元胡水煮液对炎症痛大鼠的镇痛作用

于晓利 曹公译胡文昭 梁 雪 沈 勇 周 强 付立波

(长春师范大学生命科学学院，吉林 长春 130032)

元胡，又名延胡索、玄胡，为罂粟科紫堇属多年生草本植物，在《本草纲目》中归纳元胡有“活血，利气，止痛，通小便”4大功效，并推崇元胡“能行血中气滞，气中血滞，故专治一身上下诸痛”。以块茎入药，其调经止痛功效尤为显著，临床上常将元胡用于治疗痛经、血虚头痛、腰腹疼痛等症。元胡止痛方主要由延胡索和白芷组成；元胡在治疗痛经方面是通过抑制子宫收缩起直接镇痛作用。炎症是疼痛最常见的原因之一，临床上很多原因不明的疼痛实际上是由于软组织的无菌性炎症所致〔1〕。所以，只有建立炎症痛动物模型以研究炎症痛的特征及其作用机制，才可以为研究更有效的镇痛方法提供支持与帮助。炎症过程一般在注射后3～4 h内开始，炎症症状一般能在24 h后基本复原〔2〕。已经有研究表明，给实验性偏头痛大鼠灌胃元胡止痛胶囊有明显的镇痛作用〔3，4〕。但至今尚未发现有元胡水煮液对慢性痛当中的炎症痛大鼠的镇痛效果，为进一步研究元胡镇痛作用，本实验以鹿角菜作为致炎剂建立炎症痛模型，采用元胡水煮液对炎症痛大鼠灌胃方法，以热板和压板测痛仪对大鼠进行痛觉测试，来研究元胡水煮液对炎症痛大鼠的镇痛作用。

1 材料与方法

1.1试验动物 本实验全部使用雄性Wistar大鼠8只，体重200～220 g，由吉林大学白求恩医学院动物实验中心提供。在实验期间保持分笼饲养，自由进食和饮水，确保自然光照，饲养温度控制在(22±2)℃，确保恒定的昼夜节律的生活环境。实验中尽量减少大鼠的使用数量，并尽可能减少其他因素对大鼠所造成的不良影响。

1.2主要试剂与仪器 元胡，购于义善堂大药房南广场店。称取元胡于瓷缸中，加入蒸馏水煮沸后获得元胡水煮液母液，然后用母液配制浓度分别为24、48、96 mg/ml的元胡水煮液；生理盐水由长春豪邦药业有限公司制造，鹿角菜为Sigma公司制造的产品；智能热板仪(YLS-6B)，电子压痛仪(YLS-3E) 均来自于安徽省的淮北正华生物仪器设备有限公司。

1.3炎症痛模型的建立与行为测痛 在大鼠右侧足底皮下注射鹿角菜(鹿角菜需现用现配，避免变性而存在误差)，建立大鼠炎症痛模型。注射时间应该调整在行为学测试之前的3 h，注射后3～4 h，大鼠后爪将会出现明显红肿，皮温显著升高，此时将进行痛觉测试；在进行致炎和灌胃实验之前，先要对大鼠进行热板和压板测试的训练，主要目的是使大鼠熟悉测试环境，从而减少因紧张或不熟悉环境而造成的实验误差。训练总共需要进行7 d，每天5轮，每轮3次。热板测试：采用智能热板仪进行测试，智能热板仪的温度需要控制为(52±0.3)℃。左手握住大鼠身体，右手持于大鼠待测腿髋关节处，使其腿完全伸直，下压使得待测爪与热板面的充分接触。接触时轻踏踏板开关开始计时，后爪主动回缩离开热板表面时再次踏开关以停止，这段时间作为大鼠后爪缩爪反应潜伏期(HWL)。压力测试：使用电子压痛仪进行测试。左手握住大鼠身体，右手持于大鼠待测腿髋关节处，使其腿完全伸直，下压使得其爪与实验小平面接触，接触时同时轻踏踏板开关，楔形有机玻璃下降落在大鼠后爪上，压力将以30 g/s的速度增进，同样方法测得大鼠对机械刺激的HWL。训练后大鼠对伤害性热刺激的HWL不得超过5 s，对伤害性机械刺激的HWL不得超过6 s。注射药物前先测量3组HWL作为基础值；注射药物后各时间点的HWL以相对于基础值的变化百分比表示。

1.4统计学方法 采用SPSS18.0 统计软件进行t检验。

2 结 果

给炎症痛大鼠灌胃24 mg/ml元胡水煮液与灌胃生理盐水作为对照，大鼠对热刺激和机械刺激的HWL变化百分比见表1，与对照组比较，炎症痛大鼠灌胃24 mg/ml元胡水煮液后左、右爪机械刺激的HWL有极显著差异(均P<0.001)，左、右爪热刺激无明显差异(均P>0.05)。给炎症痛大鼠灌胃48 mg/ml元胡水煮液与灌胃生理盐水作为对照，大鼠对热刺激和机械刺激的HWL变化百分比见表2，与对照组比较，炎症痛大鼠灌48 mg/ml元胡水煮液后的左、右爪机械刺激的HWL均有显著差异(均P<0.01)，左、右爪热刺激无明显差异(均P>0.05)。给炎症痛大鼠灌胃96 mg/ml元胡水煮液与灌胃生理盐水作为对照，大鼠对热刺激和机械刺及的HWL变化百分比见表3，与对照组比较，炎症痛大鼠灌96 mg/ml元胡水煮液后的左、右爪热刺激和机械刺激的HWL均有显著差异(均P<0.01)，即明显延长了大鼠的HWL。

表1 灌胃24 mg/ml元胡水煮液的炎症痛大鼠与对照组(生理盐水)大鼠的HWL(n=8)

与对照组同侧别比较：1)P<0.001

表2 灌胃48 mg/ml元胡水煮液的炎症痛大鼠与对照组大鼠HWL比较

与对照组同侧别比较：1)P<0.01,下表同

表3 灌胃96 mg/ml元胡水煮液的炎症痛大鼠与对照组大鼠的HWL比较

3 讨 论

元胡史载于《开宝本草》，性温，味辛苦，入心、脾、肝、肺，是活血化瘀、行气止痛之妙品，在临床上的应用也并不少见，经过多年临床用药验证，具有良好行气止痛，活血化瘀的功效，特别在治疗痛经方面有很好的效果〔5〕。此外，已有相关学者研究元胡止痛胶囊对小鼠活血镇痛的作用，结果表明元胡止痛胶囊可以明显改善血瘀症小鼠的血液流变性，并有很好的镇痛效果〔6〕。也有研究发现，元胡止痛栓能够提高小鼠热板法、大鼠甲醛法动物的痛阈；延长小鼠、大鼠痛经模型的扭体潜伏期、降低扭体次数及扭体发生率〔7〕，具有良好的镇痛作用，并能够对抗催产素所致离体子宫平滑肌的收缩作用〔8〕。元胡的镇痛作用机制主要是由其内含有的化学成分决定，决定其镇痛作用的化学成分有延胡索甲素、延胡索乙素、延胡索癸素、延胡索丑素，这些成分都为生物碱。已有研究证实延胡索乙素的镇痛作用最强，次之为延胡索丑素，并且表明延胡索乙素在治疗痛经时是通过抑制子宫收缩起到镇痛作用。而在其他方面的镇痛作用主要是因为延胡索乙素作为多巴胺2型受体的受体抑制剂，其抑制脊髓以上D2受体达到镇痛作用。炎症痛是一种常见的慢性痛，患有炎症痛的患者数不胜数。因此，研究新型镇痛类药物具有重大的生理学意义。本实验结果表明，元胡水煮液对炎症痛疼痛变化具有调节作用。