紫草三黄栓抗炎、消肿、镇痛药效作用的研究

赵 媛， 万凯华, 翁幼武， 李 岩

(1新疆乌鲁木齐市中医医院药剂科, 乌鲁木齐 830000; 2新疆医科大学药学院, 乌鲁木齐 830011)

关健词： 药效学实验； 抗炎， 消肿； 镇痛

紫草三黄膏是我院临床使用的院内制剂，该药物由紫草、黄连、黄柏等多味药材组成，具有清热燥湿、消肿止痛、凉血止血、生肌敛疮、软化瘢痕的功效，在治疗肛肠疾病方面疗效较好[1,2]。紫草三黄栓是在其基础上进行二次开发而成的，通过系列研究，该药物工艺合理、质量稳定[3,4]，临床使用过程中具有疗效明显、安全性高等优点。本研究采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型、巴豆油致大鼠肛门肿胀模型、冰醋酸致小鼠扭体反应，考察紫草三黄栓的抗炎、消肿、镇痛作用，现报道如下。

1 材料与方法

1.1药品与试剂紫草三黄栓由乌鲁木齐市中医医院药研室自制(批号20160120)，马应龙痔疮栓(武汉马应龙药业集团股份有限公司，批号161210)蒸馏水、吡啶(上海强顺化工有限公司，批号20090330)、乙醚(国药集团化学试剂有限公司，批号20110421)、巴豆油(美国SIGMA公司，批号102566659)，二甲苯(天津市百世化工有限公司，批号20160920)，冰醋酸(天津市富宇精细化工有限公司，批号150925)，甲酰胺(美国SIGMA公司，批号101066119)，伊文思蓝(国药集团化学试剂有限公司，批号W20150705)

1.2仪器AB104-N型电子天平(上海梅特勒-托利多仪器有限公司)，J-HH-6A型恒温水浴锅(冠森生物科技有限公司)，318C型酶标仪(上海精密科学仪器有限公司)。

1.3实验动物昆明种小鼠，体质量(20.0±2.0)g，雌雄各半；Sprague-Dawley(SD)大鼠，体质量(190±30)g，雌雄各半，由新疆医科大学和新疆疾控中心地方病研究所实验动物中心提供，实验单位使用许可证编号：SYXK(新)2011-0001。

1.4方法

1.4.1 紫草三黄栓对二甲苯致小鼠耳廓肿胀作用的影响 取昆明种小鼠50只，雌雄各半，体质量(20.0±2.0) g, 随机分为5组，每组10只，分别为空白组(基质栓 0.65 g/kg)、对照组(马应龙痔疮栓0.65 g/kg)、实验(紫草三黄栓高1.30 g/kg、中0.65 g/kg、低0.33 g/kg)剂量组。将药物于温水浴中熔化，涂抹相应的剂量于小鼠右耳壳两面，每天1次，连续7 d。末次涂药后1 h，各鼠右耳给予二甲苯0.04 mL，1 h后处死小鼠，剪下双耳，用直径为8 mm打孔器打下相同体积、相同质量的左右耳片，初步评估耳片的肿胀度以及肿胀抑制率，计算公式为：耳片肿胀度=右耳片质量-左耳片质量；肿胀抑制率=(1-给药组平均肿胀度/基质组平均肿胀度)×100%。

1.4.2 紫草三黄栓对巴豆油所致大鼠肛门肿胀的影响 取50只SD大鼠，雌雄各半，体质量(190±30) g，随机分为5组，每组10只，分别为空白组(基质0.45 g/kg)、对照组(马应龙痔疮栓0.45 g/kg)、实验(紫草三黄栓高0.90 g/kg、中0.45g/kg、低0.23 g/kg)剂量组。把蒸馏水、吡啶、乙醚和巴豆油按 1∶4∶5∶10 的比例配制成混合液。实验组均用浸吸0.16 mL巴豆油混合液的棉球插入乙醚浅麻醉后的大鼠肛门内，将大鼠头朝上提起直立，10 s后拔出。在直肠粘膜接触巴豆油后即通过直肠途径给予治疗药物，6 h后将其处死，以肛门皮毛边缘为起点剪取1.5cm的直肠并取出周围结缔组织，称重后置于80 ℃的干燥箱处理16 h，随后称取干重，并计算肛门肿胀的程度，计算公式为：肛门肿胀率=(1-直肠干重/直肠湿重)×100%。

1.4.3 紫草三黄栓对小鼠醋酸致痛扭体的影响 取昆明种小鼠50只，雌雌各半，体质量(20.0±2.0)g，随机分为5组，每组10只，分别为空白组(基质 0.45 g/kg)、对照组(马应龙痔疮栓0.45 g/kg)、实验(紫草三黄栓高0.90 g/kg、中0.45 g/kg、低0.23 g/kg)剂量组。连续直肠给药 7 d，末次给药30 min后腹腔注射0.6%冰醋酸0.2 mL/只，观察小鼠的扭体频率，计算小鼠扭体抑制率，计算公式为：扭体抑制率=(1-给药组扭体次数/基质组扭体次数)×100%。

2 结果

2.1紫草三黄栓对二甲苯致小鼠耳廓肿胀作用的影响与空白组比较，实验高、中、低剂量组小鼠耳肿胀程度缓解，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 紫草三黄栓对小鼠耳肿胀的影响

注：与空白组比较，*P<0.05。

2.2紫草三黄栓对巴豆油所致大鼠肛门肿胀的影响与空白组比较，紫草三黄栓中、高剂量组大鼠肛门肿胀率降低，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 紫草三黄栓对巴豆油致大鼠肛门肿胀的消肿作用

注： 与空白组比较，*P<0.05。

2.3紫草三黄栓对小鼠醋酸致痛扭体实验影响与空白组)比较，紫草三黄栓低、中、高剂量组能够减少小鼠扭体次数，差异有统计学意义(P<0.05),见表3。

表3 紫草三黄栓剂对小鼠醋酸致痛扭体影响

注：与空白组比较，*P<0.05。

3 讨论

中医理论认为痔肿痛是由于气血经络不通而致,痔病患者因湿热下注魄门，湿浊结滞而肿，湿热阻滞气血运行，血脉闭阻而生痛[5]。 紫草三黄栓中的紫草凉血、止血、解毒，同时具有抗炎抗菌作用[6-7]；黄连、黄柏性味苦寒，善于清热解毒消肿，且兼具活血化瘀止痛之功，可有效改善局部血流异常，促进炎性水肿消退，从而为组织修复、创口愈合创造有利条件[8]；冰片有辛香走窜之性，通诸窍，能渗透于肌肤腠理，引诸药直达病所，使药物能最大程度地发挥药效。同时，冰片又能消肿止痛，具有去腐生肌的特点[9]。诸药共奏活血化瘀、消肿止痛、生肌敛疮之功效。

炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子所发生的防御反应,在炎症反应过程中，受伤组织及血液可产生并释放具有致炎作用的细胞因子、炎性介质、趋化因子等多种化学活性物质，从而引起局部红、肿、热、痛等临床表现[10]。本实验采用二甲苯致小鼠耳肿胀、巴豆油致大鼠肛门肿胀，巴豆油致大鼠肛门毛细血管通透性模型进行了抗炎活性的筛选，研究表明紫草三黄栓有较好的抗炎活性。目前我们正在通过建立角叉菜胶致小鼠右后足跖肿胀模型来检测紫草三黄栓对模型体内PGE2、NO、SOD、MDA水平的影响，从而进一步揭示其抗炎作用机理。马应龙痔疮栓在治疗肛肠疾病方面效果显著，有较好的抗炎、镇痛、消肿、促进创面愈合等功效[11-12]，是临床肛肠疾病的首选药物，因此本次研究采用该药物作为对照组。与对照组药物相比，紫草三黄栓具有制备方法简单，制备周期短，成本低、疗效好等优点，值得进一步研究和推广。本研究为紫黄三黄栓的临床应用提供了理论依据，为该药物的进一步开发奠定基础。