说明大肠杆菌在肉鸭上感染比较普遍。自然界中，大肠杆菌分布广泛，各日龄的肉鸭都能够感染，但多在25日龄之后发病率和死亡率较高，主要是饲养后期鸭舍环境卫生更差、舍内更潮湿、通风更差、有害气体刺激更严重等各种不良因素的影响致使机体抵抗力下降而发病。另外其它病原微生物感染，如流感病毒、呼肠孤病毒，导致机体免疫抑制，机体抵抗力下降，继发大肠杆菌。

在肉鸭养殖中预防大肠杆菌的发生，关键还是要把养殖最基本的东西做好，就是加强饲养管理和搞好环境卫生。临床上养殖环境好，饲养管理水平高的肉鸭场发病率就很少，为了养殖效益，要确保肉鸭吃好、喝好、住好、呼吸好，最大限度减少各种不良应激。

鸭大肠杆菌极易产生耐药性，肉鸭养殖前几年滥用药物比较普遍，产生耐药严重，很难筛选出敏感药物，最近两年由于食品安全问题，限制抗菌药物的使用，敏感药物开始增多，这与早期报道不一致。目前可选择敏感药物有丁胺卡那、庆大霉素、新霉素、壮观霉素、头孢氨苄，临床上可选择2～3种敏感药物进行联合、轮换、交替使用进行早期预防和后期发病的治疗，避免同一种药物长期使用。