急性脑梗死伴颈动脉粥样硬化患者血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平变化及意义

曾芳彦，彭夏培，肖敏，金钱倩，罗涛

(华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院，武汉430000)

急性脑梗死是由脑组织局部血液供应突然减少或者停止，引起脑组织缺血、缺氧而致组织软化、坏死所致，常伴有不同程度的神经功能缺损[1]。该病具有起病急、病情凶险、致残率和致死率高的特点。颈动脉粥样硬化是引起急性脑梗死的重要病因，粥样硬化斑块不稳定或者斑块破裂阻塞血管腔，使动脉血流量明显减少，最终引发急性脑梗死[2]。载脂蛋白A1(apoA-1)由243个氨基酸残基组成，是高密度脂蛋白的主要组成部分。apoA-1具有抗炎、抗动脉粥样硬化的功能[3]。抗载脂蛋白A1抗体(抗apoA-1 IgG)是apoA-1的自身抗体，可抑制apoA-1功能而引起高密度脂蛋白失调，进而参与动脉粥样硬化的发生发展。研究发现，抗apoA-1 IgG通过介导动脉粥样硬化而参与心血管疾病的发生发展[4]。基质金属蛋白酶9(MMP-9)属于基质金属蛋白酶家族成员，是可降解细胞外基质的锌依赖性蛋白酶。研究显示，MMP-9在动脉粥样硬化斑块的形成及破裂过程中发挥重要作用[5]。本研究通过检测血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平，探讨二者在急性脑梗死患者颈动脉硬化发病中的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集2016年9月～2018年3月本院神经内科收治的急性脑梗死患者100例，纳入标准：①CT或MRI检查证实为急性脑梗死，并符合《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2014》中关于急性脑梗死的诊断标准[6]；②首次发病，且发病至入院时间<1周。排除标准：①心功能不全；②肝、肾功能障碍；③急、慢性炎症性疾病；④血液系统疾病；⑤自身免疫性疾病；⑥恶性肿瘤；⑦2周内有创伤史或行外科手术；⑧入组前1个月内服用过免疫抑制剂、类激素类药物等。根据彩色多普勒超声检查的颈动脉内-中膜厚度(IMT)将患者分为颈动脉粥样硬化组(IMT≥1.00 mm，n=72)和颈动脉正常组(IMT<1.00 mm，n=28)，根据斑块性质将颈动脉粥样硬化组分为稳定型斑块组(n=39)，不稳定型斑块组(n=33)。稳定型斑块组男20例、女19例，年龄(57.92±8.92)岁，BMI(24.35±2.27)kg/m2；不稳定型斑块组男18例、女15例，年龄(59.07±8.16)岁，BMI(23.98±2.54)kg/m2；颈动脉正常组男17例、女11例，年龄(56.79±8.57)岁，BMI(25.02±2.60)kg/m2。同期选取体检健康者30例作为对照组，男16例、女14例，年龄(58.34±9.24)岁，BMI(24.67±2.52)kg/m2。各组性别、年龄、BMI具有可比性。本研究获得医院伦理委员会的批准，研究对象及家属均签署知情同意书。

1.2 颈动脉超声检查 采用EPIQ-7型彩色多普勒超声诊断仪(飞利浦投资有限公司)对患者双侧颈总动脉远段和球部、IMT、血管管腔内径进行检查。其中IMT是指管腔和血管内膜交点的垂直距离，以颈总动脉远段、球部，颈内动脉近段三个位点IMT的平均值为IMT最终值。同时评估IMT厚度及粥样硬化斑块稳定性。其中IMT<1.00 mm为颈动脉正常，IMT≥1.00 mm为颈动脉粥样硬化，根据斑块性质将其分为稳定型斑块和不稳定型斑块。

1.3 血清抗apoA-1 IgG、MMP-9检测 清晨采集各组空腹肘静脉血5 mL，常温条件下以3 000 r/min离心5 min，收集上清液置于-70 ℃环境中保存，待检。用酶联免疫吸附法测定血清抗apoA-1 IgG、MMP-9。抗apoA-1 IgG试剂盒由北京百奥莱博科技有限公司提供，MMP-9试剂盒由艾莱萨生物科技有限公司提供，严格按照试剂盒说明进行相关操作。

2 结果

2.1 各组血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平比较 各组血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平比较差异均有统计学意义(P均<0.05)；稳定型斑块组、不稳定型斑块组血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平高于颈动脉正常组、对照组(P均<0.05)，且不稳定型斑块组血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平高于稳定型斑块组(P均<0.05)。见表1。

表1 各组血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平比较

2.2 急性脑梗死患者血清抗apoA-1 IgG水平与MMP-9的相关性 经Pearson积矩相关分析，急性脑梗死患者血清抗apoA-1 IgG水平与MMP-9呈正相关(r=0.672，P<0.05)。

2.3 血清抗apoA-1 IgG、MMP-9对颈动脉粥样硬化的预测价值 抗apoA-1 IgG的AUC为0.837，95%CI(0.740，0.899)，最佳截断值为1.57 μg/mL，灵敏度、特异度分别为0.87、0.91，准确度为0.83；MMP-9的AUC为0.816，95%CI(0.725，0.879)，最佳截断值为1.97 ng/mL，灵敏度、特异度分别为0.81、0.77，准确度为0.79；抗apoA-1 IgG联合MMP-9的AUC为0.938，95%CI(0.839，0.982)，灵敏度、特异度分别为0.93、0.95，准确度为0.89。

3 讨论

急性脑梗死是临床常见的脑血管疾病，发病率高，并呈年轻化趋势，严重威胁人们健康和生命质量，颈动脉粥样硬化是其重要诱因。姚汉云等[7]研究结果显示，约68.5%急性脑梗死患者有颈动脉斑块，其中33.3%为不稳定型斑块；而Kitamura等[8]研究结果显示，较颈动脉不伴粥样硬化斑块患者而言，伴粥样硬化斑块患者发生脑梗死的风险增加3倍，提示斑块破裂后暴露血管壁胶原以及脂质，引起血小板聚集，造成凝血功能障碍，血栓形成导致血液供应减少，发生脑梗死。可见，颈动脉斑块在动脉粥样硬化所致的急性脑梗死发病过程中具有重要作用[9]。寻找灵敏度高、特异度好且与动脉粥样硬化密切相关的指标，对辅助诊断急性脑梗死及评估病情严重程度有重要意义。

抗apoA-1 IgG与氧化应激、内皮功能障碍及炎症反应密切相关，并且参与了心血管疾病的发病过程，增加了患者血栓事件的发病风险[10]。此外，研究表明，抗apoA-1 IgG是连接动脉粥样硬化与动脉粥样硬化斑块易损性之间的重要活性介质，用抗apoA-1 IgG被动免疫小鼠模型，动脉粥样硬化以及动脉粥样硬化斑块易损性明显增加[11]。推测其机制可能与抗apoA-1 IgG使血流中的中性粒细胞浸润至动脉粥样硬化斑块中，并使斑块稳定性减弱而增加其易损性有关[12]。MMP属于钙离子和锌离子依赖性蛋白酶，参与了中枢神经系统的病理生理过程，MMP-9是MMP家族成员之一，是一种分解细胞外基质的多源糖蛋白，主要由中性粒细胞、小胶质细胞、血管内皮细胞等多种细胞合并并分泌。MMP-9主要作用于Ⅳ型、Ⅴ型明胶原，而Ⅴ型明胶原是粥样斑块底膜以及纤维帽的重要成分[13]。研究显示，MMP-9在动脉粥样硬化斑块的形成、破裂过程中发挥重要作用，其机制主要为激活Ⅴ型明胶酶原，并诱导其进入平滑肌细胞而促进动脉粥样硬化斑块的破裂；MMP-9使覆盖在斑块表面的纤维帽遭到破坏，降低斑块的稳定性，增加斑块易损性[14～18]。

关于抗apoA-1 IgG、MMP-9在急性脑梗死发病过程中的作用，目前相关研究相对较少。本研究发现，稳定型斑块组和不稳定型斑块组血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平高于颈动脉正常组、对照组，且不稳定型斑块组血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平最高，提示抗apoA-1 IgG、MMP-9与颈动脉粥样硬化程度密切相关，可作为评估动脉粥样硬化程度的重要指标。该结果同时提示，抗apoA-1 IgG、MMP-9诱发颈动脉粥样硬化斑块形成，并加速斑块的破裂而致组织动脉灌注障碍，血供不足导致脑梗死发生。Pearson积矩相关分析急性脑梗死患者血清抗apoA-1 IgG与MMP-9呈正相关，提示抗apoA-1 IgG与MMP-9协同作用介导颈动脉粥样硬化发生发展过程，进而参与急性脑梗死的发病，其作用机制需进一步研究证实。

采用AUC评估血清抗apoA-1 IgG与MMP-9对急性脑梗死颈动脉粥样硬化的预测价值，结果显示抗apoA-1 IgG与MMP-9对急性脑梗死颈动脉粥样硬化具有较好的预测价值，进一步分析显示，抗apoA-1 IgG联合MMP-9对急性脑梗死颈动脉粥样硬化预测的灵敏度、特异度及准确度更高。提示早期联合检测可明显提高预测价值。

综上所述，血清抗apoA-1 IgG与MMP-9通过参与颈动脉粥样硬化发生发展过程而介导急性脑梗死的发病，二者联合检测可作为预测颈动脉粥样硬化的重要生物标志物。