5490例性病门诊患者HPV检测结果分析

于功奇 王真真 付希安 王 川 王 娜 刘 红 张福仁

人乳头瘤病毒(HPV)是一种小分子双链DNA病毒，对人皮肤、黏膜有高度亲嗜性。目前已发现该病毒有200余种亚型，根据不同基因型与癌发生危险性的高低可分为高危型和低危型[1]，其中高危型HPV包括16、18、31、33、45、52、56、58型等，其持续性感染与子宫颈癌的发病及男性阴茎及肛周癌变密切相关；低危型HPV包括6、11型等，其感染与外生殖器尖锐湿疣等良性病变有关[1-3]。为了更好了解近年来山东地区HPV感染情况，本研究采用实时荧光定量PCR方法对2012年8月至2016年8月来本院性病门诊就诊的患者进行HPV(6,11型)及HR-HPV(8个型)检测，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源 选取2012年8月至2016年8月来山东省皮肤病医院性病门诊就诊的5490例检测HPV项目的患者。其中男3195例，女2295例。年龄1个月至92岁。

1.2 标本采集 男性无菌棉拭子插入尿道2～3 cm轻轻捻动拭子采集分泌物后取出立即置于采集管中，密闭送检(采集分泌物前2小时禁小便)；女性用无菌生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物，再用无菌棉拭子插入宫颈内，停5 s后旋动棉拭子采集宫颈分泌物，将棉拭子置入无菌管中，密闭送检。尖锐湿疣患者标本的采集用无菌棉拭子刮取包皮、尿道口、大小阴唇、阴道口和肛周赘生物组织液，密闭送检。

1.3 仪器与试剂 使用ABI7300基因扩增仪；HPV(6,11型)核酸检测试剂盒，HR-HPV(8个型)核酸检测试剂盒(包含16、18、31、33、45、52、56、58型)。试剂盒与质控品均为中山大学达安基因股份有限公司产品。

1.4 DNA提取及检测 向无菌管中加入1 mL灭菌生理盐水，涡旋震荡，挤干棉拭子。将全部液体转移到1.5 mL离心管中，13 800×g离心5 min，弃上清液，沉淀中加入50 μL DNA 提取液充分混匀，100℃恒温10 min，13 800×g离心5 min。根据试剂盒要求吸取2 μL上清液作为模板加入反应管中进行PCR反应。扩增参数及结果判定严格按照试剂盒说明书进行。

1.5 统计学方法 采用SPSS 15.0统计学软件进行数据分析，率的比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 5490例性病门诊就诊患者中有高危型HPV和低危型HPV单一感染的，也有重叠感染的，其中HPV(6,11型)阳性2016例，阳性率为36.72%。女性患者阳性753例(32.81%)，男性患者阳性1263例(39.53%)；HR-HPV(8个型)阳性1715例，阳性率为31.24%，女性患者阳性925例(40.31%)，男性患者阳性790例(24.73%)；HPV(6,11型)+HR-HPV(8个型)阳性768例，占13.99%，女性患者阳性358例(15.6%)，男性患者阳性410例(12.83%)。检测结果显示HPV(6,11型)阳性患者中，男性发病率高于女性，两者差异有统计学意义(P<0.01)，而HR-HPV(8个型)阳性患者中，女性发病率高于男性，两者差异有统计学意义(P<0.01)。5490例患者HPV(6,11型)、HR-HPV(8个型)感染情况见表1。

2.2 HPV感染的年龄分布及各年龄段的感染率 本研究中患者年龄主要集中在20～40岁，<20岁及>50岁的患者相对较少，各年龄段感染情况及构成比见图1、表2、表3。所有数据均采用SPSS15.0统计软件进行分析，经分析得出，不同年龄段女性HPV(6,11型)及HPV(8个型) 的感染率均有显著差异(P<0.05)，不同年龄段男性HPV(6,11型)及HPV(8个型) 的感染率均无统计学意义。

图1 各年龄段HPV感染情况对比图

表1 HPV-DNA检测结果 例

表2 男性HPV感染患者年龄分布表

表3 女性HPV感染患者年龄分布表

3 讨论

HPV能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖，临床上可分为高危型HPV和低危型HPV，其中低危型HPV感染尤其是HPV6型和HPV11型与外生殖器尖锐湿疣等良性病变有关[4]；高危型HPV持续性感染与子宫颈癌的发病及男性阴茎及肛周癌变密切相关[2]。随着社会发展人们性意识发生很大变化，初次性生活低龄化及多个性伴侣等不洁性行为的增加，加大了HPV的感染风险[5]。直接性接触为HPV主要传播途径[3，6]，现已严重威胁人们的身心健康。流行病学调查发现，HPV感染的不同型别与地区及人口有差异[7，8]，调查不同地区的感染情况，具有十分重要的临床价值。本文通过对2012年8月至2016年8月5490例来我院性病门诊就诊患者的泌尿生殖系统分泌物采用实时荧光定量PCR技术对HPV(6,11型)和HPV(8个型) 的DNA进行检测，通过本次研究的结果分析，我们发现男性更易感染低危型HPV而女性更易感染高危型HPV。山东地区女性HPV(6,11型)和HPV(8个型)的感染率随着年龄的变化均成“U”型分布，与既往国内外报道结果相符[9，10]，感染率高峰出现在20岁以下及大于50岁，年轻女性感染率高发与性生活年龄的提前以及年轻女性宫颈免疫系统未被致敏有关。50岁后妇女进入绝经期后，生殖道免疫功能下降，清除病毒能力下降，导致高感染率[11]。而男性HPV(6,11型)和HPV(8个型)的感染率随着年龄的变化无统计学差异。通过本次研究我们初步了解山东地区HPV感染情况，为今后临床对HPV的预防监控及治疗提供了科学依据。