二麻汤对自发性高血压大鼠血压及血管活性物质的影响*

闫玉冰 王 磊 杨博鸿 柴欣楼

（北京中医药大学，北京 100000）

高血压病是我国最常见的心血管疾病，在我国18岁以上的成年人的发病率高达25.2%［1］，严重影响了人们的生命财产安全，但尚未引起人们足够的重视。在一项针对中国170万基层人群的疾病筛查中［1］，发现超过81%的高血压病患者只服用一种降压药物，且缺乏相应的血压管理，尤其是在西部和农村地区。高血压病除了可能引发的种种并发症以外，可能还会引发精神神经症状。相关研究表明［2］，高血压病的发病与慢性情绪障碍密切相关，且抑郁焦虑在高血压人群中的发生率明显高于非高血压人群［3］，可见高血压的管理和情绪调节有着极为重要的意义，而中医药治疗情志疾病的功效不可小觑，从这个角度来讲，中医药治疗具有无可比拟的优势。临床研究表明，中西药合用，既可以发挥西药起效快的长处，又可以通过减轻用药量实现减轻副作用的目的［4］。本实验以二麻汤为研究对象，以稳定的高血压大鼠病证结合动物模型［5］为基础，以符合现代中医临床特点的病证结合诊疗模式为评价标准，评价二麻汤对SHR的降压作用及初步探究其降压的作用机理。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物 选用SPF级、11周龄、雄性高血压对照模型（WKY）大鼠10只，自发性高血压（SHR）大鼠40只，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，证书号：SCXK（京）2012-0001。饲养于北京中医药大学科学实验动物中心SPF级环境。

1.2 试药与仪器 1）药物。二麻汤：天麻10 g，罗布麻10 g（免煎颗粒，北京康仁堂药业有限公司统一提供，生产批号：201712019）。阳性对照药：硝苯地平缓释片，10 mg/片（成都地奥集团药业股份有限公司，国药准字H10930145）。2）试剂。大鼠血管紧张素Ⅱ（ANGⅡ）ELISA试剂盒 （批号：201609014.QS41752）、 大鼠去甲肾上腺素 （NE）ELISA试剂盒 （批号：201606024.RGB-60075R）、大鼠内皮素（ET）ELISA 试剂盒（批号：201706016.QS42101）、大鼠一氧化氮（NO）ELISA 试剂盒（批号：201606024.qs41893）、大鼠降钙素基因相关肽（CGRP）ELISA 试剂盒（批号：201606024.E02C0744）、大鼠血栓素B2（TXB2）酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒（批号：201606024.QS42057）。3）仪器：DSWY-1 型大鼠无创尾动脉测压仪（成都仪器厂）；ZH-SZ型平衡旋转仪（淮北正华生物仪器设备有限公司）；动物行为记录分析系统（EthoVision 3.1，Noldus荷兰）；Sartorius-SECURA213-1CN型电子天平 （上海速展计量仪器有限公司）；BIOBASE TG-18W型高速离心机（济南来宝医疗器械有限公司）；全自动多功能酶标仪（MULTISKAN MK3，Thermo，USA）；MINI shaker（MH-1，kylin-Bell Lab Instruments QILINBEIER）。

1.3 实验分组 11周龄SHR与WKY大鼠适应性喂养1周，12周龄测量血压基线、采集宏观表征和行为学试验适应性训练后进行证候属性判别，均属肝火亢盛证。随机将40只高血压大鼠分为4组，分别为模型组、阳性药组、二麻汤1组、二麻汤2组；WKY大鼠10只，作为正常组。

1.4 给药方法 高血压大鼠14周起灌胃给药，每日1次，连续用药5周，低剂量灌胃相当于60 kg成人等效剂量的6倍；灌胃体积10 mL/kg，高剂量相当于低剂量的9倍；依据二麻汤（20 g/d）一日成人用量进行折算：二麻汤1组予二麻汤高剂量为6 g/（kg·d），二麻汤2组予二麻汤低剂量为0.67 g/（kg·d）。硝苯地平缓释片生药含量为0.002 g/（kg·d）；正常组与模型组分别灌胃等体积的去离子水10 mL。每周给大鼠称体质量1次，并适时调整给药剂量。

1.5 观察指标 治疗前和治疗1～5周后，检测大鼠以下指标。1）一般情况，测量大鼠体质量、收缩压。2）血压测量。应用DSWY-1型大鼠无创尾动脉测压仪测量大鼠尾动脉收缩压（SBP）。测量过程完全严格按照血压计操作手册规范进行。3）旋转耐受实验。将大鼠置于平衡旋转仪旋转平台上，设置转速为60 r/min，记录大鼠从开始旋转到跌下平台的时长，若超过2 min仍不跌下，则终止测试，该只大鼠的旋转耐受时间记录为120 s。4）易激惹程度评分［6］。 5）理化指标：ELISA 法检测血清中 ANGⅡ、NE、ET、NO、CGRP、TXB2 水平。

1.6 统计学处理 应用SPSS20.0统计软件。计量资料以（x±s）表示，符合正态分布且方差齐的数据比较差异性用方差分析（ANOVA）；数据不符合正态分布或方差不齐使用非参数检验的方法 比较组间差异，两两比较采用最小显著差值法（LSD）。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组大鼠给药前后易激惹程度评分比较 见表1。模型组易激惹程度明显高于正常组（P＜0.05）；阳性药组大鼠给药后易激惹程度较给药前降低（P＜0.05）；与模型组比较，二麻汤1组、二麻汤2组易激惹程度随给药时间的延长而降幅增大，相比较而言，二麻汤1组的易激惹程度降低幅度更大；给药4周后，二麻汤2组易激惹程度才开始明显减轻（P＜0.05）。

2.2 各组大鼠给药前后体质量比较 见表2。各组随着给药时间的延长，体质量均有不同程度的增加，正常组大鼠的体质量最大；同一给药时间不同组别之间的体质量比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

表1 各组大鼠给药前后易激惹程度评分比较（分，x±s）

表2 各组大鼠给药前后体质量比较（g，x±s）

2.3 各组大鼠给药前后各时间段收缩压比较 见表3。正常组和模型组的收缩压随周龄增长而增加；自给药3周后起，阳性药组、二麻汤1组、二麻汤2组与模型组比较，随给药时间增长均有较大程度地降压或抑制血压升高的作用（P＜0.01）；其中阳性药组降压作用优于其他药物干预组（P＜0.001）。二麻汤1组优于二麻汤2组，即有量效关系。

表3 各组大鼠给药前后各时间段收缩压比较（mmHg，x±s）

2.4 各组大鼠给药前后各时间段旋转耐受时间比较见表4。随着给药时间增长，正常组旋转耐受时间无明显变化；与模型组比较，阳性药组随给药时间延长旋转耐受时间有所增加，但幅度较小且差异无统计学意义（P＞0.05）；与模型组比较，自给药3周后起二麻汤1组、二麻汤2组随给药时间的延长旋转耐受时间均有不同程度地增加（P＜0.05）；且二麻汤1组的旋转耐受时间增加显著（P＜0.01）。

表4 各组大鼠给药前后各时间段旋转耐受时间比较（s，x±s）

2.5 各组大鼠理化指标比较 见表5。与正常组比较，模型组血清ANGⅡ、NE、ET、TXB2的水平高于正常组（P＜0.001）；与模型组比较，阳性药组、二麻汤1组、二麻汤2组血清ANGⅡ、NE、ET、TXB2水平均低于模型组（P＜0.05），二麻汤2组血清ANGⅡ与模型组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。与正常组比较，模型组血清CGRP的水平低于正常组（P＜0.001）；与模型组比较，阳性药组、二麻汤1组、二麻汤2组血清CGRP浓度均有高于模型组的趋势；其中二麻汤1组血清CGRP水平高于模型组 （P＜0.05）；二麻汤2组血清CGRP水平高于模型组但无统计学意义（P＞0.05）。与正常组比较，模型组与正常组血清NO水平，差异无统计学意义（P＞0.05）；阳性药组、二麻汤1组、二麻汤2组与模型组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

表 5 各组大鼠血清 ANGⅡ、NE、ET、TXB2水平比较（x±s）

3 讨 论

天麻，味甘性平，归肝经，始见于《神农本草经》，具有平肝息风、祛风止痛之功效，现代药理研究表明，其具有降压、镇静、扩血管等多种作用［7-8］，临床应用比较广泛；罗布麻，味甘苦性凉，归肝经，始见于《救荒本草》，具有平抑肝阳、清热利尿之功效，现代药理研究表明罗布麻叶中降压的有效成分主要是榭皮素、总黄酮和碳水化合物［9］，具有降压、抗抑郁、调脂、改善眩晕、头痛症状等多种作用［10-11］，近年来相关的研究日益增多。两者药性均较和缓，一润一燥，阴阳共济，同入肝经，效宏而力专，临床上常常配伍使用，治疗高血压效果良好。截止到目前，高血压的具体机制尚未完全阐明，很多因素参与其中，各种因子的作用亦不容忽视。ANGⅡ可直接使小动脉平滑肌收缩、外周血管阻力增加，继而交感神经的活性增强，醛固酮分泌水平升高，从而体内存在水钠潴留，最终导致血压升高［12］。原发性高血压发病与交感神经系统活动性增强有关，文献报道血清中NE水平在一定程度上能定量反映交感神经系统的活性，NE浓度越高，说明交感神经的兴奋性越强［13］，可以在一定程度上反映有无高血压的发病趋势；ET是目前已知的作用最强烈且效力维持时间最久的收缩血管的因子，其主要成分为活性多肽，由血管内皮细胞分泌，合成或降解过程的失衡会导致异常的血管紧张度升高，进而引起外周阻力改变，使血压增高。ET对绝大多数种属各异的动、静脉和微血管的体内和离体实验都有强烈而持久的收缩作用，其中对动脉的收缩作用更强［14］，血管的这种变化可能是长期性血压调节的一个重要机制。NO是一种扩血管物质，主要由内皮细胞产生，能降低全身平均动脉压，对维护血管舒张和收缩的功能，稳定血压改善血管弹性具有积极意义［15］。NO和ET的失调在高血压病的全过程中都起着非常重要的作用。与ET的作用刚好相反，CGRP是目前已知的作用最强烈的内源性舒血管活性多肽，且CGRP对ET具有拮抗作用，一旦CGRP含量降低，拮抗作用就会相应减弱，ET使血管收缩，从而造成血压升高［16］。TXA2是血小板花生四烯酸（ARA）的代谢产物，具有强烈的收缩血管和促血小板聚集作用［17］，但其生物半衰期仅30 s，迅速转化为TXB2，因此常以其代谢产物TXB2反映其浓度。

以上实验结果表明，天麻-罗布麻二麻汤具有显著的降压作用，作用机理可能与降低血清中ANGⅡ、NE、ET含量，增加血清中CGRP含量相关，且存在量效关系。各组血清NO无明显差异，提示硝苯地平及二麻汤的降压机制可能与改变NO的含量无关。随着给药时间的延长，二麻汤组大鼠旋转耐受时间、易激惹程度评分亦有不同程度的改善，说明不仅在血压指标上有明显效果，在改善眩晕、易怒等症状的方面效果也收效良好［18］，这是一般降压药物所不具备的，凸显了中药的独特优势，值得在临床上深入研究。