肠肝循环对家兔胆固醇排泄影响的研究

田卫军 俞生 赵玉文 姜元宝 龙成科 余小华

[摘要] 目的 通過建立肠肝循环模型及阻断肠肝循环，研究家兔胆固醇肠肝循环的存在及其显著性。 方法 本实验设置实验组与对照组，进行高胆固醇饮食与普通饮食差异饲养，通过建立肠肝循环模型及阻断肠肝循环，利用胆固醇氧化酶法分别测定实验组与对照组血清胆固醇浓度，通过6个月数据统计分析，研究胆固醇的肠肝循环现象。 结果 通过6个月数据统计，A、C两组家兔血清胆固醇浓度逐步上升，C组家兔后两个月高胆固醇血症表现明显，A组家兔血清胆固醇浓度上升幅度较C组弱，高胆固醇血症表现不明显，A组与C组比较差异有统计学意义（P<0.05）；D组家兔血清胆固醇浓度稍有上升，但上升幅度不明显，B组血清胆固醇浓度上升幅度较D组明显，B组与D组比较差异有统计学意义（P<0.05）。以每组家兔血清胆固醇浓度为纵坐标，以时间为横坐标，绘制血清TC-时间线状图，C组较A组家兔血清胆固醇上升趋势明显，B组较D组家兔血清胆固醇上升趋势明显。 结论 家兔胆固醇肠肝循环现象存在，通过阻断家兔肠肝循环，对降低家兔血清胆固醇含量具有一定作用，从而为进一步研究阻断肠肝循环降低人体胆固醇含量提供理论基础，为临床上通过阻断胆固醇肠肝循环途径治疗高胆固醇血症提供新思路，为药品研发指引方向。

[关键词] 高血脂；高胆固醇血症；胆固醇；肠肝循环

[中图分类号] R96 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2018）15-0034-03

Study on the effect of enterohepatic circulation on cholesterol excretion in rabbits

TIAN Weijun1 YU Sheng1 ZHAO Yuwen2 JIANG Yuanbao1 LONG Chengke1 YU Xiaohua3

1.Emergency Center， Shannan Peoples Hospital in Tibet Autonomous Region， Shannan 856000， China； 2.Huaibei Miner General Hospital Group， Huaibei 235000， China； 3.Department of Vasculocardiology， Shannan Peoples Hospital in Tibet Autonomous Region， Shannan 856000， China

[Abstract] Objective To study the existence and significance of cholesterol-intestinal hepatic circulation in rabbits by establishing a model of enterohepatic circulation and blocking enterohepatic circulation. Methods In this experiment， the experimental group and the control group were set up to conduct high-cholesterol diets and ordinary diets for differential feeding. By establishing a model of enterohepatic circulation and blocking enterohepatic circulation， cholesterol oxidase method was used to measure serum cholesterol concentration in the experimental group and the control group respectively. Based on the statistical analysis of the data for 6 months， the phenomenon of enterohepatic circulation of cholesterol was studied. Results Based on the data of 6 months， the serum cholesterol concentrations of rabbits in groups A and C were gradually increased. After two months， the hypercholesterolemia was significant in the rabbits in group C. The increase degree of serum cholesterol concentration in the rabbits in group A was weaker than that in group C. Hypercholesterolemia had no obvious effect. There was statistically significant difference between group A and group C （P<0.05）； serum cholesterol concentration in rabbits in group D was increased slightly， but the increase was not significant. The increase of serum cholesterol concentration in group B was more significant than that of group D. There was a statistically significant difference between group B and group D（P<0.05）. The serum TC-time line graph was plotted with the serum cholesterol concentration in each group as the ordinate and the time as the abscissa. Compared with group A， the serum cholesterol was increased significantly in group C. Compared with group D， the serum cholesterol in group B was increased significantly. Conclusion This experiment shows that the cholesterol enterohepatic circulation phenomenon exists in rabbits. By blocking the enterohepatic circulation in rabbits， it has a certain effect on lowering the content of serum cholesterol in rabbits. This will provide a theoretical basis for further studying the role of blocking enterohepatic circulation in reducing cholesterol levels in the body. It provides new ideas for the clinical treatment of hypercholesterolemia by blocking the cholesterol enterohepatic circulation in clinical practice and points a direction for drug development.

[Key words] Hyperlipidemia； Hypercholesterolemia； Cholesterol； Enterohepatic circulation

被分泌到胆汁内的药物及其代谢产物经由胆道及胆总管进入肠腔，经胆汁排入肠腔的药物部分可再经小肠上皮细胞吸收经肝脏进入血液循环，这种肝脏、胆汁、小肠间的循环称肠肝循环（enteroheptic cycle，ETC）。肠肝循环是体内一种特殊生理现象，药物ETC现象在临床上具有不同的意义，药物ETC的存在可使药物出现双峰或多峰现象，有助于提高药物的生物利用度，内源性物质和毒性物质ETC现象则使人体长时间蓄积而带来危害。阻断肠肝循环（interruption of enterohepatic circulation，IETC）就是阻断具有ETC特性物质在肠道内的重吸收过程，使其ETC过程受到抑制，降低药物在人体内负荷的原理。

本实验运用家兔作为实验对象，通过建立肠肝循环模型及阻断肠肝循环，研究胆固醇肠肝循环的存在及其显著性，从而为临床上通过阻断胆固醇肠肝循环途径治疗高胆固醇血症及药品研发提供理论基础和现实依据。

1 对象与方法

1.1 研究对象

2017年8月～2018年2月本实验运用家兔作为实验对象，设置实验组与对照组，通过建立肠肝循环模型及阻断肠肝循环，利用胆固醇氧化酶法分别测定实验组与对照组血清胆固醇浓度，比较各组家兔血清胆固醇浓度随时间变化情况，建立血清胆固醇浓度-时间曲线观察各组家兔血清胆固醇浓度随时间变化的增幅，研究胆固醇肠肝循环的存在及其显著性。

1.2 方法

①雄性家兔40只，体重（2.0±0.2）kg，健康状况良好，均等；分为A、B、C、D四组，每组10只。分别编号A1～10、B1～10、C1～10、D1～10，B、D两组每日喂饲普通兔粮3次，A、C两组在每日喂饲普通兔粮3次的基础上，每只家兔添加20 g鸡蛋黄。②分别做A、B两组家兔近肝脏处的胆总管插管和近肝胰壶腹处的胆总管插管，近肝脏处的胆总管插管留置生物储存囊储存胆汁。③每次进食后1 h取A、B两组家兔近肝脏处的胆总管插管生物储存囊储存的胆汁，采用30 min匀速注入对方的近肝胰壶腹处的胆总管插管。④分别于实验前及实验后1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月，抽取A、B、C、D四组家兔静脉血，测定胆固醇浓度，每组10只家兔血清胆固醇浓度作为记录数据。追踪实验6个月。

1.3观察指标

C组为A组对照组，D组为B组对照组。观察对比各组家兔血清胆固醇浓度随时间变化情况。

1.4 统计学分析

使用SPSS16.0统计学软件进行分析。计量资料以（x±s）表示，A组与C组、B组与D组分别配对t检验；P<0.05为差异有统计学意义。并以每组血清胆固醇浓度为纵坐标，以时间为横坐标，绘制血清TC-时间线状图，观察对比各组家兔血清胆固醇浓度随时间变化趋势。

2 结果

2.1 A组与C组家兔血清胆固醇浓度随时间变化比较

A、C两组家兔血清胆固醇浓度逐步上升，C组家兔后2个月高胆固醇血症表现明显，A组家兔血清胆固醇浓度上升幅度较C组小，高胆固醇血症表现不明显。A组与C组比较差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 B组与D组家兔血清胆固醇浓度随时间变化比较

D组家兔血清胆固醇浓度稍有上升，上升幅度不明显；B组血清胆固醇浓度上升幅度较D明显。B组与D组比较差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.3血清TC-时间线状图

以每组家兔血清胆固醇浓度为纵坐标，以时间为横坐标，绘制血清TC-时间线状图。C组较A组家兔血清胆固醇上升趋势明显，B组较D组家兔血清胆固醇上升趋势明显（封三图7）。

3讨论

本实验为研究胆固醇肠肝循环的存在及其显著性的实验，分为实验组与对照组，进行高胆固醇饮食与普通饮食差异饲养，通过建立肠肝循环模型及阻断肠肝循环，研究血清胆固醇浓度随时间的变化。通过6个月数据统计，C组家兔血清胆固醇浓度逐步上升，后2个月高胆固醇血症表现明显，A组家兔血清胆固醇浓度逐步上升，但由于被阻断肠肝循环，其血清胆固醇浓度上升幅度较C组小，高胆固醇血症表现不明显，A组与C组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；D组家兔血清胆固醇浓度稍有上升，上升幅度不明显，B组家兔由于通过肠肝循环模型接受来自于A组家兔的胆汁，其血清胆固醇浓度上升幅度较D组明显，B组与D组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。以每组家兔血清胆固醇浓度为纵坐标，以时间为横坐标，绘制血清TC-时间线状图，C组较A组家兔血清胆固醇上升趋势明显，B组较D组家兔血清胆固醇上升趋势明显，表明家兔胆固醇肠肝循环现象存在，且具有一定的显著性。通过阻断家兔肠肝循环，对降低家兔血清胆固醇含量具有一定作用，从而为进一步研究阻断肠肝循环降低人体胆固醇含量提供理论基础及指导。

高脂血症是人体脂肪代谢异常的表现，是导致动脉粥样硬化的主要因素，是引起心脑血管病主要原因之一。高血脂主要分为三类：高胆固醇血症、高甘油三酯血症和混合性高脂血症。胆固醇可转化為胆汁酸经肠道排出体外，未代谢的胆固醇留在血液中可能会堆积起来，特别是饱和脂肪酸的摄取量多时，因为饱和脂肪酸会减少接受器的数目，并且阻碍细胞吸收正常的胆固醇量，从而引起高胆固醇血症。目前高胆固醇血症尚无很好的治疗方法，主要通过膳食治疗、增加运动以及辛伐他汀片等降脂药物治疗，且预后较差，尤其对于家族性高胆固醇血症更无彻底治疗方法。

胆固醇肠肝循环具有一定的显著性，阻断家兔肠肝循环，对降低家兔血清胆固醇含量具有一定作用，为临床上通过阻断胆固醇肠肝循环途径降低体内胆固醇含量提供新思路，为治疗高胆固醇血症开辟新途径。胆固醇肠肝循环为肝脏、胆汁、小肠间的循环，若通过人为干预，阻断小肠循环环节，使进入小肠的胆固醇经肠道排除体外，不再经小肠上皮细胞吸收而是经肝脏进入血液循环，从而可降低人体胆固醇含量。可使用药物阻断小肠循环环节，使用对胆固醇具有结合作用或分解作用的药物，药物进入小肠后，与肠道内的胆固醇结合或者分解胆固醇为其他物质，从而排出肠道。本实验为临床上通过阻断胆固醇肠肝循环途径治疗高胆固醇血症提供理论基础和新思路，为相关药品研发指引方向。

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（收稿日期：2018-02-05）