结直肠腺癌中DNA结合/分化抑制蛋白-1和血管内皮生长因子-C的表达及意义

刘 宁 缪 巍 燕 速 马晓明 杨贤达

(青海大学附属医院胃肠肿瘤外科，青海 西宁 810001)

结直肠腺癌主要见于中老年人，病变形成后的主要播散途径是淋巴道播散〔1〕。近年人们关注肿瘤间质的淋巴结管生成，认为淋巴管新生与淋巴管生成因子有关，最重要的淋巴管生成因子是血管内皮生长因子(VEGF)-C，其可以与受体结合，促进间质的淋巴管新生，为转移提供必要的结构〔2,3〕。DNA结合/分化抑制蛋白(ID)-1是近年发现的一种分化抑制因子，通过抑制环-螺旋-环转录因子的作用调节肿瘤细胞的增殖及转移〔4〕。本文关注结直肠腺癌中ID-1和VEGF-C的表达特点，探讨其临床价值。

1 资料与方法

1.1临床资料 2016年1～12月青海大学附属医院住院治疗、经病理学确诊并行手术根治的患者67例为观察组。纳入标准：①临床资料完整；②符合WHO中的诊断标准；③患者或家属签署知情同意书。排除标准：①伴有其他器官恶性肿瘤；②林奇综合征；③肠道疾病手术史；④术前有放、化疗史。其中男35例，女32例，年龄46～86岁，平均57.3岁。上述患者标本中距肿物边缘>8 cm的非肿瘤性结肠黏膜组织45例为对照组。其中男23例，女22例，年龄47～81岁，平均58.3岁。两组性别、年龄比较差异无统计学意义，具有可比性。

1.2ID-1和VEGF-C表达检测 两组均应用免疫组化二步法检测ID-1和VEGF-C的表达。ID-1和VEGF-C试剂均为标准的浓缩液，先进行预实验，按不同比例进行稀释，选择染色效果最好的浓度用在正式实验，即ID-1配比浓度是1∶50，VEGF-C配比浓度是1∶100。正式实验均由同一技师进行操作，二氨基联苯胺(DAB)显色，做好质控工作。

1.3ID-1和VEGF-C结果 ID-1和VEGF-C的阳性表达部位均为肿瘤细胞的细胞质(部分病例的间质中的弱表达不计为阳性)。着色强度：无着色为0分；弱着色为1分，中等程度着色为2分，强着色为3分。选择上皮细胞分布区且染色较为明显的区域进行计数，共选择2个高倍视野，取平均值，以<5%为0分，≥5%且<10%为1分，≥10%且<30%为2分，≥30%且<50%为3分，以≥50%为4分。按着色强度和阳性率的评分之和进行评定。以≤3分为阴性，>3分为阳性。

1.4统计学方法 采用SPSS17.0统计软件进行χ2检验和线性相关分析。

2 结 果

2.1两组中ID-1和VEGF-C表达的比较 观察组ID-1和VEGF-C表达的阳性率明显高于对照组(P<0.001)。见表1。

表1 两组中ID-1和VEGF-C阳性表达的比较〔n(%)〕

2.2观察组中ID-1和VEGF-C的阳性率在不同临床特征分组中的比较 ID-1和VEGF-C表达与病变的增殖指数、脉管累犯和淋巴结转移密切相关，ID-1表达与肿瘤分化程度和浸润深度密切相关。见表2。

2.3观察组中ID-1和VEGF-C表达的相关性 ID-1和VEGF-C表达呈正相关(r=0.54，P=0.041)。

表2 ID-1和VEGF-C在观察组不同临床特征中表达阳性率的比较〔n(%)〕

3 讨 论

结直肠上皮细胞发生异型增生、癌变后，对肌层和周围组织进行侵犯，形成浸润性腺癌〔5〕。肿瘤多为高、中分化的，具有腺管样结构，部分病例由于异型增生明显，可以表现为低分化，并伴有黏液腺癌形成〔6〕。肿瘤间质可以观察到比正常结肠黏膜间质更多的淋巴管，这些淋巴管可以为肿瘤细胞进入淋巴循环提供直捷通路〔7〕。淋巴管在肿瘤进展时是由淋巴管内皮细胞增殖后形成的，其中促进增殖的因子最常见的是VEGF-C和VEGF-D，二者也被称为淋巴管生长因子〔8,9〕。VEGF-C是最早发现的，也是作用最强的，其作用途径是通过VEGF受体(VEGFR)2实现的，当VEGF-C和VEGFR2结合后，使淋巴管内皮细胞的DNA复制，细胞增生繁殖，同时在淋巴液的冲击作用下形成管腔，使淋巴液在管腔中流动，进入淋巴管的肿瘤细胞通过此途径形成转移性播散〔10,11〕。ID-1基因具有癌基因的特征，被认为有“永生化”的特征，其具有阻止细胞分化、促进细胞增殖的作用〔12,13〕。也有研究认为ID-1过度表达可以延迟细胞老化〔14〕。近年研究显示ID-1高表达可以促进血管生成，同时对淋巴管生成也有一定的调节作用，ID-1调节转移的过程主要是对脉管生成的促进作用实现的〔15〕。本研究结果提示ID-1和VEGF-C二者具有癌基因样的作用，是促进肿瘤形成的重要因素。ID-1和VEGF-C表达上调后可以引起肿瘤细胞的失控性增殖、脉管侵犯和淋巴道播散的形成。ID-1可以调节肿瘤的分化和邻近组织直接蔓延。ID-1升高时可以调节腺癌细胞的分化，而分化作为细胞在发育进程中的表达过程，其也是细胞生长过程中不同时期细胞形态的反映，ID-1表达上调，细胞处于幼稚阶段，肿瘤细胞异型性明显，与起源组织的差别小，核染色深，此类细胞具有高度增殖的特征。本文结果提示，ID-1和VEGF-C二者具有正向协同作用，ID-1对淋巴管生成因子具有促进作用〔16〕，因此ID-1的作用可能具有多向性。ID-1可能是上游基因，调节VEGF-C、表皮生长因子受体和磷酸肌醇-3-激酶/蛋白激酶B等信号通路，引起细胞增殖和迁移〔17〕。但是否ID-1/VEGF-C/VEGFR-3是一个淋巴管生成的通路有待更多实验证实。

4 参考文献

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