20%噻虫嗪·螺虫乙酯悬浮剂的高效液相色谱法

蓝宏彦，何玉清，吴燕飞，金曼丽，邱 理

(柳州市惠农化工有限公司，广西 柳州 545616 )

螺虫乙酯是季酮酸类化合物，是迄今唯一具有双向内吸传导性能的现代杀虫剂；该化合物可以在整个植物体内向上向下移动，抵达叶面和树皮，从而防治如生菜和白菜内叶上，及果树皮上的害虫。这种独特的内吸性能可以保护新生茎、叶和根部，防止害虫的卵和幼虫生长[1-2]。20%噻虫嗪·螺虫乙酯悬浮剂是由柳州市惠农化工有限公司提供的产品，噻虫螓与螺虫乙酯复配是一个很好的既杀虫又杀螨的剂型。目前，噻虫·螺虫乙酯复配的剂型分析方法未见报道。特此建立高效液相色谱法同柱分离测定20%噻虫嗪·螺虫乙酯悬浮剂含量的方法。该方法具有操作快速、准确、简便、分离效果好的优点，可为企业产品质量控制和检验机构质量检测提供参考。

1 实验部分

1.1 试剂与溶液

甲醇：色谱纯；水：蒸二次新蒸馏水； 噻虫嗪标样：质量分数≥ 99.0%；螺虫乙酯标样:质量分数≥98.0%；噻虫·螺虫乙酯20% 悬浮剂试样(柳州市惠农化工有限公司提供)；二次蒸馏水(实验室自制)。

1.2 仪器

高效液相色谱仪：日本岛津进口LC-2030C 3D，二极管阵列检测器；岛津原装工作站；色谱柱：250 mm×4.6 mm(id)不锈钢柱，内装ODS-3 c185μm填充物。

1.3 操作条件

流动相：甲醇+乙腈+水=7+1+2 (V/V)；流量:1.0 mL/min，检测波长210 nm；进样体积：20 μL；出峰时间：噻虫嗪约为2.971min，螺虫乙酯约为6.163min；这样可使噻虫嗪和螺虫乙酯在C18柱上获得较好的分离效果和较高的灵敏度；紫外光谱图如图1与图2。

上述液相色谱操作条件，是典型的操作参数，可根据不同仪器特点和当时温度条件，对给定的操作参数进行适当的调整，以期获得最佳效果。典型的标样和试样的高效液相色谱图如图3与图4。

图1 噻虫嗪的紫外光谱图

图2 螺虫乙酯的紫外光谱图

图3 噻虫·螺虫乙酯标样图谱

图4 20%噻虫·螺虫乙酯试样图谱

1.4 测定步骤

1.4.1 标样溶液的配制

分别称取噻虫嗪标品0.0505 g(精确至0.0002 g)和螺虫乙酯标品0.0344 g(精确至0.0002 g)置于50.0 mL容量瓶中，加入甲醇超声溶解，冷却至室温，用甲醇定容至刻度，用移液管准确吸取该溶液 2.0 mL 于 25.0 mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀作为标样用。

1.4.2 试样溶液的配制

称取试样 0.420 g (精确到0.0002 g)于50.0 mL容量瓶中，加入甲醇超声溶解，冷却至室温，用甲醇定容至刻度，用移液管准确吸取该溶液 2.0 mL 于 25.0 mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀作为样品测定。

1.4.3 测定

待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针标样溶液面积相对变化<1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液顺序进行测定。

1.5 计算

将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液中噻虫嗪和螺虫乙酯的峰面积分别进行平均，试样中噻虫嗪或螺虫乙酯的质量分数按下列公式计算：

式中： A1—标样溶液中噻虫嗪或螺虫乙酯峰面积的平均值；

A2—试样溶液中噻虫嗪或螺虫乙酯峰面积的平均值；

m1—噻虫嗪或螺虫乙酯标样的质量(g)；

m2—试样的质量(g)；

p—噻虫嗪或螺虫乙酯标样的质量分数(%)。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件的选择

检测波长的确定：待仪器基线稳定后，将标样溶液用高效液相色谱仪自动进样(20μL)，10min后在光谱条件下，可观察到螺虫乙酯在209 nm、噻虫嗪在202和252 nm波长条件下有较大的吸收波长，但是在252 nm波长下对螺虫乙酯的响应值就会偏小，在210 nm波长下两个成分都有较大的吸收且溶剂峰相对干扰较小，因此选用210 nm作为检测波长。选择流动相：从噻虫嗪和螺虫乙酯的特点上看，噻虫嗪对使用的甲醇和水的比例50∶50，但是，在这样的条件下，螺虫乙酯出峰时间就比较长、峰型难看。经过多次试验筛选，最后为甲醇体积分数70%，水体积分数20%，乙腈积分数10%，流量为1.0 mL/min时有效成分与杂质能很好的分离，峰形对称佳，基线平稳，而且分析时间又短，可以提高工作效率。

2.2 线性相关性实验

按照本方法的确定要求，分别准确称取噻虫嗪99.0%标样约 0.0505 g和螺虫乙酯98.0%标样约 0.0344 g(精确至0.0002 g)，置于50.0 mL 容量瓶中用，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀后作为母液备用。准确吸母液取2.0 mL置于25 mL 容量瓶中用甲醇定容至刻度，摇匀作为检测样品的标准溶液。按上述色谱条件进行分析，进样量分别为5、 10、15、20、25、30、35 μL，得出质量与峰面积的对应关系(表1、图5和图6)。噻虫嗪的线性相关曲线为：Y=89654.2X-1999194.3，R2=0.9999；螺虫乙酯的线性相关曲线为：Y=55221X-79365，R2=0.9998，结果表明，噻虫嗪和螺虫乙酯的液相色谱分析法线性关系良好，可满足定量分析的要求。

表1 分析方法的线性相关性试验结果

图5 噻虫嗪的线性关系图

图6 螺虫乙酯的线性关系图

2.3 精确度的验证

在同一样品中准确称取5个试样，在上述色谱操作条件下进行分析测定，实验结果为噻虫嗪的平均值12.32%，标准偏差0.015，变异系数0.12%；螺虫乙酯的平均值8.29%，标准偏差0.031，变异系数0.37%(表2)。

表2 分析方法的精密度试验结果

2.4 准确度的验证

在已知准确质量分数的样品中，分别加入2 mL 1.4.1中配制的标准溶液，在上述方法和操作条件进行定量分析，分析结果见(表3)；测得噻虫嗪和螺虫乙酯的平均回收率分别为100.07%和 99.99%。

表3 分析方法的准确度试验结果

3 结论

综上所述，该方法具有操作简便、快速、准确、分离效果好的优点，准确度和精确度均能达到定量分析标准要求，可以作为企业生产过程质量控制和质检机构质量检测的参考方法。