雷公藤多苷片对缬沙坦在大鼠体内药代动力学的影响

赵俊 徐业 石彦波 黄科 王力勇

[摘要] 目的 研究大鼠合用雷公藤多苷片和缬沙坦后，雷公藤多苷片对缬沙坦药代动力学的影响。 方法 16只雄性SD大鼠，随机分为单独给药组和联合给药组两组，其中单独给药组灌胃缬沙坦（20 mg/kg），联合给药组灌胃雷公藤多苷片（10 mg/kg）和缬沙坦（20 mg/kg）。不同时间点取血并采用LC-MS测定缬沙坦的血药浓度，计算药代动力学参数。 结果 与单独给药组相比，联合给药组缬沙坦的最大血药浓度[（1.57±0.32） vs （1.01±0.28）μg/mL]和血浆曲线下面积[（10.01±0.58） vs （6.82±0.77）mg·h/L]明显增加（P<0.05），说明缬沙坦的代谢受到明显抑制。 结论 雷公藤多苷片与缬沙坦联用之后，会对缬沙坦的药代动力学产生明显的影响，本研究对缬沙坦和雷公藤多苷片联合用药具有一定的指导作用，可以避免临床药物不良相互作用的发生。

[关键词] 缬沙坦；雷公藤多苷片；药代动力学；药物相互作用

[中图分类号] R587.2；R692.9 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2018）14-0030-04

[Abstract] Objective To study the effect of tripterysium glycosides tablets on the pharmacokinetics of valsartan in rats combined with tripterysium glycosides tablets and valsartan. Methods 16 male Sprague-Dawley rats were randomly divided into two groups： the single administration group and the combined administration group. In the single administration group， the rats were given intragastric administration of valsartan （20 mg/kg） and the combined administered group was given intragastric administration of tripterysium glycosides tablets （10 mg/kg） and valsartan （20 mg/kg）. Blood samples were taken at different time points and plasma concentrations of valsartan were determined by LC-MS. Pharmacokinetic parameters were calculated. Results The maximum plasma concentration of valsartan was[（1.57±0.32） vs （1.01±0.28）μg/mL] and the plasma area under the curve was [（10.01±0.58） vs （6.82±0.77）mg·h/L]， which were significantly increased in the combined administration group combined with the single administration group（P<0.05）， indicating that valsartan metabolism was significantly inhibited. Conclusion Tripterysium glycosides tablets combined with valsartan has a significant effect on the pharmacokinetics of valsartan. This study plays a guiding role in the combined administration of valsartan and tripterygium glycosides tablets， which can avoid the occurrence of clinical adverse drug interactions.

[Key words] Valsartan； Tripterysium glycosides tablets； Pharmacokinetics； Drug interactions

纈沙坦是一种特异性的血管紧张素Ⅱ（AT1）受体拮抗剂，也是继氯沙坦后又一个应用于临床的非肽类AT1受体拮抗剂，在调节全身血压、维持电解质体液平衡方面起关键作用[1]。

雷公藤多苷片（TGT）的主要活性成分是雷公藤多苷，药理研究表明其具有免疫抑制、抗炎、抗肿瘤等活性[2-4]。临床上雷公藤多苷片主要用于治疗类风湿、肾病等多种自身免疫性疾病[5]，常与缬沙坦合用治疗糖尿病肾病或肾移植后蛋白尿[6-8]，但雷公藤多苷片和缬沙坦共同服用之后是否会产生药物-药物相互作用目前并不清楚。

因此，本研究旨在观察共同服用缬沙坦及雷公藤多苷片后，雷公藤多苷片对缬沙坦体内药代动力学的影响，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 试药

缬沙坦（纯度>98%）和厄贝沙坦（纯度>98%）（中国药品生物制品检定所）。雷公藤多苷片（上海复旦复华药业有限公司，10 mg，国药准字Z31020415）。

1.2 缬沙坦血浆浓度测定

色谱柱：Waters Xbridge C18色谱柱（3.0×100 mm，3.5 μm，USA）。进样量：5 μL，流动相：水（含0.1%的HCOOH）：甲醇（60：40，v：v），流速：0.6 mL/min。

采用SIM（Positive）模式进行离子监测。其中缬沙坦：m/z 436.1，厄贝沙坦：m/z 429.2。碎片电压：110 V，干燥器流速：11.0 L/min，雾化器压力：40 psi，干燥器温度：350°C，毛细管电压：3500 V。

1.3血浆样品前处理方法

向100 μL血浆样品中加入20 μL甲醇和180 μL含有内标厄贝沙坦（100 ng/mL）的乙腈溶液，涡旋30 s，12000 rpm离心10 min，取上清液进样分析。

1.4标准曲线制备

精密称量缬沙坦置于容量瓶中，加入适量的乙腈制成浓度为2 mg/mL的样品溶液。精密称取一定量的内标厄贝沙坦于容量瓶中，加入适量的乙腈配制浓度为200 ng/mL内标溶液。采用乙腈将缬沙坦稀释成（50～10000）ng/mL浓度梯度的溶液，然后取20 μL加入到含有100 μL空白甲醇的EP管中，加入180 μL内标溶液，涡旋30 s，12000 rpm离心10 min，取上清进样分析。按上述方法配制质控样品溶液，其中缬沙坦为20、200、1600 ng/mL。样品于-4°C保存备用。

1.5方法学考察

1.5.1 选择性 将含有缬沙坦的待分析血浆样本与来源于不同大鼠的6批血浆样本的色谱图进行比对，以观察血浆样本中是否有其他成分存在干扰缬沙坦的检测。

1.5.2 标准曲线及最低检测限 采用缬沙坦的峰面积与厄贝沙坦峰面积之比对应浓度作图，计算线性回归方程（最小二乘法）。将缬沙坦的信噪比为10定为最低定量限（准确度和精密度≤20%）。

1.5.3 准确度和精密度 日内精密度和准确度采用24 h内连续五次进样的样品进行计算；日间精密度和准确度采用在连续3 d内进样质控样品进行计算。

1.5.4 提取回收率和基质效应 提取回收率通过比较加缬沙坦血浆经过前处理之后所得的峰面积与前处理之后血浆加缬沙坦测定的峰面积的比值来计算；基质效应通过比较前处理之后血浆加缬沙坦测定的峰面积与同浓度的乙腈样品溶液的峰面积比值来计算。

1.5.5 稳定性 稳定性进行如下考察：短期稳定性（室温放置4 h）、进样器稳定性（进样器放置24 h）、三次冻融循环（-40°C冻存，室温下融化）及长期稳定性（-40°C冻存15 d）。

1.6动物实验

雄性SD大鼠16只，体重（250±20） g，由浙江中医药大学实验动物中心提供[合格证号：SCXK（沪）2012-000]。大鼠自由摄食饮水，适应性饲养1周[25℃、（60±5）%湿度]。实验前禁食。实验前将大鼠随机分为单独给药组和联合给药组两组，每组8只，其中单独给药组灌胃缬沙坦20 mg/kg；联合给药组灌胃雷公藤多苷片（10 mg/kg）和缬沙坦（20 mg/kg）。

于不同时间点（0.083、0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、10、24 h）眼眶取血（250 μL）置于涂有肝素的EP管中，离心（3500 rpm、5 min）取上清，-40°C保存。

1.7 统计学方法

采用Das 3.0软件计算药代动力学参数。采用t检验进行分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1选择性

如图1所示，为空白血浆及含有缬沙坦及内标厄贝沙坦的血浆样品色谱图，结果表明，在待测样品出峰位置没有其他成分干扰样品的检测，表明本方法具有良好的選择性。

2.2校正曲线及最低检测限

缬沙坦的标准曲线方程为y=0.0025x-0.0358（y为浓度，x为峰面积），其相关系数大于0.999，显示在50-1000 ng/mL浓度范围内，缬沙坦线性关系良好，最低定量限为10 ng/mL。

2.3精密度和准确度

如表1所示，缬沙坦的精密度不超过10%，而缬沙坦的准确度在-9.28%到8.39%范围内。上述结果表明本方法的精密度和准确度满足要求。

2.4提取回收率和基质效应

缬沙坦的基质效应在91.5%～96.7%范围之内，表明本方法无明显的基质效应干扰。缬沙坦提取回收率在88.64%～92.5%范围之内（RSD<15%），结果表明提取回收率良好。

2.5稳定性

稳定性结果表明所有质控样品的稳定性在85%～115%范围之内。

2.6药代动力学研究

本研究考察了同时口服雷公藤多苷片和缬沙坦之后，雷公藤多苷片对缬沙坦的体内药代动力学的影响。如图2所示，为缬沙坦的药时曲线。

缬沙坦的药代动力学参数采用Das 3.0软件进行计算。如表2所示，为缬沙坦的药代动力学参数。从表2可以看出，同时服用两药后，其药代动力学参数发生明显变化。其中两药联用组缬沙坦的Cmax[（1.57±0.32） vs （1.01±0.28）μg/mL]和AUC（0-t）[（10.01±0.58） vs （6.82±0.77）mg·h/L]明显增加（P<0.05），说明同时服用两药后，雷公藤多苷片会对缬沙坦的药代动力学参数发生明显影响。

3 讨论

目前，随着中草药的广泛应用，中药-西药之间的相互作用问题日益凸显，而代谢酶和转运体是影响药物体内处置过程的重要因素，其表达和功能的改变常常引起药代动力学的变化，是药物-药物相互作用的主要靶点[9]。

细胞色素P450（CYP450）位于胞浆内质网膜上，主要存在于肝脏中，此外，在胃肠道（特别是小肠中）、肺、肾和胎盘也有表达。CYP450是重要的药物Ⅰ相代谢酶，可以催化多种外源性化合物的氧化和还原代谢，人体内约有75%的药物代谢通过CYP450酶进行，对解释药物在机体内的清除过程有着非常重要的意义。CYP3A4是表达量最大的异构体，约占人体肝脏CYP450的30%～40%，有近50%的药物通过CYP3A4进行代谢。

上述實验结果表明，同时服用两药后，雷公藤多苷片会对缬沙坦药代动力学行为产生明显的影响，主要表现在抑制缬沙坦的体内代谢，从而增加其血药浓度，增加其系统暴露。缬沙坦为肝脏代谢酶CYP3A4的代谢底物[10]，而雷公藤多苷片中的主要活性成分雷公藤甲素和雷公藤红素会抑制CYP3A4的活性[11-12]。因此，共同服用雷公藤多苷片和缬沙坦之后，雷公藤多苷片中的主要活性成分可能会抑制缬沙坦在肝脏内的代谢，导致缬沙坦代谢清除减慢，导致其在体内的血药浓度升高。

多篇文献报道，雷公藤多苷片与一些临床常用药物联用之后，会导致药物-药物相互作用的产生[13，14]。主要原因是雷公藤多苷片中的主要活性成分会对肝脏药物代谢酶的活性产生抑制作用，导致联用药物代谢缓慢，血药浓度增加，对于治疗窗较宽的药物其疗效会增加，但对于治疗窗狭窄，有一定毒性药物，需注意密切监视治疗药物浓度，以防止毒性反应的发生。

前期研究者对缬沙坦与中药之间可能产生的药物-药物相互作用进行了大量研究[15， 16]。槲皮素、丹参片等常用中药与缬沙坦同时服用会对缬沙坦的体内药代动力学产生明显的影响。因此当缬沙坦与中药联用时，一定要注意两种药物之间可能产生的相互作用，以避免不良药物-药物相互作用的发生。

总之，同时服用雷公藤多苷片和缬沙坦之后，会导致缬沙坦在体内的血药浓度增加，从而能增强其临床疗效，但是临床医生应根据病情需要适当调整给药剂量，以免导致药物血药浓度过高，造成毒性反应的发生。

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（收稿日期：2018-01-22）