微生物洁净实验室的质量控制

刘庭琨，普茺蔚，李学兴

（云南省玉溪市食品药品检验所，云南 玉溪 653100）

0 引言

微生物检验是食品药品检验过程的重要环节，微生物检验结果受很多因素的影响，为保证实验室操作环境的稳定性、检验过程的快捷性、检验结果的有效性、可靠性和准确性，避免偏差的产生，须对微生物洁净实验室进行科学的监测、合理的验证，对洁净实验室进行微生物监测和质量控制，使受控环境维持可接受的风险水平[1]。现就如何对微生物洁净实验室进行质量控制做如下分析。

1 人员要求

实验人员应接受无菌操作、培养基制备、消毒、灭菌、注平板、菌落计数、菌种的转种、传代和保藏、微生物检查方法和鉴定技术、生物安全等培训，经考核合格方可上岗，并接受继续教育。检验人员所有操作须遵守操作规程和操作规范的要求。

2 洁净实验室参数确认

定期进行空气悬浮粒子、浮游菌和沉降菌、关键检测台面、人员操作服表面及五指手套的监测。每2年检测高效空气过滤器的完整性；每2年监测单向流气流组织；每年监测A级平均风速：设备 0.25～0.50m/s，设施 0.36～0.54m/s；每年监测B级单向流平均风速：0.25～0.50m/s；每年监测B级、C级、D级换气次数；每周监测一次压差：洁净区与非洁净区之间压差不小于10Pa，不同级别洁净区之间的压差不小于10Pa；每周监测照度＞300lx、噪音≤65dB；每次实验监测温度：18～26℃、相对湿度：45%～65%。

3 监测方法

悬浮粒子的监测按照《医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法》[2]的现行国家标准进行；沉降菌的监测按照《医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》[3]的现行国家标准进行；浮游菌的监测按照《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》[4]的现行国家标准进行；表面微生物用接触碟法和擦拭法进行监测。

4 监测项目及监测频次

A级空气悬浮粒子每季度一次、浮游菌每月一次、沉降菌及表面微生物每次实验进行监测；B级空气悬浮粒子每半年一次、浮游菌每季度一次、沉降菌及表面微生物每周一次，进行监测：C级空气悬浮粒子每半年一次、浮游菌每半年一次、沉降菌及表面微生物每季度一次进行监测；D级空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌及表面微生物均为每半年一次进行监测。

5 监测标准

见表1、表2。

表1 各洁净级别空气悬浮粒子的标准

表2 各洁净级别环境微生物监测的动态标准

6 警戒限和纠偏限

微生物洁净实验室根据不同洁净区域的标准，制定微生物监测警戒限和纠偏限。A级环境应无微生物污染。

7 偏差处理

当微生物监测结果超出纠偏限度时，应当按照偏差处理规程进行报告、记录、调查、处理以及采取纠正措施，并对纠正措施的有效性进行评估。

8 微生物洁净实验室

所使用的仪器和设备须经捡定或校准合格，有状态标识。仪器和设备建立操作规程、使用记录和监控记录。并长期进行使用监测、维护和保养。

所使用的培养基须经适用性检查、pH值检查合格，定期进行稳定性检查，并按标准制备、贮藏[5-7]。培养基应采用经验证的灭菌程序灭菌。洁净实验室环境监控的培养基采用终端灭菌，在使用前进行100%预培养。

微生物洁净实验室在使用前和使用后应进行消毒，所使用的清洁剂和消毒剂既能杀死广泛的微生物、无毒害、无腐蚀性，又应性能稳定、作用快、残留少。定期更换消毒剂以防止产生耐受菌株。A级和B级洁净区使用无菌或经无菌处理的消毒剂和清洁剂。所使用的紫外消毒灯管应定期监测辐射强度，辐射强度不合格的灯管及时更换[8-9]。

微生物洁净实验室每次使用前洁净服须清洗、灭菌，工鞋须消毒，防止对实验室造成污染[10]。

9 阳性对照室和生物安全柜

若有带菌培养物溢出，必须就地处理，不能使带菌培养物污染扩散。所有带菌物须灭菌。

生物安全柜和层流超净工作台应符合安全要求，由有资质的人员进行安装及配件的更换，并定期进行再验证。

为维持微生物洁净实验室环境的稳定性，应减少人员干预，减少人和物品的移动，减少人员干预比监测更有效。

10 结语

做好微生物洁净实验室的质量控制是保证实验室良好运行，保证微生物检验有效、可靠、准确、快捷的前提和条件，微生物洁净实验室的质量控制应是一长期、持续的过程，我们应为之不懈努力，持之以恒。实验室全体人员应遵守操作规程和操作规范、不断提升检验技术和操作能力，切实做好质量控制。