HPV-DNA联合肿瘤标志物检测合并阴道镜检查对宫颈癌的诊断价值

牛志莹　岳　磊

宫颈癌是临床常见的妇科恶性肿瘤，在我国的发病率和死亡率较高，每年约有3万以上(约占世界30%)女性死于该病[1]。宫颈癌的发病过程较为漫长，从子宫颈上皮瘤变到出现原位癌、早期癌和浸润癌需要10～20年时间。因此，尽早发现病变则可以有效预防宫颈癌[2]。但宫颈癌的早期临床症状并不明显，检查时易发生漏诊、误诊。目前，用于宫颈癌的诊断方法有肿瘤标志物检测、HPV-DNA检测和阴道镜检查等[3]。为提高早期宫颈癌的早期筛查率，本研究探讨了HPV-DNA检测联合肿瘤标志物并阴道镜检查在宫颈癌诊断中的价值。具体报告如下。

1　资料与方法

1.1　一般资料

以2012年7月至2017年6月于我院就诊的180例疑似宫颈癌患者为研究对象。年龄26～65岁，平均(38.2±8.4)岁。排除免疫系统疾病或内科慢性疾病并发症者。研究经患者及其家属知情并签署同意书，并获医院医学伦理委员会批准。

1.2　检测方法

所有患者均行肿瘤标志物检查、HPV-DNA基因分型检查、阴道镜检查及病理学检查。联合检查以其中一种达到阳性标准则判定为阳性。以病理检查为金标准。

肿瘤标志物检测：抽取患者空腹静脉血3 ml，4 000 r/min离心3 min，取上清液，于-30 ℃下保存待测。采用电化学发光法检测鳞状细胞癌抗原(SCC)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原19-9(CA19-9)和细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)。阳性判定标准为：SCC≥1.5 ng/ml，CA125≥35 mU/ml，CA19-9≥37 mU/ml，CYFRA21-1≥3.3 ng/ml。其中一种达到阳性标准则判定为阳性。

HPV-DNA分型检查：于患者月经干净后3～7 d，采样前24 h内，无性生活，未冲洗阴道，未行阴道检查和未经阴道用药等的情况下进行宫颈样本采集。于无菌条件下采集样本保本并于标本液中保存。采用PCR-反向点杂交法进行检测HPV16等高位HPV亚型，包括HPV-DNA提取、PCR扩增、杂交、洗膜和显色等步骤。通过与HPV阳性和阴性对照进行阳性和阴性的判定。

阴道镜检查及改良Reid电子阴道镜评分(RCI评分)和阴道镜下宫颈活组织检查：于阴道镜下在宫颈表面涂抹碘液显示病灶，观察病灶的颜色、边界、形态、血管结构和碘反应。用RCI评分进行诊断[4]：0分为正常或慢性宫颈炎，1～2分为轻度不典型增生(CINⅠ)，3～4分为中度不典型增生(CINⅡ)，≥5分为重度不典型增生(CINⅢ)。碘反应于阳性部位取包括宫颈基底层的活组织，用4%甲醛溶液固定送检。活检异常结果分为CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌。

1.3　统计学方法

应用SPSS 18.0分析数据。计数资料以率表示，用卡方检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2　结果

2.1　联合检查方法阳性结果比较

对于CIN，联合检查的阳性率均略高于各单项检查，肿瘤标志物、HPV-DNA和阴道镜联合检查的阳性率均高于各单项检查和两两联合检查，且与肿瘤标志物检测阳性率差异具有统计学意义(P<0.05)；对于宫颈癌，各种方法的阳性率未见差异(P>0.05)；肿瘤标志物、HPV-DNA和阴道镜联合检查的总阳性率高于各单项检查和两两联合检查，且与各单项检查、肿瘤标志物联合HPV-DNA检查和肿瘤标志物联合阴道镜检查结果差异具有统计学意义 (P<0.05)，见表1。

表1　各检查方法阳性结果比较(例，%)

注：与肿瘤标志物+HPV-DNA+阴道镜比较，*为P<0.05。

2.2　不同检测方法的检查结果评价比较

肿瘤标志物、HPV-DNA和阴道镜联合检测的灵敏度、特异度和准确度高于各单项检查和两两联合检查(P<0.05)，见表2。

表2　不同检测方法诊断宫颈癌病变的价值比较/%

注：与肿瘤标志物+HPV-DNA+阴道镜比较，*为P<0.05。

3　讨论

宫颈癌既是严重威胁女性健康和生命的恶性肿瘤，也是可以通过早发现、早诊断和早治疗的1种可预防和可治愈的疾病[5]。HPV的感染与宫颈炎、宫颈癌前病变和宫颈癌具有密切的关系。但相关研究显示，HPV阳性的例数和含量表现为宫颈炎<宫颈癌前病变<宫颈癌[6]。检测血清肿瘤标志物以检查宫颈异常细胞的敏感性较高，与其它检查方法结合可以显著提高宫颈癌的检出率[7]。有文献报道宫颈癌患者血清中的SCC、CA125、CA19-9和CYFRA21-1会有不同程度的阳性表达，并且阳性率会随着病情的发展而升高[8]。阴道镜检查高灵敏度和准确度以及重复性好等优点，可作为大规模宫颈癌筛查的1种新方法，常与细胞学和组织学检查相结合以提高诊断的准确度[9]。

本研究采用肿瘤标志物检测、HPV-DNA检测和阴道镜检查联合检查进行宫颈癌的诊断。结果显示，对于CIN，联合检查的阳性率均略高于各单项检查，并且肿瘤标志物、HPV-DNA和阴道镜联合检查的阳性率均高于各单项检查和两两联合检查，提示联合检查可以提高宫颈癌前病变的阳性检出率[10]。对于宫颈癌，各种方法的阳性率未见差异，可能是因为研究纳入的病例数量较少所致。肿瘤标志物检测、HPV-DNA检测和阴道镜检查联合检查的灵敏度、特异度和准确度高于各单项检查和两两联合检查。报道指出，宫颈癌患者血清中肿瘤标记物如SCC、CA125、CA19-9和CYFRA21-1阳性率会随着病期的发展的增加[11]，正常宫颈和宫颈炎症妇女亦存在HPV感染[12]，虽然在阴道镜下活检诊断在多数情况下可视为“金标准”，但也会受检查对象和检查者的技术等影响，并且由于CIN的多中心源性的特点也使得阴道镜的准确度大大降低[13]。诸多原因引起各单项检查易检查出现误断和漏诊。因此，联合检查可以充分利用各单项检查的优点并弥补不足，以提高诊断准确度[14]。

综上，肿瘤标志物检测、HPV-DNA检测和阴道镜检查联合检查较单项和两量联合检查诊断宫颈癌能显著提高检查准确度，对宫颈癌前病变筛查的优势明显，但有必要扩大样本量以探讨对宫颈癌的筛查优势。