利巴韦林联合聚乙二醇干扰素α－2a对慢性丙型肝炎患者免疫功能的影响

刘 翔，张 蓓

（湖北医药学院附属人民医院肝病科，湖北 十堰 442000）

慢性丙型肝炎（chronic hepatitis C，CHC）是由丙型肝炎病毒（HCV）感染引起的病毒性肝炎，主要通过血液传播[1]。目前我国感染HCV的患者约2亿，其中CHC占60% ～70%，CHC可发展为肝硬化，已成为威胁人类健康的公共卫生问题[2]。目前，临床治疗CHC以抗病毒为主[3]。聚乙二醇干扰素 α －2a（PEG－IFNα －2a）是常用的抗病毒药物，能通过调节免疫功能，增加机体抗病毒能力或直接抑制病毒复制[4]。利巴韦林是目前临床广泛用于病毒性疾病的防治药物，对治疗CHC具有重要作用。相关资料证明，两者联用治疗CHC疗效显著[5]。本研究中观察了利巴韦林联合PEG－IFNα－2a治疗CHC对血清可溶性自杀相关因子（sFas）、可溶性自杀相关因子配体（sFasL）水平及T细胞亚群的影响。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

纳入标准：符合2004年中华医学会肝病学分会和传染病与寄生虫病学会制订的《中国丙型肝炎防治指南》中的诊断标准，且均经相关影像学检查确认；3个月内未服用任何激素及干扰素类药物。

排除标准：合并肝癌、肝硬化等其他肝病。

病例选择与分组：我院选择2015年2月至2016年2月收治的CHC患者88例，根据治疗方式的不同分为观察组和对照组，各44例。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性，详见表1。

表1 两组患者一般资料比较（n＝44）

1.2 方法

对照组患者采用常规治疗（护肝、退黄、调整饮食等）联合利巴韦林片（重庆科瑞制药＜集团＞有限公司，国药准字 H20073882，规格为每片100 mg）口服，每次0.9～1.2 g，每天 3 次；观察组患者在此基础上联合PEG－IFNα－2a注射液（上海罗氏制药有限公司，国药准字 J20070055，规格为每支 180 μg ∶0.5 mL）肌肉注射，每次 180 μg，每周 1次。两组患者均治疗 24周，随访48周。

1.3 观察指标及疗效判定标准

治疗前后采集被检者空腹肘静脉血10 mL，其中4 mL加肝素抗凝，剩余血液以1 500 r/min速率室温下离心10 min，提取上清液，并保存在 －20℃冰箱中待测；使用美国Coulter公司流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群；使用DIRUI－CS400b全自动生化分析仪检测肝功能指标；血清sFas及sFasL采用双抗体夹心法检测。血清 sFas 检测标本按照 2，1，0.5，0.25，0.125，0.062，0.031 25，0.038 75，0 ng/mL 质量浓度稀释准备品，血浆中sFas含量低的不再稀释；血清sFasL检测标本 按 照 2.5，1.25，0.625， 0.312 5， 0.155， 0.077 5，0.038 75，0 ng/mL质量浓度稀释标准品，血浆中 sFasL含量低的则不再稀释。

临床疗效评价标准[6]：早期病毒学应答（EVR），治疗12周时，检测血清HCV－RNA定性呈阴性；治疗结束时病毒学应答（ETVR），治疗结束时定性检测血清HCV－RNA呈阴性；持续病毒学应答（SVR），治疗结束后随访至48周时定性检测血清HCV－RNA呈阴性；无应答及部分应答（NR），治疗结束时定性检测血清HCV－RNA仍呈阳性。

1.4 统计学处理

采用SPSS 18.0软件进行分析，计量资料采用表示，行 t检验；计数资料采用百分率表示，行 χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

结果见表2至表6。

表2 两组患者临床疗效比较[例（%），n＝44]

表3 两组患者血清sFas及sFasL水平比较（，ng/mL，n＝44）

表3 两组患者血清sFas及sFasL水平比较（，ng/mL，n＝44）

注：与本组治疗前比较，*P＜0.05；与对照组治疗后比较，＃P ＜0.05。表 4、表 5 同。

组别sFas sFasL观察组对照组治疗前1.4 ± 0.2 1.4 ± 0.3治疗后0.3 ± 0.1*＃0.7 ± 0.2*治疗前0.4 ± 0.2 0.3 ± 0.1治疗后0.1 ± 0.1*＃0.2 ± 0.1*

表4 两组患者T细胞亚群比较（，n＝44）

表4 两组患者T细胞亚群比较（，n＝44）

组别 时间观察组 治疗前治疗后对照组 治疗前治疗后CD3＋(%)53.4 ± 6.2 74.5 ± 10.5*＃52.7 ± 5.1 66.8 ± 14.4*CD4＋(%)25.1 ± 5.2 51.2 ± 6.5*＃26.8 ± 4.2 32.5 ± 8.5*CD8＋(%)36.3 ± 8.9 15.6 ± 3.1*＃34.4 ± 3.1 26.8 ± 5.6*CD4＋/CD8＋1.6 ± 0.9 1.0 ± 0.4*＃1.8 ± 0.8 1.5 ± 0.3*

3 讨论

HCV为隐匿性感染，可导致肝脏慢性炎症坏死与纤维化，且部分患者还可进展为肝硬化甚至肝癌[7]。近期资料表明，未来20年内与HCV感染有关的死亡率将继续增加，对患者的生命安全带来严重影响。HCV主要采用抗病毒治疗[8]。利巴韦林能有效抑制病毒的产生，从而改善丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平，但稳定性不高，治疗后HCV－RNA转阴率不高，导致复发率较高，故临床通常不单独使用[9]。干扰素是较常用的抗病毒治疗药物，能与肝细胞表面受体结合，有利于肝细胞的分泌，从而起到抑制病毒的作用[10]，但普通类型干扰素对CHC患者临床疗效欠佳。PEG－IFNα－2a是由聚乙二醇蛋白与干扰素α－2a合成而得，有水溶性较高、惰性、无毒等特点，同时还有延长血清半衰期的作用，减缓新陈代谢，在聚乙二醇蛋白与干扰素α－2a共同作用下提高生物学活性。利巴韦林联合 PEG－IFNα－2a治疗CHC临床疗效好，能有效提高患者的免疫功能，对患者的免疫应答起着调控作用[11－12]。本研究结果显示，观察组患者ETVR及SVR比例明显高于对照组（P＜0.05），且肝功能改善情况明显高于对照组，证明利巴韦林联合PEG－IFNα－2a可有效提高患者的肝功能，抑制肝纤维化进展，且不良反应少，安全性高。

表5 两组患者肝功能比较（，n＝44）

表5 两组患者肝功能比较（，n＝44）

组别TBil（μmol/L） ALT（U/L） ALB（g/L） PTA（% ）观察组对照组治疗前43.5 ± 10.2 42.0 ± 10.5治疗后22.3 ± 7.1*＃30.4 ± 6.5*治疗前145.8 ± 23.6 146.3 ± 24.3治疗后34.6 ± 11.6*＃65.8 ± 6.5*治疗前115.9 ± 19.7 116.9 ± 16.6治疗后38.6 ± 8.4*＃53.6 ± 11.2*治疗前55.9 ± 11.7 54.8 ± 10.5治疗后80.6 ± 15.8*＃60.5 ± 12.4*

表6 两组患者不良反应发生情况比较[例（%），n＝44]

近些年，随着免疫学的发展，整体免疫调控网络失衡理论在慢性HCV进展中的作用逐步得到肯定，并逐渐得到完善。T淋巴细胞为细胞免疫的主要组成部分，CD4＋T细胞活化后通过产生多种细胞因子，CD8＋T细胞活化、增殖，诱导B细胞产生抗体，对免疫应答的调控起着中心作用。本研究结果显示，治疗后，观察组患者CD3＋和 CD4＋表达水平显著高于对照组（P ＜ 0.05），CD8＋和 CD4＋/CD8＋表达水平显著低于对照组（P ＜0.05），表明聚乙二醇干扰素α－2b可提高CHC患者的免疫力，同时调节其免疫力失调状态；治疗后，观察组患者血清sFas及sFasL表达水平显著低于对照组（P＜0.05），提示血清sFas及FasL水平与CHC患者的免疫功能密切相关。可能是通过抑制CHC患者肝细胞或其他表达膜性FasL细胞的基质金属蛋白酶活性，抑制sFasL产生，减少 sFasL与 sFas结合的机会，而 sFas可中和FasL，封闭免疫活性细胞FasL的作用，减轻其对肝细胞的致凋亡作用，从而控制患者免疫功能。

综上所述，CHC患者存在明显的免疫功能失衡情况，而利巴韦林联合PEG－IFNα－2a治疗能有效调整患者的免疫功能，促进病情康复。血清sFas和sFasL水平可能是导致患者免疫功能下降的重要原因。但本研究也存在一定缺陷，如有临床研究表明增加利巴韦林剂量可提高临床疗效[13]，但本研究未涉及，因此可加大研究样本量及延长时间进行进一步研究。

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