血脂康与阿托伐他汀对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

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急性心肌梗死(AMI)是心肌供血中断引起的心肌缺血性坏死，后果严重，尽快恢复血供是抢救濒临死亡心肌的唯一有效方法，目前常采用溶栓治疗或冠状动脉介入治疗实现再通，但不容忽视的是，再灌注本身往往会造成心肌更为持久和严重的损害，缺血心肌得到再灌注，缩小梗死面积，改善预后。然而，心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion，I/R)后常常出现缺血再灌注损伤影响了再灌注的疗效。研究表明其与自由基生成增多、钙超载、心肌纤维能量代谢障碍、血管内皮细胞(VEC)功能紊乱、一氧化氮(NO)、中性粒细胞及细胞凋亡等过程密切相关。众多研究表明，他汀类药物具有多种调脂以外的作用，包括改善内皮功能、稳定动脉粥样硬化斑块、抑制炎症反应等[1-2]。国内外研究提示他汀类药物可以改善心肌I/R损伤[3-5]。血脂康是从特制的中药红曲中提炼而成，是我国自主开发研制的具有他汀类降脂作用的中药，富含羟甲基戊二酰辅酶A(HMG-Co)还原酶抑制剂(洛伐他汀)、多种不饱和脂肪酸、人体必需氨基酸、甾醇和少量黄酮等多种有效成分，除具有降低血脂、防治动脉硬化功能外，还具有抑制巨噬细胞分泌、抗炎等作用[6]。本研究旨在比较阿托伐他汀与血脂康应用于急性心肌缺血再灌注大鼠对减少心肌损伤及改善心室重构的作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组 20周龄的Wistar大鼠115只(体重190 g～230 g)，随机分为4组，假手术组25只、缺血再灌注组30只、阿托伐他汀组30只、血脂康组30只。

1.2 方法

1.2.1 给药方法 缺血再灌注组及假手术组给予1 mL/d生理盐水；阿托伐他汀组：取阿托代他汀2 mg/kg，配成浓度0.02%的药液(阿托伐他汀由大连辉瑞公司提供)，1 mL/l00 g；血脂康组：以血脂康0.09 g/kg溶于生理盐水中灌胃(血脂康由北京大学维信生物科技有限公司生产)；每天空腹灌胃1次，灌胃7 d后，制作大鼠在体心肌I/R模型，模型建立后再连续灌胃4周。

1.2.2 大鼠在体心肌I/R模型的建立[7]连接心电监护仪监测心电变化，并做Ⅱ导联心电图记录。将大鼠麻醉后，仰卧固定于手术台上，先用缝线在开胸部位做一荷包，自左侧3～4肋间开胸，暴露心脏，于冠状动脉左前降支起始0.2 cm处穿线，待呼吸、血压平稳15 min后，用一细小带凹槽乳胶管垫于血管和结扎线之间，结扎。30 min后剪开结扎线，再灌注180 min(假手术组仅穿线不结扎)。结扎成功标志：结扎线远端心肌颜色发绀，心电图表现为R波高耸或ST段抬高[8]。模型制备成功标志：松开结扎线以恢复冠状动脉血量，缺血部位心肌颜色恢复，抬高的ST段下降。

1.2.3 血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超敏C反应蛋白(hsCRP)水平的测定 大鼠再灌注180 min后采血3 mL，加入预先准备的无菌肝素抗凝管内，3 000 r/min离心5 min，分离血清，采用全自动生化仪检测血清LDH、CK；酶联免疫吸附法(ELISA)测定hsCRP水平。

1.2.4 心室重构指标的测定 各组动物于术后第28天称取体重后打开胸腔，分离心脏，分别称取左右心室重量，与体重相除，得左右心室相对重量，用千分尺量取室间隔厚度。

2 结 果

2.1 各组大鼠血清LDH、CK、hsCRP水平比较 缺血再灌注组、阿托伐他汀组及血脂康组血清LDH、CK、hsCRP水平均明显高于假手术组(P<0.01)，但阿托伐他汀组及血脂康组血清LDH、CK、hsCRP水平明显低于缺血再灌注组(P<0.01)，而阿托伐他汀组与血脂康组各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。详见表1。

表1 各组大鼠血清LDH、CK、hsCRP水平比较(±s)

2.2 各组大鼠心室重构指标比较 与假手术组比较，缺血再灌注组左室相对重量、右室相对重量及室间隔厚度明显增加(P<0.01)；与缺血再灌注组比较，阿托伐他汀组和血脂康组左室重量指数、右室重量指数、室间隔厚度均明显降低(P<0.01)；阿托伐他汀组和血脂康组心室重构各指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。详见表2。

表2 各组大鼠心室重构指标比较(±s)

3 讨 论

目前已知心肌缺血再灌注损伤的发生机制包括氧自由基生成增加、钙超载、能量代谢障碍、心肌细胞凋亡、血管内皮细胞功能受损以及炎性细胞浸润等。氧自由基生成增加和心肌细胞凋亡在心肌缺血再灌注损伤的早期进程中占有重要地位。众多研究结果表明，缺血组织再灌注时会产生急性炎症反应，导致缺血组织、细胞损伤，炎症细胞释放细胞因子通过不同的致炎和抗炎途径参与缺血再灌注损伤的病理过程[9]。Uehara等[10]通过研究认为hsCRP是对AMI后心肌灌注评价的重要指标之一，尤其是在AMI后心肌的重构中。在急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)病人中hsCRP水平随着梗死面积的不断扩大逐渐开始增加，说明hsCRP在AMI病人的心肌灌注中扮演着一个活跃的角色，并且已经作为一个STEMI病人预后和心肌灌注状态的预测标志[11]。

近年来，有研究发现采用药物预处理能够有效抑制心肌缺血再灌注的心肌细胞凋亡，减少心肌梗死面积[12]。众多的研究证实他汀类药物有心肌保护作用。有研究发现，经皮冠状动脉介入术(PCI)术前给予他汀类药物短期治疗可显著降低术后E选择素和黏附分子-1的水平，对内皮功能有防护作用[13]。血脂康是我国开发研制的具有他汀类降脂作用的中药，作为一种天然他汀可有效地抑制体内3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶[14]，减少胆固醇的合成，并通过反馈调节，增加肝细胞表面低密度脂蛋白(LDL)受体的活性而加速LDL的清除，从而达到以降低血清胆固醇为主的血脂调节作用。血脂康降脂作用不低于其他他汀类药物[15]。血脂康还具有其他他汀类所拥有的抑制动脉粥样硬化斑块形成、抑制血管平滑肌细胞增殖迁移、抑制肝脏沉积、保护血管内皮功能、抑制炎症反应、抗心肌缺血等作用，且其疗效不比他汀类药物差[16-18]。

本研究中，阿托伐他汀组和血脂康组大鼠血清中的心肌酶标志物CK和LDH水平及炎性标志物hsCRP水平明显低于缺血再灌注组，表明预先应用血脂康和阿托伐他汀可以对心肌缺血再灌注损伤产生保护作用，抑制炎症因子的释放，从而改善急性心肌梗死后心肌灌注的状态，并且这种保护作用与其降脂效应无关，这与国内外研究结果一致。与假手术组对比，缺血再灌注组左室相对重量、右室相对重量明显增高，室间隔厚度明显增加(P<0.01)；与缺血再灌注组比较，阿托伐他汀组及血脂康组均能使上述指标降低(P<0.01)。证明应用阿托伐他汀和血脂康均可以抑制大鼠心肌缺血再灌注后的左室扩张。

综上所述，血脂康作为一种调脂药物，除调脂外，还可减少心肌缺血，减轻炎症反应，改善内皮功能，保护缺血再灌注损伤，且疗效与他汀类药物无明显差异，其保护作用除部分与其中的他汀类成分有关，还可能与其他成分有关，因此对其深入的研究很可能扩大该药的临床应用范围。